不同产地白英中多糖含量的测定

1、不同产地白英中多糖含量的测定         11-04-26 11:33:00     编辑：studa20                作者：王林江，雷倩，马双良，汪晓敏，徐顺【摘要】  目的测定不同产地白英多糖的含量，为白英的质量评价提供理论依据。方法利用水提醇沉法从白英中提取得到多糖，采用苯酚-硫酸法测定3个

2、产地白英的多糖含量。结果不同产地白英多糖含量分别为:安徽1.66%，浙江1.84%，江苏1.62%。结论苯酚-硫酸法简便、快速、准确、重现性好，适合测定白英中多糖含量，不同产地白英多糖的含量差异不大,为白英的质量评价提供理论参考。 【关键词】  白英； 多糖； 苯酚-硫酸法白英Solanum lyratum Thunb.系茄科植物，全草作为传统中药已有二千多年的历史，最早见于本经记载，多产于浙江、江苏、安徽，性味苦、辛、微寒。常与他药伍用治疗肺癌、胃癌、肝癌等多种癌症，此外还用于治疗感冒发热、黄疸性肝炎、胆囊炎、水肿等。白英的化学成分研究表明白英中含有黄酮类、多酚类、有机酸类、多糖类

3、、倍半萜类、甾醇类、香豆素类等多种化合物1。多糖是构成生命的基本物质之一，广泛存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中，是一类天然高分子化合物。随着对多糖结构的逐步深入了解，多糖化合物的生物活性研究得以迅速发展。多糖在抗肿瘤、免疫调节、抗衰老、降血糖及降血脂等方面显示出良好的应用前景2，3。白英中的多糖具有多种生物活性4，5，不仅可以作为广谱免疫促进剂具有调节免疫功能，还可以抗感染、抗辐射、抗凝血、降血糖、预防和治疗肿瘤等。植物多糖的含量可以在一定程度上体现该药材免疫作用的强弱。白英多糖是其主要成分之一6，7，但目前有关白英多糖的研究报道较少，不同产地白英多糖的含量比较也未见报道。本实验利用水提

4、醇沉法从白英中提取得到多糖，采用苯酚-硫酸法8，9显色测定了3个不同产地白英中多糖的含量，为选取优良药用白英产地提供依据，为白英质量评价做出补充，也为其药理作用的进一步研究提供基础。1  药材、试剂与仪器1.1  药材安徽产白英购于北京同仁堂，浙江和江苏产地的白英购于郑州市医药公司。经鉴定均为茄属植物白英。1.2  试剂无水葡萄糖（对照品）天津化学试剂三厂生产，其它试剂均为分析纯。1.3  仪器紫外可见分光光度计Jasco V-550型，V-550工作站（日本岛津科技公司）,石英吸收池；RE-52-99 型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），SHZ-D 循

5、环水式真空泵（郑州市上街区长虹仪器仪表厂），DGB/20-002台式干燥箱（重庆试验设备厂），电子天平FA1004A（上海精密科学仪器有限公司）。2  方法与结果2.1  白英中多糖的提取精确称取安徽白英药材粉末(过60目筛)5.0g置于索氏提取器中，以石油醚回流除去脂类，药渣挥去溶剂后，用80%的乙醇提取以除去单糖、低聚糖等干扰成分，最后用水提取多糖。提取液在50经减压浓缩至原体积的1/3左右,浓缩液中加入35倍量的95%的乙醇,静置，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤多次，60烘干至恒重，得白英多糖。2.3  标准曲线的绘制  

6、60;  11-04-26 11:33:00     编辑：studa20A=54.553 6C-0.072 7  r=0.999 2    说明本方法在0.0050.017 mg/ml范围内线性关系良好。2.6  稳定性实验取“2.2”供试品溶液显色后，每隔1h测一次，连续6次，吸光度分别为0.544，0.532，0.537，0.536，0.541，0.531，RSD为0.83%。结果表明样品在16 h内显色稳定，在6 h内可以进行测定。2.8  加标回收率测定精确称取安徽白英5份，

7、每份1.5g，分别加入无水葡萄糖9mg，用“2.2”所述方法制备溶液，测定吸光度分别为0.711，0.721，0.694，0.705，0.683，计算平均回收率为96.5%，RSD为3.12%。式中C为供试液中葡萄糖浓度(mg/ml) ，D为供试液的稀释因素，f为换算因子，W为供试品质量(mg)。结果见表1。2.10  3个产地含量比较同法分别测定浙江与江苏产地的白英中多糖的含量。结果见表1。表1  多糖含量的测定结果（略）3  讨论3.1  显色剂的选择文献中有选用蒽酮-硫酸法测定植物中多糖的含量，但是蒽酮-硫酸法易受蛋白质的干扰，因此在用蒽酮-硫酸法

8、测定一些中草药中多糖的含量前需除蛋白，以纯化多糖，此法容易造成多糖损失，且实验表明该法用于测定白英中多糖含量时数据重复性不好。而苯酚-硫酸法受蛋白质干扰较小，操作比蒽酮-硫酸法简单，故本实验选用苯酚-硫酸作为显色剂。3.2  结果分析在多糖的含量测定中，尤其当多糖组成复杂时，因较难得到相应多糖对照品，多采用葡萄糖代替对照品，测定样品中多糖的相对含量。文中以比色法测定样品中的单糖，通过单糖和多糖的换算因子计算药材中的多糖含量。结果表明，苯酚-硫酸法测多糖含量简单、快速、灵敏度高、重复性好，稳定性良好，且无需多糖纯品和贵重仪器，适合对白英多糖含量进行测定。  

9、0; 从测定结果看出，3个主产地的中草药白英中多糖含量相差不大，测量结果对白英质量监控有一定参考价值。【参考文献】  1徐 顺,王林江,刘宏民.白英化学成分和药理作用研究进展J.时珍国医国药,2006,17 (4):523.2陈小燕,高泽立.多糖的研究进展多糖对机体免疫功能的影响J.胃肠病学和肝病学杂志,2006,15(5):540.3吴晓忠,罗素琴,刘乐乐,等.中药多糖抗肿瘤作用的研究进展J.内蒙古医学院学报,2009,21(1):81.4吴亚林,黄静,潘远江.白毛藤多糖的分离和生物免疫活性研究J.浙江大学学报(理学版),2004,31(3):319.5杨惠麟,孙志良,丁 榕,等.白毛藤多糖的提取及体外抑菌试验J.中兽医医药杂志, 2005,4:24.6Wu Yalin, Pan Yuanjiang, Sun Cuirong. Isolation, purification and structural investigation of a water-soluble polysaccharide from Solanum lyratum ThunbJ. International Journal of Biological Macromolecules,2005,36:2