HPLC柱前衍生化法测定阿波莫斯注射液的含量

1、    HPLC柱前衍生化法测定阿波莫斯注射液的含量        摘要采用高效液相色谱邻苯二甲醛柱前衍生化法，测定进口药品阿波莫斯注射液中天门冬鸟氨酸的含量。以Hypersil ODS(125 mm×4 mm，5 m)为色谱柱，20 mmol/L NaAc+=0.5%THF+=0.02%TEA(pH7.2)混合一定比例的100 mmol/L醋酸钠-乙睛-甲醇(100175225)作流动相，梯度洗脱。结果在0.201.20 g范围内，积分面积与样品量呈良好的线性关系

2、，r=0.9991，平均加样回收率为100.3%，RSD=1.8%（n=9）。关键词阿波莫斯；天门冬鸟氨酸；高效液相色谱法中号R 927.2文献标识码:A文章编号:1006-8783(2000)02-0100-02 Determination of Hepa-Merz Injection byPrecolumn Derivatization of HPLCSU Guang-hai(Guangzhou Institute for Drug Control,Guangzhou Guangdong 510160)AbstractA precolumn derivatization with OPA

3、of HPLC method was established for the determination of Hepa-Merz injection. Reversed-phase C18column (Hypersil ODS 125 nm×4 nm,5 m) was used.Mixture of 20 mmol/L sodium acetate, 0.5% tetrahydrrofuran and 0.02% triethylamine pH 7.2 was used as mobile phase A and mixture of 100 mmol/L sodium ace

4、tate-acetonitril-methanol (100175225) as mobile phase B. The detecting wave-length was 338 nm . There was a good linear relationship in the range from 0.20 g to 1.20 g(r=0.9991). The average recovery was 100.3%(n=9,RSD=1.8%).The method was simple,rapid and accurate.Key WordsHepa-Merz,ornithinasparta

5、t, HPLC德国Merz+Co.GmbH & Co.生产的阿波莫斯（Hepa-Merz）注射液是天门冬鸟氨酸1的灭菌水溶液,适用于慢性肝病引发血氨升高及肝性脑病。本文采用邻苯二甲醛柱前衍生化法2测定阿波莫斯中的天门冬鸟氨酸的含量，方法简单、准确、快捷、重复性好。1实验部分表1阿波莫斯加样回收率试验结果m(样品量)/mgm(加入量)/mgm(测定量)/mg回收率/%1.56804.03404.06224.06224.0259100.7100.799.83.92004.03404.03013.97754.054299.998.6100.55.48804.03404.20343.94534

6、.0663104.297.8100.81.3.6样品测定精密量取供试品2 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度。精密量取稀释液1 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，作为供试品溶液。分别将对照品溶液和供试品溶液适量用自动进样器，按上述色谱分析条件分离测定。供试品色谱见1。以峰面积总和外标法计算天门冬鸟氨酸的含量，结果见表2，1样品色谱1 天门冬氨酸色谱峰2 鸟氨酸色谱峰表2样品测定结果(n=3)批号相当于标示量/%7090798.099.5100.08091698.8100.1100.58091798.796.998.42讨论2.1阿波莫斯注射液是天门冬氨酸的鸟氨酸盐的水溶液。天门冬

7、鸟氨酸不能直接用紫外、荧光等检测器检测，有报道采用薄层扫描法测定天门冬鸟氨酸2，但操作繁琐，且水溶液点样困难，显色易产生误差。本文以邻苯二甲醛柱前衍生分别形成可用紫外检测的天门冬氨酸和鸟氨酸的异吲哚衍生物用紫外检测,在HPLC色谱记录中显示天门冬氨酸和鸟氨酸衍生物的两个色谱峰，采用两个峰面积总和的外标法直接测定天门冬鸟氨酸的量，方法简单、准确、快捷、重复性好。2.2采用邻苯二甲醛柱前衍生化法直接测定天门冬鸟氨酸，辅料、衍生试剂等对天门冬鸟氨酸主成分的测定没有影响。苏广海（广州市药品检验所，广东广州 510160）参考文献1德国药典S.1999.3522Seitz HG,Verhoef M. Automated amino acid