系膜增殖性肾炎白细胞介素6表达与细胞外基质产生的研究

1、系膜增殖性肾炎白细胞介素6表达与细胞外基质产生的研究关键词系膜增殖性肾炎白细胞介素6细胞外基质 系膜细胞增生、细胞外基质（ECM）聚积和扩张是系膜增殖性肾小球肾炎（MsPGN）发生发展的重要病理基础1。研究表明，系膜细胞可分泌具有生物活性的白细胞介素6(IL-6)，IL-6又可促进系膜细胞生长2。人类MsPGN中IL-6的表达及其与ECM之间的关系国内外研究较少，我们观察了MsPGN患者肾小球内IL-6基因及蛋白表达状况，分析其与系膜扩张，系膜基质成分型胶原（CIV）和纤维连接蛋白（FN）之间的关系。1材料和方法1.1肾组织标本制备3MsPGN组12例，男9例、女3例，平均年龄26.8岁。所选

2、病例经肾活检、按1982年WHO制定的肾小球疾病形态学分类确诊为MsPGN。对照组8例，为男性移植肾供肾者，肾活检证实为正常肾组织。肾组织按参考文献3处理备用。1.2IL-6 mRNA原位杂交参照参考文献4制备IL-6 cDNA探针（寡核苷酸特异探针序列由上海细胞生物研究所合成，DIG寡核苷酸3?末端标记试剂盒购自BM公司）4。按蔡文琴法3将4多聚甲醛固定后的冰冻切片常规处理后行原位杂交，阴性对照以不加探针的杂交液同法操作。1.3IL-6、CIV和FN免疫组化染色按参考文献3进行。兔抗人IL-6多克隆抗体购自美国SantaGruze公司，鼠抗人FN、鼠抗人CIV以及三抗、二抗均购自北京中山生物

3、试剂公司。1.4ECM嗜银染色按常规进行。1.5半定量分析采用EIG综合象分析系统(重庆大学ICT中心)对照片上的阳性杂交信号或染色信号进行半定量分析。1.6统计学处理用SPMP医用统计软件进行t检验和相关分析。数据以s表示。2结果详见表1表4。表1MsPGN肾小球与正常肾小球内IL-6 mRNA表达的比较(阳性信号面积占肾小球总面积百分比)组别nIL-6 mRNA（）MsPGN组124.10.5*正常对照组82.60.6 *P0.01与正常对照组比较 表2MsPGN组与正常对照组肾小球内IL-6、CIV和FN蛋白表达结果比较(阳性信号面积占肾小球总面积百分比)组别nIL-6(%)CIV(%)

4、FN(%)MsPGN组129.40.80.9*正常对照组 P0.01，*P0.05与对照组比较 表3MsPGN与正常肾组织肾小球ECM扩张程度比较(ECM面积占肾小球总面积百分比)组别nECM面积占肾小球总面积百分比(%)MsPGN组1225.22.7正常对照组88.72.1 P0.001与对照组比较 表4IL-6表达与CIV、FN表达以及ECM扩张的相关性（r）CIVFNECMIL-6蛋白表达IL-6 mRNA表达0.680.620.820.78IL-6蛋白表达0.690.600.81 P0.01 3讨论系膜细胞可分泌IL-62，IL

5、-6反过来又可刺激系膜细胞增生，表明在肾脏局部IL-6可能以自分泌和旁分泌的方式影响系膜细胞的生物特性和ECM的变化。本实验发现在生理和病理状态下，肾小球系膜细胞均可表达IL-6(在分子和蛋白水平表达一致，二者显著正相关)，但在MsPGN中的表达显著高于正常对照组，且在MsPGN中CIV和FN的表达也明显增高，ECM扩张明显；CIV、FN的表达和ECM的扩张与IL-6在分子和蛋白水平的表达都有显著正相关。提示肾小球系膜细胞异常自分泌的IL-6，可能是刺激系膜基质成分过度增生和聚积的重要介质之一，从而导致了ECM的异常扩张，形成了肾小球硬化的病理基础5。作者单位：第三军医大学大坪医院野战外科研究

6、所肾内科(重庆，400042)参考文献1FogoA.Internephronheterogeneityofgrowthfactorandsclerosis.KidneyInt，1994，45（Suppl 45）：S-242HoriiY，MuraguchiA，IwanoMetal.InvolvementofIL-6inmeasangialproliferativeglomerulonephritis.JImmunol，1989，143：39493蔡文琴，王伯云主编.实用免疫细胞化学与核酸分子杂交技术.重庆：四川科技出版社，19944谭骏主编.DNA重组技术.第三军医大学分子遗传学教研室，19935吴小