落射荧光显微镜

1、落射荧光显微镜（一）、 说明将显微镜下的标本物质做特异染色，由于各种物质对不同荧光色素的吸收，具有一定的选择性，所以当一种物质吸收特定波长范围的光能量后，即发出荧光，借助荧光显微镜观察荧光现象的一种专门技术，叫荧光显微术，它广泛应用于组织学细胞学、微生物学和免疫学等方面。常见荧色素性能表：名称染料PH最大吸收波长毫 微 米最大荧光波长毫 微 米荧光颜色用途硫代黄素T碱性380460（420-550）天兰组织、原虫、病毒酞黄G酸性408540（500-600）绿组织樱草素酸性360430（400-500）兰细菌、组织吖啶黄碱性455620（450-700）黄绿细菌、组织吖啶橙碱性495585（5

2、30-630）黄绿组织、原虫、细菌、核酸罗达明B碱性560611（550-700）红橙组织、病毒、细菌罗达明B200碱性560595（540-660）红黄蛋白标记（二）、 用途：适用于医院、大专院校、防疫站、公检法、研究所等单位，开展对微生物学、免疫学、病理学、血液学、生物化学、药物学和肿瘤血等学科的研究，亦可用于石油勘探考古等部门使用。该仪器具有普通透射照明和落射荧光照明，既作一般普通显微术和显微照相使用，又能观察荧光显微术。一机多用，体积小，造型美观，使用方便。（三）、 仪器结构各部件名称如（图一A）1、 相接头或摄像接头紧固钉2、 目镜3、 三目或双目棱镜筒紧固钉4、 B、G分色镜紧固钉

3、5、 紫外线防护罩6、 物镜7、 载物台8、 纵向移动手轮9、 横向移动手轮10、 集光镜11、 底座12、 电器底盘13、 聚光镜紧固钉轮14、 聚光镜升降手轮15、 汞灯电源开关16、 工作指示灯17、 微动手轮18、 粗动手轮19、 B、G转换手柄20、 输入线接口21、 汞灯左右调整手轮22、 汞灯上下调整手轮23、 汞灯架紧固钉24、 照相或摄像接筒25、 目镜视度调节圈（四）、 各部件的配置（如图一B）（五）、 光学数据1、 目镜类别放大倍数焦距（mm）视坊直径（mm）备注广角平场目镜6.3×39.720选购10×251816×15.611选购2、 物

4、镜类别放大倍数数值孔径系统工作距离无荧光消色差物镜10×0.25干7.6320×0.40干2.440×0.65干0.63100×1.25无荧光油0.183、 总放大倍数物镜目镜10×20×40×100×6.3×63×126×252×630×10×100×200×400×1000×16×160×320×640×1600×（六）、 使用与操作方法1、 粗微调：旋转粗动调焦

5、手轮1（图二），能使载物台快速升降，旋转微动调焦手论4（图二）能使载物台缓慢升降，微动调焦手轮格值为0.002mm， 在左边粗动手轮内侧有一松紧调节环3（图二），可以按操作者的要求自由决定松紧程度，若调节环太松，载物台容易下落使标本脱离焦点。 注：按顺时针旋转松紧调节环，粗调手轮变松；按逆时针旋转松紧调节环，粗调手轮变紧。 在粗微调手轮右边有一带把限位环2（图二），它的作用是限制载物台的升降范围。调焦时先以10×物镜调焦，看清清晰像后将限位环2（图二）顺时针方向紧锁，可使载物台不再上升，以免调焦时失误而损坏物镜。2、 无论使用高倍或低倍物镜，一般都要用聚光镜来配合。一方面使观察的物体

6、获得足够的照明，另一方面使照明光线获得一个与物镜孔径相适应的孔径角，以保证物镜鉴别率的充分利用，聚光镜下装有孔径光栏，转动孔径光栏调节手柄5（图二）可连续改变聚光镜孔径角以配合物镜的数值孔径。调整聚光镜升降手轮14（图一），可使聚光镜作高低升降运动。3、 三目镜筒双目镜调节：使用时先用双手捏住棱镜壳两端的调整滑板1和5（图三），向左右移动调整滑板，使两目镜的距离与观察者两眼间的瞳距相同，然后旋转任意一目镜调节圈4（图三），使其刻度值2（图三）与调整滑板上的刻度值3（图三）读数相等。转动微动手轮，使这个目镜中的像清晰，同样的方法调整另一个目镜调整圈，至图像清晰即可双目同时观察。（七）、 照明本仪

7、器具有汞灯和卤钨灯两种光源，当作生物观察时可采用卤钨灯照明标本，卤钨灯的规格为6V15W，打开底座上的灯源开关1（图四），即可进行照明，调节滑动电位器3（图四），可改变光的强弱，使其满足观察者的需要。当作荧光观察时可采用GCQ100W直流汞灯电源。（八）、 汞灯操作1、 汞灯的点燃（1） 首先接好电源线和输出连接线，并检查电路连接是否正确。（2） 打开电源开关15（图一），同时指示灯16（图一）亮，汞灯点燃，点燃后15分钟左右弧光稳定。（3） 汞灯点然后在15分钟内不要关闭汞灯，以免损坏汞灯，关闭后重新点燃使，必须等汞灯冷却后再行启动。2、 汞灯的更换与安装（1） 务必将电源关闭，将输入线从接

8、线座5（图五）上拔下。（2） 将灯架紧固螺钉8（图五）松开，上端向外拉出一公分，向上一提，便可平行拉出灯架9（图五）。（3） 松开灯泡上下紧固螺钉1、3（图六），将灯泡2（图六）取下，换上新灯泡，使灯泡中心对准绝缘板上的黑点。在安装灯泡时，不要触摸灯泡部分，并检查灯泡表面是否有灰尘和指纹，如果灯泡弄脏，用少量的酒精乙醚溶液或汽油擦拭。然后拧紧灯泡紧固钉1、3（图六）即可。（4） 将灯架上端稍向内倾斜放入灯室12（图五）内，向上提起，将灯架下段限位块4（图六）卡在灯室框上，拧紧灯架紧固螺钉8（图五）即可。3、 汞灯对中心：在灯弧稳定以后，汞灯对中心按下列步骤：（1） 打开遮光板。（2） 取下10

9、×物镜，旋转转换器，使物镜座孔对准光路，让光线通过物镜座空孔。（3） 放置一张白纸在载物台上使汞灯像投影在白纸上。（4） 用聚焦手柄11（图五）聚焦弧像，调整对中心旋钮6、7（图 五）使灯泡位置可作上下、左右移动（白纸上的灯弧像前后、左右移动）使灯弧像的亮点在中心。（5） 每次换汞灯都要重复上述步骤，汞灯点燃时不要打开灯室。4、 落射荧光显微镜的使用（1） 使用汞灯观察时要用紫外线防护罩，以免伤害眼睛。（2） 把标本放在载物台上，先用卤钨灯透射光调焦使标本进入视野观察。（3） 关闭卤钨灯，使用汞灯，并根据标本选择好B或G（二向分色镜）和激发滤光片（兰光B或绿光G）。（4） 注意事项

10、A、用100×油浸物镜时采用无荧光油，使用后，用纱布蘸二甲苯擦浸油残液，不能使用酒精或乙醚。B、短暂停止观察时，为使标本荧光不易猝灭应将遮光板挡住光线，不要关掉汞灯。可延长汞灯灯泡使用寿命。 5、滤色片的使用：激发范围光谱范围激发滤色片二向分色镜截止滤色片兰光宽QB24BJB510窄QB24+QB24绿光宽LB1GCB580窄LB1+LB1（1） 波长和连续光谱在490mm附近（435nm-490nm）用于荧光色素异硫氰酸荧光黄FITC、吖啶黄和吖啶橙黄、阿的平、荧光抗体法金胺、四环素。（2） 绿光：波长546nm。用于荧光色素、荧光抗体、罗达明。（九）、 显微照相的使用：1、 在三

11、目照相筒上，按上照相接头，并将照相目镜装入接头内，在装上ZA装置和照相机机身。2、 将三目棱镜壳上转换手柄拉出，使100%光线进入照相筒，通过照相观察筒观察，作如下调整：（1） 调整照相观察筒视度圈，使分划板上的空双“十”字线“ ”形状分辨清晰，该作用是为了校正人们眼睛的视度差，以便调整物镜调焦手轮，使物体成像在照相底片上的清晰度最佳。（2） 调整调焦手轮，使观察筒内的像最清晰即可拍照。拍黑白片安装上照相滤色片。3、 将两根快门线分别接在中心快门和135机身快门上。4、 当使用135机身时，将内反光镜抬起索住。把速度盘拨到B门，把快门打开，用快门线下端的螺钉索住。使帘布快门处于常开位置，用中心

12、快门或半自动装置进行拍照即可，当拍荧光照片时，曝光时间需在5分钟以上。（十）、 显微摄像：1、 旋下CCD摄像头上的防尘盖，将摄像接头拧上。2、 将CCD摄像接头插入三目头上，并用紧固螺钉上紧。3、 转录线一端插入摄像头视频输出，另一端插在彩显视频输入上（若需配置微机，将他插在主机视频输入上）。4、 CCD摄像头与电源变压器的连接，一端插入电源变压器输出上（或插入光标发生器电源输出口），另一端插入CCD摄像头的输入上。5、 在完成上述步骤后，把分光棱镜拉杆拉出到位，同时分别打开摄像与彩电（或微机）电源开关，显示屏上将出现还原逼真的彩色显微图像。（十一）、 维护与保养：1、 安置：仪器安置应选择

13、干燥和清洁的房间，以免光学元件发霉，及尘土粘满仪器。显微镜使用完毕应擦干净 、罩好，拿掉目镜后必须盖上目镜防尘盖。擦拭仪器应选用清洁的细软布，如擦拭透镜上的指纹或浮土，用脱脂棉蘸少量乙醚酒精混合液擦拭。注意透镜表面不要划出条纹。2、 清洁目镜：当目镜有灰尘时，首先清洁上表面，下面有灰尘时，要用竹笺卷脱脂棉蘸酒精乙醚混合液擦拭干净。3、 清洁物镜：物镜片上有灰尘，不影响成像，但照明亮度损失，观察时模糊不清，清洁物镜只限于物境外表面，特别是前片表面，被药物污染后应立即用酒精乙醚混合液擦拭，香柏油须用二甲苯擦拭。恒温板安装说明（一）、 技术指标：1、 电源电压：220V±10%， AC 4560HZ2、 温度设定方式：预置3、 温度控制范围：30°C40°C4、 系统工作环境温度：15°C30°C（二）、 使用说明：1：首先将你的显微镜平台移动尺上面两颗固定螺丝拧下，取下夹切片的弹簧压板。2：将恒温工作台的背面的不干胶去掉，贴着显微镜工作台往里插，插到底为止，这时你的显微镜就如同有了一个新