微波辅助槐花中芦丁和槲皮素提取

1、微波辅助槐花中芦丁和槲皮素提取LI Min-jing，YOU Jing-yan，YAO Shuang，DING Lan, LIU Zhong-ying and ZHANG Han-qi*吉林大学化学学院，中国长春130023被普遍接受的 2003年12月 研究出三种微波辅助提取（MAE）的方法.。第一种是家庭微波炉动态提取（HMODE）。第二种是特殊的微波炉浴锅提取（SMOBE）。第三种是微波共振动态提取（MRCDE）。通过这三步微波辅助提取的方法获得的结果与通过传统的索氏提取法的结果相比较。 结果表明波辅助提取不仅需要的时间短，而且简化了程序，以及提取出更高的产量。同时对通过这三步微波辅助提

2、取获得的结果也相互作了比较。关键字： 微波辅助提取(MAE，类黄酮，芦丁，槲皮素t文章编号： 1005-9040(2004-06-703-04引言槐花是苦瓢虫蜇的花蕾。豆科的树. ，培养在中国的大多数地区 。槐花能减少脉管的渗透性以及恢复正常脉管的弹力。芦丁是槐花的一种起作用的成分，能抑制传导性心脏病，降低心率和血压.。槲皮素是槐花另一种起作用的成分，它能够扩大冠状的动脉. ，减少心肌的耗氧量以及降低血-脂质1。目前,这种中草药中起作用的成分经常地通过应用在室温下浸泡和索氏提取的技术被提取，这些都是费时的。然而超临界流体的提取有着特殊的溶解能力，可设备是昂贵的和应用范围是狭窄的。超声波提取可以

3、减少提取时间，但是黄酮的产量低2还有大的噪音。用微波能照射有高偶极子样品的瞬间没有造成样品的分解，这样进一步提高了样品的提取效率。对于复杂的样品在与更多传统的提取方法相比较起来通过微波炉暖气装置提供瞬间的高温转移可以得到一个更短的提取时间3-5。中草药通常在水中加热差不多一个小时。但是微波辅助提取方法完成提取只需要不到6分钟。有许多不同的微波辅助提取过程比如高压提取6,常压提取7 和动态的提取8,9已经形成。从中草药中用微波辅助提取到有作用的成分已经被报告10-12。微波辅助提取的产量受到不同操作条件的影响,比如微波的照射时间，溶剂，压力等等。家庭微波炉动态提取，特殊的微波炉浴锅提取和微波共振

4、动态提取在这些工作中被研究。还没有关于使用家庭微波炉动态提取和微波共振动态提取的报告。选择乙醇溶剂作为提取溶剂是因为它不仅是无毒的而且是廉价的。实验1 仪器，试剂和原料一台WR-C特殊的微波样品准备系统包括压力和时间控制系统(北京 Meicheng Kemao集团；一台Galanz WD900ASL23-2家庭微波炉操作在2.45GHz和辐射输出功率为500W(Galanz Microwave Oven Ltd。一台DW-1型号的微波发电机（北京地质仪器制造厂）。两台FI-2100流动注射分析仪（北京Haiguang仪器 Co）。WFZ800-D3B型号分光光度计（北京Ruili分析仪器 Co

5、）。一台可以用于紫外检测器的Agilent1100系列的液相色谱分析仪和一个Zorbax-ODS柱（5m,250mm. ×4. 6mm）（Agilent技术Inc）。槐花样品（中国长春医学材料商店）被压碎再经过一个20-网格筛选. ，然后放进入一烘箱，在20下烘4h。从中国材料和生物产物鉴定协会可以购买到标准芦丁和槲皮素。乙醇（北京化学工厂）是有分析的等级。甲醇（英国费希尔科学有限公司）是由液相色谱分析的等级。醋酸（Tedia有限公司）是由液相色谱分析的等级。通过一台Millipore-Q水净化系统提供用水(Millipore Co，USA 。所有其他试剂是有分析的等级。2 程序2.

6、 1 家庭微波炉动态提取（HMODE）家庭微波炉动态提取的实验安装如图1（A）所示。在家庭微波炉的左手边被钻了两个孔，这是为了放置提取容器的分支管道。称0.5g的样品放入提取容器中，它由一个玻璃的样品管（140mm ×10mm）和两个分支管道组成。然后将提取容器放进家庭微波炉中。30mL的乙醇通过一个蠕动的泵向容器中不断地引进，同时改变微波炉的能量。当提取完成的时候.，把炉的电源关掉以及5mL的乙醇被不断地用泵输送到容器去漂洗余渣。这些提取物和残渣溶液都被转移到一个50mL的烧瓶中。2. 2 特殊的微波炉浴锅提取（SMOBE）精确地称取0. 5g的样品放进衬垫容器（聚四氟乙稀 PFA

7、 ，将其浸入30 mL的乙醇溶液中。然后衬垫容器的主体和控制容器与压力控制系统相连接。最后把样品容器和控制容器放进在微波炉里旋转盘子的孔中。压力设置为700kPa，然后打开炉。当压力达到700kPa时，计算照射的时间。在一个预调压力和一段确定地时间下不断地进行提取。当提取完成时，把样品冷却至室温。最后过滤和转移容器中提取物到一个50mL的烧瓶中。漂洗衬垫容器三次以及残渣溶液也转移到烧瓶中。2. 3 微波共振动态提取（MRCDE）一种微波共振动态提取系统如图1（B）所示。在这种最先进的系统中，一个（3/4）的微波共振被用作微波的能量转换装置来代替传统的微波炉。精确地称取0. 2g的样品，然后放入

8、提取管（65mm×4mm），然后把管子放置在微波共振洞。在蠕动的泵与提取管相连接之后，打开微波炉。微波的功率设置为60W。2. 4 索氏提取法把2g的样品放进一个被插入Soxhle套管的prewashed纤维暗盒中。这设备配备了一只200mL烧瓶，其中有60（体积分数）的乙醇。集体加热和在用带着一个thermostated容器下回流8h。最后过滤提取物，然后将其聚集在一只50mL的烧瓶中。这些提取物用液相色谱仪分析。2. 5 液相色谱仪测定将配备紫外检测器的液相色谱仪调整到254nm。这是样品中芦丁和槲皮素在液相色谱仪中分离的条件：流动相为甲醇，纯净水和冰醋酸（体积比 40：59：1

9、），流速为0.6mL/min。柱的温度为40 。用液相色谱仪分别准备和测定标准为5，10，20，40，60，80，100，150g/mLc（芦丁）:c（槲黄素）=1:2的芦丁和槲皮素，然后可以得到标准曲线。用液相色谱仪测定提取物中的芦丁和槲黄素，然后再根据标准曲线计算出它们的含量。液相色谱仪的结果如图2所示。. 结果与讨论1 乙醇体积分数的影响图3（A）中所描述的是随着乙醇体积分数的增加槐花中芦丁的提取产量也增加。当通过特殊的微波炉浴锅提取法用50（体积分数）的乙醇提取芦丁时，芦丁的产量是最高的。以及当应用家庭微波炉动态提取和特殊的微波炉浴锅提取来提取芦丁和乙醇时，在乙醇的体积分数为60%时芦

10、丁的产量是最高的。图3（B）中所描述的是随着乙醇体积分数的增加槐花中槲皮素的提取产量也增加。当通过三种微波辅助提取法用50（体积分数）的乙醇提取槲黄素时，获得槲黄素的产量是最高的。因此，被获得当使用50-60(体积分数的乙醇时，得到最高产量的芦丁和槲皮素。当三种微波辅助提取法相互之间比较时，发现这三种方法中的特殊的微波炉浴锅提取可以获得最高产量的芦丁和槲黄素。原因是特殊的微波炉浴锅提取法是在700kPa时操作的而家庭微波炉动态提取和微波共振动态提取是在常压下操作的。与家庭微波炉动态提取相比，微波共振动态提取有一个较低产量是因为它有较低微波能，这种低微波能是在60-100W时产生的。2 微波照射

11、时间的影响不同的流速（流速愈快，照射时间愈短）下在提取容器中采用乙醇溶液（30ml，=60），图4（A）中所描述的是当使用家庭微波炉动态提取时仅在5min的微波照射之后可以得到最高产量的芦丁，当使用微波共振动态提取时仅在3min的微波照射之后可以得到最高产量的芦丁。然而，当使用特殊的微波炉浴锅提取时芦丁的产量几乎没影响，这是因为提取物是在700kPa时完成的以及它需要10min的时间从常压提高到700kPa。当压力达到700kPa的时候，在某一个时期段内提取被不断地。然而，这种方法的实际照射时间超过10min。图4（B）中所描述的是当使用家庭微波炉动态提取和微波共振动态提取时仅在3min的微波

12、照射之后可以得到最高产量的槲黄素。当使用特殊的微波炉浴锅提取时槲黄素的产量几乎没影响。这个结果表明当使用这三种方法时槲黄素在3min内被完全提取。3 微波辅助提取和索氏提取的比较表1描述了与索氏提取法相比，微波辅助提取不仅达到了几乎最高产量的芦丁和槲黄素，而且可以明显地降低当从槐花中提取芦丁和槲黄素时的提取时间。4 微波辅助提取和索氏提取法性能的比较表2描述了三种微波辅助提取法和索氏提取法性能的比较。这个结果说明那个家庭微波炉动态提取和微波共振动态提取特别适合于即时的提取和分离。特殊的微波炉浴锅提取的性价比是较低的。结论这三种微波辅助提取法包括两种动态的提取，在其间采用了循环提取，和研究高压下

13、提取，在其中使用了特殊的微波炉。结果说明与传统的索氏提取相比较，微波辅助提取不仅花费较短的时间，而且简化程序，以及有更高的产量。与家庭微波炉动态提取和微波共振动态提取相比. ，特殊的微波炉浴锅提取把比较高提取压塌了。然而，当决定使用特殊的微波炉浴锅提取之前应该过滤提取物。参考文献1高个子的ZHI-西安,ZHENG·Shou-zeng. ，他MIN,乙基的符号al。,中国(人Materia·Medica,科学院出版社. ，北京. ，1998. ，532苗族人San的明后裔. ，李·ZHEN-郭,现代练习;业务控制技术关于中医的质量;品质,民族卫生(学先前,北京,20

14、. 00,6213EgizabatA。，ZuloagaO。,Etxebarria·N。，乙基的符号a1。,Arialyst。1998. ，123. ，16794Carro·N。,Garc,一C。M。，CetaR。，分析员. ，1997。122. ，3255Rokhaya·G。D。，GregoryD。F。,J。Agrid。食物Chem。，2002,50,32046在R的时候。A。，Gath·St。，Fresenius,J。肛门。Chem。，2000. ，368,6847潘·薛-六月. ，NIU·郭-guang,刘·HUI-周. ，J。ChromatograA. ，2001,922,3718萨拉L。Cresswell. ，Stephen·J。Haswell. ，分析员。1999,124。13619HerreraM。C。,Luque-德-CastroM。D。，J。Ana1。在。Spectrom。,2002,17,15301O郭·ZHEN