第三章病毒和亚病毒

1、甲型甲型H1N1 病毒是一类超显微、无细胞结构、具有高病毒是一类超显微、无细胞结构、具有高度侵染性、专性活细胞寄生的大分子微生物。度侵染性、专性活细胞寄生的大分子微生物。病毒的概念病毒的概念电子显微镜下才能观察到，一般能通过细菌滤器；电子显微镜下才能观察到，一般能通过细菌滤器；没有细胞构造。没有细胞构造。主要成分是核酸与蛋白质；只含一种核酸；主要成分是核酸与蛋白质；只含一种核酸；无产能、蛋白质和核酸合成酶系；无产能、蛋白质和核酸合成酶系；以核酸和蛋白质等以核酸和蛋白质等“元件元件”的装配实现繁殖；的装配实现繁殖；离体条件下，以无生命的生物大分子，有侵染活力；离体条件下，以无生命的生物大分子，有

2、侵染活力；对一般抗生素不敏感，而对干扰素敏感；对一般抗生素不敏感，而对干扰素敏感；有些病毒的核酸能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏有些病毒的核酸能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染。性感染。 病毒的特性病毒的特性研究方法研究方法（一）病毒的大小（一）病毒的大小病毒粒子的大小范围病毒粒子的大小范围衣原体衣原体痘病毒痘病毒疱疹病毒疱疹病毒流感病毒流感病毒 小小RNA病毒病毒1. 1. 典型病毒粒的构造典型病毒粒的构造Virus particle：指成熟的、结构完整和有感染：指成熟的、结构完整和有感染性的单个病毒。性的单个病毒。2.2.病毒粒的对称性病毒粒的对称性 病毒衣壳的衣壳粒排列具有高度对

3、称性。病毒衣壳的衣壳粒排列具有高度对称性。螺旋对称（螺旋对称（ Helical viruses Helical viruses ）二十面体对称（二十面体对称（ Polyhedral viruses Polyhedral viruses ）复合对称（复合对称（ Complex viruses Complex viruses ）Helical virusesPolyhedral viruses以腺病毒为代表来说明以腺病毒为代表来说明大肠杆菌噬菌体大肠杆菌噬菌体T4T4是复合对称病毒的代表是复合对称病毒的代表Complex viruses刺突tail pinsPhaga, bacterioohaga

4、95nm95nmheadnecktail（24环）尾丝(tail fibers)65nm包膜：覆盖在核衣壳外的一层含蛋白质或糖蛋白包膜：覆盖在核衣壳外的一层含蛋白质或糖蛋白的的类脂类脂双层膜。双层膜。包膜包膜Enveloped viruses（四）（四） A virus can have either DNA or RNA， but never both !病毒的核酸病毒的核酸 植物病毒绝大多数含植物病毒绝大多数含RNARNA。动物病毒一部分含动物病毒一部分含DNADNA，一部分含，一部分含RNARNA。细菌病毒则普遍含细菌病毒则普遍含DNADNA。真菌病毒绝大多数含真菌病毒绝大多数含RNAR

5、NA。 General Features of Virus ReproductionAttachment of phage to host cell After a chance collision between phage particles and bacteria, an attachment site on the virus attaches to a complementary receptor site on the bacterial cell. u吸附机理：尾丝尖端与受体发生共价结合。吸附机理：尾丝尖端与受体发生共价结合。u影响因素：噬菌体数量；阳离子；辅助因子；温度影响因

6、素：噬菌体数量；阳离子；辅助因子；温度Penetration During the process of penetration, the bacteriophages tail releases an enzyme, phage lysozyme, which breaks down a portion of the bacterial cell wall. then the bacteriophage injects its DNA (nucleic acid) into the bacterium. 增殖增殖(replication)(replication)蛋白质的合成蛋白质的合成核酸

7、的复制核酸的复制Biosynthesis of viral components:时序性时序性病毒核酸复制病毒核酸复制病毒核酸链入寄主核酸链病毒核酸链入寄主核酸链Maturation and Release不同病毒的释放比较不同病毒的释放比较不带胞膜的病毒不带胞膜的病毒带胞膜的病毒带胞膜的病毒噬菌体效价的测定噬菌体效价的测定斑点试验法斑点试验法液体稀释管法液体稀释管法双层平板法双层平板法单层平板法单层平板法快速玻片法快速玻片法45C培养培养涂布菌液液涂布菌液液点样点样 噬菌斑噬菌斑 斑点试验法斑点试验法液体稀释管法液体稀释管法试样（试样（ 未知效价的噬菌体液）未知效价的噬菌体液）培养液和宿主细

8、胞培养液和宿主细胞 计数管中完整宿主细胞数计数管中完整宿主细胞数（定时取样对活细胞计数）（定时取样对活细胞计数）噬菌体数噬菌体数=原细胞数原细胞数 活细胞数活细胞数双层平板法双层平板法琼脂平板琼脂平板菌液菌液+噬菌体试样噬菌体试样+琼脂培养基琼脂培养基培养培养10天天计数噬菌斑计数噬菌斑噬菌斑数噬菌斑数=试样中噬菌体数试样中噬菌体数快速玻片法快速玻片法试样试样+宿主细胞宿主细胞 +琼脂培养基琼脂培养基低倍镜下计数噬菌斑低倍镜下计数噬菌斑充分混匀充分混匀短期培养短期培养布在灭菌玻片上布在灭菌玻片上噬菌体增殖规律的描述方法噬菌体增殖规律的描述方法以培养时间为横坐标，以噬菌斑数为以培养时间为横坐标，

9、以噬菌斑数为纵坐标，绘出的曲线为纵坐标，绘出的曲线为。即定。即定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。包量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。包括：括：潜伏期、裂解期和平稳期潜伏期、裂解期和平稳期。潜伏期潜伏期 指噬菌体的核酸侵入宿主细胞后至第一指噬菌体的核酸侵入宿主细胞后至第一个成熟噬菌体粒子装配前的一段时间。个成熟噬菌体粒子装配前的一段时间。隐晦期隐晦期 指细胞内处于复制噬菌体核酸和合成其蛋白指细胞内处于复制噬菌体核酸和合成其蛋白质衣壳的阶段。质衣壳的阶段。-无侵染性的病毒粒子存在无侵染性的病毒粒子存在胞内累积期胞内累积期 指细胞内开始装配噬菌体粒子至潜伏期指细胞内开始装配噬菌体粒子至潜伏期末

10、，可用电镜观察到。末，可用电镜观察到。-侵染性的病毒粒子出现，侵染性的病毒粒子出现，但细胞没有破裂但细胞没有破裂p裂解期裂解期 从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞裂解完毕所经历的时间。裂解完毕所经历的时间。p平稳期平稳期 指感染后的宿主细胞已全部裂解，溶液中噬指感染后的宿主细胞已全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高点的时期。菌体效价达到最高点的时期。裂解量裂解量-每种噬菌体侵入敏感细胞，平均每个细胞每种噬菌体侵入敏感细胞，平均每个细胞最后能装配完成和释放出的噬菌体数称为裂解量，它最后能装配完成和释放出的噬菌体数称为裂解量，它是相对固定的。是相对固定的。温

11、和噬菌体的存在形式温和噬菌体的存在形式溶源菌溶源菌细菌的溶源性具有遗传性细菌的溶源性具有遗传性溶源菌对同源噬菌体具有免疫性溶源菌对同源噬菌体具有免疫性溶源性细菌在培养中不易被查觉溶源性细菌在培养中不易被查觉非溶源细胞非溶源细胞自发裂解和诱导裂解：有少数噬菌体可自发或自发裂解和诱导裂解：有少数噬菌体可自发或诱发裂解宿主细胞变成烈性噬菌体诱发裂解宿主细胞变成烈性噬菌体溶源性细胞可获得一些新的生理特性溶源性细胞可获得一些新的生理特性复愈复愈:溶源菌溶源菌失去前噬菌体失去前噬菌体烈性噬菌体与温和噬菌体生活史的比较烈性噬菌体与温和噬菌体生活史的比较溶源菌的表示及检测方法溶源菌的表示及检测方法E.coli K12() 表示一株带有表示一株带有前噬菌体的大肠杆前噬菌体的大肠杆菌菌K12K12溶源菌株。溶源菌株。将少量溶源菌与大量的敏感性指示菌相混合，然将少量溶源菌与大量的敏感性指示菌相混合，然后其噬菌斑的形状。后其噬菌斑的形状。埃博拉病毒埃博拉病毒病毒与癌症