杂环类药物特殊杂质的检验

1、药品检验技术课程单元教学设计情境：杂环类药物的分析（08） 任务：杂环类药物特殊杂质的检验(03) 教学目标设计序号5上课地点理实一体化教室授课形式讲授、学生操作练习教 学 目 标技能目标知识目标能够依据药典，对吩噻嗪类药物中有关物质进行检查、对地西泮中的杂质进行检查。掌握杂环类药物特殊杂质的检验方法教 学 重 点异烟肼中游离肼的检查方法、吩噻嗪类药物中有关物质的检查、地西泮的杂质检查教 学 难 点异烟肼中游离肼的检查方法、吩噻嗪类药物中有关物质的检查、地西泮的杂质检查能力训练任务及案例通过实验操作和理论知识的讲解，同学们可以更好的掌握杂环类药物的检查方法和技能操作 教学进程设计（下面各格均可

2、合并）步骤教学内容教学方法教学手段学生活动时间分配基础知识讲解基本方法和原理的讲解教师举例、点评、归纳概括引出知识点。任务引导同学们做好课堂笔记，掌握课堂重点20分钟案例分析例如：地西泮杂质的检查同学们通过分组实验既掌握了理论知识又掌握了操作技能25分钟异烟肼中游离肼的检查异烟肼是一种不稳定的药物，其中的游离肼是由制备时原料引入，或在贮藏过程中降解而产生。而肼又是一种诱变剂和致癌物质，故对肼应进行严格的限量检查。因此国内外药典多数规定了异烟肼原料药及其制剂中游离肼的限量检查。常用的方法有薄层色谱法和比浊法等。1薄层色谱法 中国药典2010年版中，对异烟肼及注射用异烟肼中游离肼的检查，均采用薄层

3、色谱法。其方法为：取本品，加丙酮-水（1:1）溶解并稀释制成每1mL中约含100mg的溶液，作为供试品溶液；另取硫酸肼加丙酮-水（1:1）溶解并稀释制成每1mL中约含0.080mg（相当于游离肼20µg）的溶液，作为对照品溶液；取异烟肼和硫酸肼各适量，加丙酮-水（1:1）溶解并稀释制成每1mL中分别含异烟肼100mg和硫酸肼0.080mg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液。照薄层色谱法（附录V B）试验，吸取上述三种溶液各5µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-丙酮（3:2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。系统适用性溶液所显游离肼

4、与异烟肼的斑点应完全分离，游离肼的Rf值约为0.75，异烟肼的Rf值约为0.56。在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。2比浊法 JP（14）采用样品中加水杨醛的乙醇溶液观察浑浊的方法来检查异烟肼中的游离肼。其方法为：取异烟肼0.1g，加水5mL使溶解，加水杨醛乙醇液（120）0.1mL，迅速振摇混合，放置5min内溶液不混浊。此类方法的优点是不用对照品、价廉、简单易行，而缺点是专属性和准确度差。放置时间过长，异烟肼的反应产物也会产生混浊。吩噻嗪类药物中有关物质的检查噻嗪类药物在生产、贮存过程中，可引入多种其它烷基化吩噻嗪杂质及分解产物。吩噻嗪类药物的有关物质主

5、要包括残留的原料及中间产物、副产物和药物的氧化产物等。中国药典2010年版中的吩噻嗪类药物除了盐酸奋乃静无此项检查外，其余的原料药物与部分制剂中均规定了该项检测。1盐酸异丙嗪有关物质的检查（1）杂质的来源 在异丙嗪的合成过程中易发生副反应，使得最终合成产物变为异丙美沙嗪，该物质在丙酮中溶解度大，精制也不易除去。同时异丙嗪不太稳定，易氧化，贮藏过程中可能分解。（2）检查方法 避光操作。取本品，加0.1 mol/L盐酸溶液配制成每1mL约含0.2 mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1mL，置100mL量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法（附录V D

6、）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水（用冰醋酸调pH值至2.3）-甲醇（55:45）为流动相，检测波长为254nm。理论板数按盐酸异丙嗪峰计算应不低于3000，盐酸异丙嗪峰与相对保留时间1.11.2的杂质峰的分离度应不小于2.0。取对照溶液20L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液与对照溶液各20L，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的3倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。2盐酸氯丙嗪有关物质的检查（1）杂质的来源 在盐酸氯丙嗪的合成过程中易残留的中间产物包括：

7、中间体（3-氯二苯胺）、中间体（2-氯-10H-吩噻嗪）、中间体（3-（2-氯-10H-吩噻嗪-10-基）-N-甲基-1-丙胺）等。同时氯丙嗪不太稳定，易氧化，贮藏不当或存放时间过长可能分解产生3-（2-氯-10H-吩噻嗪-10-基）-N,N-二甲基-1-丙胺S或N的氧化物等。（2）检查方法 避光操作。取本品20mg，置50mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取适量，用流动相定量稀释制成每1mL中含2g的溶液，作为对照溶液。照高效液相色谱法（附录V D）试验，用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.5%三氟乙酸（用四甲基乙二胺调节pH值至5.3）（50:50）为

8、流动相；检测波长为254nm。取对照溶液10L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%。精密量取供试品溶液与对照溶液各10L，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的4倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（0.5%）。各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（1.0%）。3盐酸硫利达嗪有关物质的检查盐酸硫利达嗪遇光不稳定，在生产、贮存过程中易引入有关物质，因其结构不清，因此中国药典2010年版采用薄层色谱法，以高低浓度对照法控制其杂质限量。其检查方法为：避光操作。取本品，加三氯甲烷制成每1mL中约含10mg的

9、溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加三氯甲烷稀释成每1mL中约含50g的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述两种溶液各5L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-异丙醇-浓氨溶液（74:25:1）为展开剂，展开，晾干，先用碘化铋钾试液-冰醋酸-水（10:20:70）的混合液喷雾，然后喷以过氧化氢试液，立即覆盖同样大小的洁净玻璃板，检视，供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照溶液所显的主斑点比较，不得更深。地西泮的杂质检查1乙醇溶液的澄清度与颜色 取本品0.1g，加乙醇20mL，振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，与黄色1 号标准比色液（附录 A第一法）比较，不得更深。&

10、#160;2氯化物 取本品1.0g，加水50mL，振摇10分钟，滤过，分取滤液25mL，依法检查（附录 A）与标准氯化钠溶液7.0mL制成的对照液比较，不得更浓（0.014%） 。 3有关物质 取本品，加甲醇溶解并稀释制成每1mL中含地西泮1mg的溶液作为供试品溶液；精密量取1mL，置200mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法（附录 D）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(70:30)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按地西泮峰计算不低于1500。取对照溶液10µL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的25%；再精密量取供