图像定量分析系统(ICM)在骨巨细胞瘤DNA含量检测中的应用

1、    图像定量分析系统(ICM)在骨巨细胞瘤DNA含量检测中的应用          摘要：目的研究骨巨细胞瘤DNA含量和该瘤各级别的关系。方法对36例骨巨细胞瘤石蜡包埋标本Feulgen染色后，用Video Pro32彩色像分析系统对它们的核DNA进行定量分析。结果发现Jaffe氏骨巨细胞瘤的病理分级与核DNA指数及各种倍体分布类型之间无显著相关。在各级别骨巨细胞瘤中均有非整倍体例数检出，提示了该肿瘤的潜在恶性。结论从DNA定量分析结果上看，存在有恶性巨细胞瘤。

2、关键词：骨巨细胞瘤；病理分级；DNA；像细胞计分类号：R738.1文献标识码：A文章编号：1000-8578(2000)02-0101-02Study on the Nuclear DNA Content in the Giant Cell Tumor of Bone by Image CytometerZHENG Wei,HUANG Jian-wen（Dept.of Pathol,Fujian Medical University,Fuzhou 350004,China）Abstract:36 giant cell tumor of bone(GCT) on paraffin-embeded

3、 specimens were stained by Feulgen.Then the nuclear DNA content of them were measured by “Video Pro 32”Colour image analysis system.The results showed that Jaffes pathologic grades of GCT was not significant difference in DNA index and various DNA ploidy.GCT of various grades were found some cases o

4、f aneuploid.It pointed out the tumor was latent malignancy.The results of quantitative analysis of DNA showed that there was malignant giant cell tumor in GCT.Key words:Giant cell tumor of bone;Pathologic grades;DNA;Image cytometer骨巨细胞瘤在我国是颇常见的骨肿瘤，具有局部侵袭性及复发倾向。该瘤组织中有大量多核巨细胞存在，但目前公认本瘤真正的瘤细胞是在巨细胞之间的基质

5、细胞1。根据单核基质细胞形态和多核巨细胞数量，Jaffe氏将本瘤分为三级。本文旨在研究这一病理学分级和瘤细胞DNA含量的关系。1材料和方法1.1材料36例骨巨细胞瘤标本均为手术切除后经10%福尔马林固定，石蜡包埋处理的组织。按Jaffe氏病理分级法，级7例，级23例，级6例。1.2方法各蜡块经4m厚切片，进行Feulgen染色。染色后的切片，置于(X40)物镜下，对所测细胞进行准确定位后，由彩色摄像机提取细胞像输入Video Pro32彩色像分析系统(澳大利亚产品)，进行处理。最后得出肿瘤细胞核DNA指数(DI)值，并用计算机统计出二倍体(2C)、三四倍体、五倍体和超五倍体细胞各占该病例病变细

6、胞的百分数2。2结果各级骨巨细胞瘤DNA指数、DNA倍体类型和非整倍体例数分别见表1，2，3。表1各级骨巨细胞瘤DNA指数检测结果(±s)级别例数DNA指数(DI)71.2123±0.0874231.2696±0.302661.3346±0.5667表2各级骨巨细胞瘤倍体类型(±s%)级别例数2C34C5C>5C753.56±4.0741.25±2.863.78±1.611.41±2.092353.44±20.4538.38±13.84.85±6.923.33±

7、;4.77655.06±31.532.67±16.335.61±7.056.67±12.00表3各级骨巨细胞瘤非整倍体例数级别例数2C数非整倍体例数743231013633虽然随着病理分级增高，DI均值亦增高(表1)，但经t检验各级别间差异均无显著性(P>0.05)。从倍体类型(表2)，各级骨巨细胞瘤DNA倍体，均有检测到5C和>5C细胞，这两种类型倍体百分率均值，随着病理分级增高而增高，但经t检验，它们之间的差异无显著性(P>0.05)。作者以DI值不在0.901.10之间且出现>5C细胞为标准判定非整倍体例数3(表3)，经2检

8、验非整倍体例数在各级骨巨细胞瘤间差异无显著性(P>0.05)。在23例级骨巨细胞瘤中，发现1例DI值为2.093，且5C和>5C细胞百分率分别为30.09和18.45。级中的3例非整倍体，有1例DI值<0.90但又检测到>5C细胞。 3讨论骨巨细胞瘤病理学分级(Jaffe三级)沿用至今，但人们越来越多地发现该分级标准不能准确地反映骨巨细胞瘤的生物学行为，因此很多学者对该分级提出异议4，5。本实验旨在应用像细胞光度计对该瘤DNA含量进行测量，研究其和骨巨细胞瘤各级别的关系。细胞核DNA含量的测定，能直接反映癌变过程中的细胞增殖和癌组织中的染色体数目或结构的显著异常。DI值

9、和倍体分布是两个相互补充的指标，前者反应细胞DNA平均含量，数据精确度高，但灵敏度稍差；后者反应细胞中染色体各种倍体核型的多少，灵敏度高，但特异性稍差。因此，作者用DI值不在0.901.10且有>5C细胞的检出，作为判定非整倍体之标准。从结果看(表1，2)，各级别的倍体类型，DI值之间的差异均无显著性，说明该病理分级并不能指示肿瘤的恶变倾向，与有些学者用FCM研究的结果相似5。但各级别骨巨细胞瘤中均有非整倍体例数的检出，提示该瘤具有恶性倾向；各级别DNA倍体类型均有5C，>5C细胞分布，DI均值稍大于1.10，这些结果支持骨巨细胞瘤属低恶度肿瘤的观点6。在本实验中，在级中发现1例，

10、级中1例，DI值>2，5C、>5C细胞为DNA直方的主流(另一峰值位于34C处)，HE切片上这两例单核瘤细胞核肥大，有明显异形性，组织学具有肉瘤样特点应划归恶性巨细胞瘤。另外，级、级中有4例DI值>1.5，DNA倍体类型分布广泛，直方为不规则多峰组合，它们的基质细胞核较肥大深染，亦呈一定的异型性。在级中还有1例复发性的巨细胞瘤，其DI值<0.90且又检出>5C细胞，说明该例细胞分裂，增殖均异常，才同时有低二倍体和>5C细胞的出现。各级肿瘤中均存在二倍体例数，且从DI均值<1.3，2C、34C倍体百分率均值为主上看，提示本实验有部分骨巨细胞瘤是良性的。综

11、上分析，骨巨细胞瘤(除恶性巨细胞瘤外)，应是良、恶性交界瘤，各级区分在判定该肿瘤恶变倾向上已无意义，但要注意该肿瘤的潜在恶性。作者单位：郑伟（350004 福州，福建医科大学病理教研室）黄健文（350004 福州，福建医科大学病理教研室）参考文献：1董郡，等.病理学M.第2版.北京：人民卫生出版社，1996.907.2郑伟，李一伟.肿瘤细胞DNA像分析技术探讨J.临床与实验病理学杂志，1997，13(2)：180.3徐根兴.定量细胞学和细胞化学技术M.长春：吉林科学技术出版社，1993.79，95.4Fukunaga M,Nikaido T,Shimoda T,et al.A flow cytometric DNA analysis of giant cell tumors of bone including two case