三波长分光光度法测定复方芦丁片中维生素C的含量

1、    三波长分光光度法测定复方芦丁片中维生素C的含量        提要采用三波长分光光度新计算法(AS2)测定复方芦丁片中VC的含量。其它成分不干扰测定，方法简便、结果准确。平均回收率为100.3%，RSD为0.79%(n=5)。 关键词三波长分光光度法(AS2)维生素C复方芦丁片复方芦丁片含芦丁和维生素C两种组分，含量测定常采用碘量法1、HPLC法2和正交函数分光光度法3。结果虽好，但需较昂贵的仪器和较复杂的理论计算。采用三波长分光光度法可不受芦丁干扰准确测得维生素C的

2、含量。该法不需分离，仪器要求不高，操作简便、结果准确。1实验部分1.1仪器和试剂UV-260紫外分光光计(日本岛津)。维生素C对照品(AR，碘量法测定其含量为100.4%)；芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)；其它试剂均为分析纯。1.2方法与结果紫外吸收光谱按处方比例分别称取芦丁和维生素C对照品适量，用60%乙醇液溶解(取1%重亚硫酸钠液1ml，乙醇60ml，加水至100ml)。用60%乙醇液为参比，绘制各样品谱(1)。1紫外吸收光谱1 维生素C2 芦丁3 混合物测定波长的选择据1，用作法选择2=261.8nm，1=214nm，3=292nm为粗选之三波长，固定1、2，改变3，测定干扰组分芦

3、丁在1、2、3的吸光度，按三波长计算公式：A=A2-求出A，结果当3=289.8nm时，A为零，由此确定214、261.8、289.8nm为测定所选的三个波长。不同浓度的干扰组分对测定的影响配制不同浓度的芦丁干扰组分液，在选定的三波长处测定吸光度，并计算A，结果均接近于零(表1)。表明采用此三波长测定基本上能消除芦丁组分的干扰。Table 1A data of different concentration of interference subslancesNo.A1A2A3A10.0750.0770.0777.3×10-420.1330.1420.1484.6×10-4

4、30.1860.1970.2026.1×10-440.2450.2560.263-3.6×10-450.3150.3300.3384×10-41.2.4计算方法按所选三波长求出常数B=(2-1)/(3-1)。制备不同浓度的维生素C对照液，分别测定A1S、A2S、A3S，按K1=A1S/A2S，K3=A3S/A2S求出K1和K3的平均值。求出维生素C对照液的浓度与最大吸收值A2S的回归方程。将测出的样供试液吸光度A1、A2、A3代入下面公式换算成标准溶液的吸光度值A2S。将求得的A2S值代入维生素C的回归方程求得待测组分的含量。1.2.5维生素C标准曲线精密称取维生

5、素C对照品5 mg，置50ml量瓶中，用60%的乙醇液稀释溶解至刻度，作为贮备液。精密吸取0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ml，置5ml量瓶中，以60%乙醇溶液稀释定容，并以此液为随行空白，在选定的三波长下，测吸光度A2S对浓度c和A2S进行线性回归，得回归方程为c=0.773A2S-0.0497，r=0.9980。在210g/ml范围内线性关系良好。1.2.6回收率的测定精称已测知含量的复方芦丁片适量，再精密加入10mg/ml 维生素C标准品不同量，按所选条件测吸光度，按公式计算维生素C的浓度及回收率，结果平均回收率为(100.3±0.8)%，RSD为0.79%。1

6、.2.7样品的测定取本品10片，精密称定，研细。称适量(约相当于芦丁20mg及维生素C 50mg)，置50ml烧杯中，分次加少量60%乙醇液搅拌使溶解，并定量转移至50ml量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，滤过，弃去初滤液，取续滤液。精取续滤液0.5ml置5ml量瓶中，用60%乙醇稀释定容，按所选三波长测定并计算A2S代入回归方程，计算浓度及含量(表2)。 Table 2Determination results of samples(n=5)MethodVitamin Camount(±SD)RSD%Tri-wavelength method95.9±0.70.73Standard method96.3±0.60.622讨论 2.11中维生素C在波长260nm左右有一单峰，而复方芦丁片中的芦丁组分在此附近也有很强吸收，干扰维生素C含量的测定。在以上所选实验条件下，则可以消除芦丁组分的影响，而准确测得维生素C的含量。并与部标法基本一致。2.2试验时要求水中含钙量要低，否则在配制60%乙醇液时，将出现混浊或沉淀，影响试验结果，其原因可能是由于水中钙离子与重亚硫酸根形成重亚硫酸钙，该物质在60%的酸介质中溶解度低而析出。作者单位：辽宁省中医研究院沈阳 110034参考文献1中华人民共和国卫生部药品标准.1