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文档简介
1、革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性 菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌, 它们能产生外毒素使人致病,而大多数肠道菌 多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。革兰氏阳性菌分类,并选择有效药物进行治疗这是很重要的问题。革兰氏染色法,能够把细菌分为两大类:采用这种染色方法,是先用 龙胆紫(亦 称结晶紫)来染细菌,所有细菌都染成了紫色,然后再涂以革兰氏碘液,来加强染料与菌体的 结合,再用95%的酒精来脱色2030秒钟,有些细菌不被脱色,仍保留紫色,有些细菌被脱 色变成无色,最后再用番红或沙黄复染1分钟,结果已被
2、脱色的细菌被染成红色, 未脱色的细 菌仍然保持紫色,不再着色,这样,凡被染成紫色的细菌称为革兰氏阳性菌(G+菌);染成红色的称为革兰氏阴性菌(G菌)。实际意义常见的革兰氏阳性菌有:葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤 风杆菌等;常见的革兰氏阴性菌有:痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、 百日咳杆菌、霍乱弧菌及脑膜炎双球菌等。在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对 青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感);而革兰氏 阴性菌则对青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的 流行性脑膜炎双球菌和淋病双球菌对青霉素敏感), 而对链霉素、氯霉素等敏感。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌,
3、在选择抗生素 方面意义重大。结构特点革兰氏阳性菌细胞壁较厚,约2080nm。肽聚糖含量丰富,有1550层,每层厚度1nm, 约占细胞干重的5080%。此外,尚有大量特殊组份 磷壁酸(teichoic acid)。磷壁酸是由核糖 醇(ribitol)或甘油(glyocerol)残基经由磷酸二键互相连接而成的多聚物。磷壁酸分壁磷壁酸 (wall teichoic acid)和膜磷壁酸(membrane teichoic acid两种,前者和细胞壁中肽聚糖的 n-乙酰胞壁酸 连结,膜磷壁酸又称脂磷壁酸(l革兰氏阳性菌的细胞壁ipteichoic acid)和细胞膜连结,另一端均游离于细胞壁外。磷壁酸
4、抗原性很强,是革兰氏阳性 菌的重要表面抗原;在调节离子通过粘肽层中起作用;也可能与某些酶的活性有关;某些细菌 的磷壁酸,能粘附在人类细胞表面,其作用类似菌毛,可能与致病性有关。此外,某些革兰氏 阳性菌细胞壁表面还有一些特殊的表面蛋白,如a蛋白等,都与致病有关。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构显著不同,导致这两类细菌在染色性、抗原性、 毒性、对某些药物的敏感性等方面的很大差异。革兰氏染色的结果取决于细菌细胞壁的结构即革兰氏染色原理为:G+菌细胞壁示意图G +菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小, 故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。G菌:肽聚
5、糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。G-菌细胞壁示意图革兰氏阳性菌细胞壁厚约20-80nm,有15-50层肽聚糖片层,含20-40%的磷壁酸。革兰氏阴 性菌细胞壁厚约10nm,仅2-3层肽聚糖,另外还有脂多糖、细菌外膜和脂蛋白。放线菌是另一大类革兰氏阳性菌,根据 DNA中鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的含量,放线菌被 称为高G+C革兰氏阳性菌,而厚壁菌被称为低G+C革兰氏阳性菌。如果细胞的第二层膜是衍 生特征,这两类革兰氏阳性菌可能是细菌基部的分支,否则它们可能组成关系相对较近的单系 群。它们被认为可能是古细
6、菌和真核生物的祖先,因为它们都缺乏第二层膜,并且具有一些生化上的相似性,比如含有固醇类。此外,尽管恐球菌-栖热菌(Deinococcus-Thermus)类细菌结构上类似革兰氏阴性菌,但也可被染成革兰氏阳性原理学说 革兰氏染色原理目前有三种观点:等电点学说、化学学说和渗透学说。等电点学说革兰氏阳性菌的等电点在pH2-3,比阴性菌(pH4-5)低,加之碘为弱氧化剂,可降低革 兰氏阳性菌的等电点, 致使两类菌的等电点差异扩大, 因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性 菌更强。化学学说碘液在菌体内与结晶紫结合后又和菌体内核糖核酸镁盐 -蛋白质复合物结合,此结合物不 易被丙酮酒精脱掉, 呈革兰氏染色阳性。
7、 因革兰氏阴性菌缺乏核糖核酸镁盐, 故对碘与结晶紫 结合物摄取少,且不牢固,易被丙酮酒精脱色而呈革兰氏染色阴性。渗透学说乙醇使阳性菌所含粘肽多糖脱水而致细胞壁间隙缩小, 通透性降低, 在菌体内保留了染料 -碘复合物,呈紫色。阴性菌含粘肽少,细胞壁变化不大,通透性不受影响,菌体内的染料 -碘 复合物较易透出,失去紫色,被复染成为红色。革兰氏阴性菌 ,大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病.常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌、霍乱 弧菌及脑膜炎双球菌等。革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感 ,可以选择氟喹诺酮类药物如诺氟沙 星,左氧氟
8、沙星等,也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。革兰氏阳性菌, 大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌, 它们能产生外毒素使人致病, 常见的 革兰氏阳性菌有:葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。可 以选择青霉素族,头孢曲松钠等。无论阳性菌还是阴性菌都有杆菌和球菌。 葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌是临床最为常见的病 原菌,葡萄球菌属于革兰阳性球菌, 大肠杆菌属于革兰阴性菌中的肠杆菌科, 除大肠杆菌以外, 临床较常见的肠杆菌科细菌还有变形杆菌、沙门氏菌、克雷白杆菌;绿脓杆菌属于假单胞菌, 为非发酵菌,是临床常见的较耐药革兰阴性杆菌。 抗生素是大环内脂类抗生素,其代表药是
9、 红霉素、交沙霉素、利君沙、罗力得、罗红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素、严迪等。此类药品名 称较为混乱,其实都是红霉素的衍生物,主要用于革兰氏阳性球菌引起的呼吸道、口腔、 耳鼻 喉、皮肤、泌尿生殖系统和骨感染,以及预防急性关节炎复发,对于支原体、衣原体、军团菌 引起的肺部感染有特殊的疗效。 此类药的主要副作用为胃肠道反应、 肝功紊乱和皮肤过敏反应 等,对大环内脂类药过敏者禁用。 抗生素是喹诺酮类抗生素,其代表药为环丙沙星、诺氟沙 星、可乐必妥、泰利必妥、 特美力等。此类抗生素主要用于革兰氏阴性杆菌为主的泌尿生殖系 统、肠道及耳鼻喉感染,而且对耐药肠球菌有效,对淋病也有较好的疗效。肝肾功能不全的患 者应减量使用,对于喹诺酮类药物过敏者及生长发
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