




下载本文档
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、高考专题 05 克隆技术(选修一、三)不会的作上标记过后查书和资料。查阅后请把答错的或不会的题再答一遍,最终要做到所有题目的答案脱口而出! 此练习最终需要能够在 25 分钟内完成。克隆和理论基础1. 什么叫克隆?克隆的理论基础是什么? 克隆作动词讲就是无性繁殖,作名词讲就是无性繁殖系,即一个亲本无性繁殖得到的子代群。克 隆的理论基础是细胞的全能性。2. 如何从分子、细胞、个体三个不同水平理解克隆的定义? 分子克隆是指 DNA 分子的复制;细胞克隆指细胞的无性分裂,包括原核细胞的二分裂,真核细胞 的有丝分裂和无丝分裂;个体克隆指个体的无性繁殖,包括细菌的分裂生殖、酵母菌的出芽生殖、 放线菌和霉菌
2、的孢子生殖、植物的组织培养、植物的营养生殖、动物的体细胞克隆等。3. 什么是细胞全能性?细胞具有全能性的根本原因是什么?举例说明细胞具有全能性? 细胞全能性指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。细胞具有全能性的根本原因是细 胞核中含有该物种的全部遗传物质。植物组织培养、动物体细胞克隆、动物胚胎分割移植技术都 体现了细胞的全能性。4. 什么细胞全能性最高?比较不同细胞(受精卵、生殖细胞、各种干细胞、成熟体细胞)的全 能性的高低?受精卵的全能性最高。全能性高低:受精卵生殖细胞各种干细胞成熟体细胞。5. 什么是细胞分化?细胞分化的实质是什么?同一生物体的不同分化细胞表达的基因完全不同 吗?细
3、胞分化是指同种细胞的后代,在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的 实质是基因选择性表达。同一生物体的不同分化细胞表达的基因绝大部分是相同的,因为它们的 基本代谢都是相同的,这些代谢所需要的蛋白质也是相同的,分化的不同细胞中只有部分决定特 定性状的基因表达是不同的。6. 细胞分化程度与细胞全能性之间有何关系? 一般来说,细胞分化程度越高,细胞的全能性越低。但也有例外,成熟生殖细胞的分化程度是很 高的,但其全能性仅次于受精卵。植物细胞工程1. 什么是细胞工程?细胞工程的目的是什么? 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作, 按照人们的
4、意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据操作对象的 不同,可以分为植物细胞工程和动物细胞工程。总体上看,细胞工程的目的是改变细胞内的遗传 物质或获得细胞产品;分开来看,植物细胞工程主要是位获得植物体,也有些是为了获得植物细 胞产品,如培养人参的愈伤组织细胞获取人参皂甙,培养紫草愈伤组织细胞获取紫草素;动物细 胞工程的目的有的是为了获取更多的离体细胞,有的是为了获取细胞产品,如单克隆抗体的制备。2. 细胞在生物体内为什么不能表现全能性?细胞在生物体内受到机体的相应调控(激素调节、神经调节等),不能独立完成脱分化和再分化。3. 植物细胞的全能性得以实现的条件是什么?离体、适
5、宜的营养物质、相应的激素诱导、适宜的培养条件(温度、光照、pH)、无菌4什么是植物组织培养,基本原理是什么,基本过程怎样?植物组织培养是指在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞(如叶、根、芽、茎、花瓣的一部分或花粉等),培养在人工配制的培养基上, 给予适宜的培养条件(光照和温度) 诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株的过程。植物组织培养的基本原理是植物细胞 的全能性。基本过程如下图所示:鳶倚的世韵毎 站#甘亠>常.脂X 2 琏咅比,巒伤專今世輾.芽 啖E 會魅葩f蚪喘CM馆俱f我胜献fl倉韵悴5什么叫外植体?植物的哪些部分可以做外植体?获取外植体时要注意什么?外植
6、体是指用来进行植物组织培养的离体器官、组织或细胞。从理论上讲,所有植物的活细胞都 可做外植体。获取外植体时尽可能选取生长健康、容易消毒的器官或组织。6什么是愈伤组织?愈伤组织细胞有什么特点?它是如何形成的?愈伤组织是外植体培养一段时间后脱分化形成的薄壁细胞群,这些细胞排列疏松而无规则,高度 液泡化,呈无定形状态。愈伤组织细胞恢复了细胞全能性,是全能细胞,能再分化成完整植物体。7什么叫脱分化(逆分化)?脱分化是一种分化吗,为什么?脱分化是指高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,也叫去分化或逆分化。脱分 化是与细胞分化相反的过程,不是细胞分化。8什么是再分化?再分化是一种分化吗,为什么
7、?再分化是指已经脱分化产生的愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程。再分化相对 外植体以前的形成过程,是再次分化,当然是分化。9什么是胚状体?胚状体是如何形成的?胚状体是植物组织培养过程中,在植物组织块或愈伤组织上产生的一种类似于植物受精卵发育成 的胚的结构,包括胚芽、胚轴、胚根。它是愈伤组织细胞脱分化形成的,相当于植物的幼体,已 经没有全能性。10. 植物组织培养的培养基包括哪些营养?植物组织培养的营养物质包括各种矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物。11. 植物组织培养需要添加哪些激素(植物生长调节剂),它们如何诱导愈伤组织再分化? 植物组织培养添加的激素有植物生长素和细胞分裂素。它
8、们对愈伤组织的诱导作用如下表:使用方法实验结果使用顺序先使用生长素,后使用细胞分裂素利于细胞分裂,不分化先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高生长素用量与细胞分裂素用量的比值高利于根分化,抑制芽形成低利于芽分化,抑制根形成适中促进愈伤组织的形成12. 植物组织培养时需要哪些外界条件?要注意哪些事项?主要的外界条件包括适宜的温度和光照。培养过程中要注意防止微生物的污染。13. 植物组织培养技术有哪些用途?开辟了植物繁殖的新途径,包括植物微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子。进行农作物新品 种的培育,包括单倍体育种、突变体的利用、与转基因技术结合培育转基因植物。工厂化生 产
9、植物细胞产物14. 什么是植物的微型繁殖,有什么优点?植物微型繁殖技术是指用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术,也叫快速繁殖技术。其优点 有:保持优良品种遗传特性;取材少、培养周期短,繁殖率高,便于自动化管理,因此能实现高 效、快速、大量繁殖种苗。15. 为什么作物长期种植会染毒?如何实现作物脱毒?由于大多数园艺作物采用无性繁殖法,病毒在营养体内传染,并逐代积累,危害相当严重。病毒繁殖运输速率比茎尖分生组织细胞生长速率慢,这样茎尖区域部分细胞就没有病毒,利用茎 尖组织培养就可得到脱毒苗。其优势是脱毒苗效果好,后代遗传稳定,产量和品质明显提高。16. 人工种子是如何制成的?人工种子与有性生殖产
10、生的种子相比有哪些优点和不足?人工种子是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等材料,经过人工薄膜包装得到的种子。人工种子与常规有性生殖产生的种子比较具有“生产周期短;植株生长整齐,不会出现性状分离;生产不受季节、气候和地域的限制;制种车间化,占地面积小”等优点。但人工种子是无性繁殖的产物,变异小,其种群的适应性较低。17. 单倍体育种与植物组织培养、花药离体培养之间有什么关系?花药离体培养的过程实质就是植物组织培养,只是所用的外植体是花药。单倍体育种包括三个步骤,第一步是具有相对性状的纯合亲本杂交得到F1,第二步是取 F1的花药进行离体培养得到单倍体植株,第三步是用秋水仙素处理单倍体
11、植株得到纯合品种,然后人工选择符合要求的个体。18. 如何利用突变体培育作物新品种?在植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断分生状态,容易受到培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响而产生突变。从这些产生突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变 体,进而培育成新品种。突变体的产生有的是自发的,有的是人工利用理化因素诱导的。19. 什么是细胞产物的工厂化生产?可以生产哪些产物?有什么优点?工厂化生产植物细胞产物,一般把细胞培养到愈伤组织阶段,然后利用果胶酶使细胞分散,在特定发酵罐中用液体培养基培养。工厂化生产的细胞产物包括蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。例如:利用植物组织培养
12、技术生产人参皂甙的速度比栽培人参快100倍以上,其药用成分和药理活性与栽培人参相似,甚至更加优良。20. 什么是植物体细胞杂交?植物体细胞杂交时是否需要考虑植物的亲缘关系,为什么?植物体细胞杂交是指将来自于不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并且把杂种 细胞培育成新植物体的技术。杂交时不需要考虑植物的亲缘关系,因为不同植物细胞细的胞膜基 本结构是相同的,只要制备的原生质体能够发生融合,就能够实现植物体细胞杂交。21. 植物体细胞杂交的目的是什么?具体过程怎样?理论基础是什么?技术基础是什么?植物体细胞杂交的目的是培养出自然界没有的杂种植株。理论基础包括植物细胞的全能性和细胞膜的流动
13、性,技术基础是植物组织培养。具体过程如下: 植嚨小鈿腕植物B划胞去變頂生质怵A區生頂林B聽舍(物理、化学法) 融合的厚生威体ABI卑生细胞壁朵种蝴胞AB脱分优 她苗粗织(再分化 禺种植秣22. 什么叫原生质体?什么叫原生质层?如何获得植物的原生质体?完整的动物细胞或去壁的植物细胞都是原生质体。原生质层是指成熟植物细胞的细胞膜、液泡膜, 以及两层膜之间的细胞质共同组成的结构。所有活细胞都有原生质体,但只有成熟的植物细胞或 酵母菌细胞有原生质层。获取植物原生质体的方法是酶解法,常用的酶是纤维素酶和果胶酶。获 取细胞原生质体的方法也是酶解法,常用的酶是溶菌酶。PEG (聚乙二醇)诱导。23. 如何促
14、进植物原生质体的融合? 物理方法包括离心、振动、电击,化学方法是用24. 原生质体可能有哪些融合类型? 主要有自体融合( AA 融合和 BB 融合)和异体融合( AB 融合)25. 原生质体融合成功的标志是什么?该过程与哪种细胞器的关系密切? 原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁,该过程与高尔基体密切联系。26. 融合后的原生质体能够继续分裂吗?如果能,其分裂方式是什么? 能,分裂方式是有丝分裂。27. 由植物体细胞杂交引起的生物变异属于哪一种? 染色体(数量)变异。28. 植物体细胞杂交获得的生物一定是多倍体吗,为什么? 不一定。如果用不同植物的花药离体培养得到单倍体,再用单倍体的体细胞进行
15、杂交,得到的就 不是多倍体。但这样得到的个体往往不能有性生殖,因为细胞内没有同源染色体,减数分裂没有 联会现象,不能产生正常生殖细胞。29. 植物体细胞杂交获得的生物一定是新物种吗,为什么? 如果是用不同物种的体细胞杂交得到的生物,一定是新物种,因为杂种植株与原来的两种植株都 存在生殖隔离。30. 能够把植物原生质体和动物体细胞融合吗,为什么?这样能得到新物种吗,为什么? 理论上是可以的,因为它们的细胞膜基本结构相同,能够发生融合。这样一般只能得到杂种细胞, 不能得到新物种,因为二者的亲缘关系相隔太远,染色体会相互排斥,使细胞不能体现全能性。31. 植物体细胞杂交这一育种方法的最大优点是什么?
16、 能克服远源杂交不亲和的障碍。动物细胞工程(一)动物细胞培养1. 什么是动物细胞工程? 动物细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的 操作,按照人们的意愿来改变动物细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。2. 动物细胞工程包括哪些技术?动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体3. 动物细胞工程的技术基础是什么? 动物细胞培养4. 动物细胞培养的理论基础是什么? 动物细胞可以在体外增殖5. 动物细胞培养的具体过程是怎样的?取动物胚胎或幼龄动物的器官或组织T剪碎T用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞T制成细胞悬液T转入培养瓶中
17、进行原代培养T贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。6. 动物细胞培养液中有哪些营养成分?其与动物体内的什么成分最相似,为什么? 培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、维生素、微量元素、动物血清(或血浆) 等。动物细胞培养液的成分与动物血浆的成分相似,这是人工模拟动物的内环境,提高动物细胞 的成活率并便于其分裂增殖。7. 动物细胞培养液与植物组织培养的培养基、微生物培养基的成分有什么异同,为什么? 三种培养基都含有无机盐、水、碳源、氮源。动物细胞培养液中添加有动物血清或血浆,植物组 织培养液和微生物培养基都没有;植物组织培养液添加有植物激素,动物细
18、胞培养液添加动物促 生长因子(含激素),微生物培养基不需要加激素。微生物培养基成分最简单,动物细胞培养液 成分最复杂。8. 动物细胞培养液中常用胎牛血清,为什么不用提供细胞的动物的血清?能用成年牛的血清吗, 为什么?用来获取培养细胞的动物常是小白鼠、鸡胚等小型动物,血清含量非常少。而动物细胞培养过程 中,由于动物细胞的接触抑制以及不断产生有害代谢产物,需要不断传代培养并更新血清,因此 血清用量很大。胎牛的血清相对较多,容易获取。并且胎牛因为没有接触过外来抗原,血清中没 有相应的免疫活性物质和免疫效应细胞,不会对培养细胞发生免疫反应。成年牛血清虽然量很大, 但血清中富含免疫活性物质和免疫效应细胞
19、,或对培养细胞发生免疫反应使培养细胞死亡。9. 动物细胞培养液中为什么要加入抗生素? 动物细胞培养过程中,因为动物细胞培养液和动物细胞本身都含有丰富的营养物质,非常适宜各 种微生物的繁殖,添加各种抗生素可以防止微生物的感染和繁殖。10. 动物细胞培养液中红色的物质是酚红,加入它的目的是什么?pH加入酚红是监测培养液 pH 的变化。在碱性条件下,酚红呈红色。动物细胞培养液为弱碱性( 值:7.2-7.4 ),培养箱中的 CO2 会避免其 pH 升高,但细胞呼吸产生的 CO2 和其它酸性物质可能 导致溶液 pH 降低。溶液 pH 降低时,酚红就会褪色,这时通过观察透明玻璃培养瓶中溶液的颜色 变化就可
20、以发现培养过程中的异常现象,并迅速进行补救。11. 什么是原代培养?什么是传代培养?植物细胞能够传代培养吗? 原代培养是指分散的细胞悬液进行第一次培养。传代培养是指将原代培养的细胞分瓶培养。因为 一般细胞都能培养到 10 代左右,所以有时把 10 代以内的培养都叫原代培养, 10 代以上的培养称 为传代培养。植物细胞不会发生接触抑制,所以都能传代培养。12. 在传代培养过程中,动物细胞发生了哪些变化?传代培养 10 代后大部分死亡, 少数存活下来, 这些细胞能传到 4050 代。之后, 其中大部分细胞 又不再分裂而衰老死亡,但少数细胞遗传物质改变,并带有癌变特点,能在培养条件下无限增殖。13.
21、 传代培养过程中,为什么要定期更新培养液? 因为动物细胞培养过程中会产生各种有害代谢产物,不更换新鲜培养液会导致培养细胞死亡。14. 为什么常选用动物胚胎细胞或幼龄动物的组织细胞进行培养? 因为这些细胞的分裂能力强。15. 为什么要把动物细胞分散成单细胞以后再培养?如何分散动物细胞? 分散成单个细胞有利于细胞充分接触营养物质并增殖。常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞。16. 为什么选用胰蛋白酶或胶原蛋白酶对动物组织进行处理?这利用了酶的什么特性?能用胃 蛋白酶替换吗,为什么?因为动物细胞之间相连物质主要是一些蛋白质,利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶的专一性,可以水解 这些蛋白质使细胞分散开。不能用胃蛋白
22、酶替换,因为胃蛋白酶的最适 pH 值偏低( 1.8-2.2 ),再 这种 pH 值下酶解会使细胞死亡,如果在细胞的适宜pH ( 7.2-7.4 )下酶解细胞,又会使胃蛋白酶失活。17. 用胰蛋白酶处理细胞的时间有限制吗,为什么? 有严格限制。酶解时间过长,细胞膜上的蛋白质也会被水解导致细胞死亡,酶解时间过短,不能 使细胞分散。18. 动物细胞培养中哪些阶段要用到胰蛋白酶? 最初分散细胞时,以及每次传代培养时把贴壁生长的细胞从培养瓶上脱离下来。19. 什么是贴壁生长?什么是接触性抑制? 细胞贴壁生长是指悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长。接触性抑制指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止
23、分裂增殖的现象。20. 血细胞在溶液中培养会出现贴壁生长吗?癌细胞在体外培养会出现接触性抑制吗?因为血细胞在生物体内就是游离在血液中,体外培养时也往往不会贴壁生长,而是悬浮培养。癌 细胞能无限增殖,所以不会发生接触性抑制,但也需要定期更换培养液和传代。21. 动物细胞培养过程中需要注意哪些环境条件,各是如何要求,为什么?要注意适宜的温度、pH值、氧气、无毒无菌。所有条件需要接近细胞在体内生长的实际条件,这 样细胞才能正常生长增殖。22. 动物细胞培养为什么要置于C02恒温培养箱中培养?添加 C02的目的是什么?因为动物细胞生长过程中会产生一些碱性物质,置于CO 2培养箱中,可以缓冲溶液(溶液中
24、含有NaHCO 3与箱中释放的 CO 2形成缓冲对)中pH值的变化。23. 动物细胞培养技术有哪些方面的应用? 生产蛋白质生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。培养基因工程中使用的受体细胞。培养细胞用于体外检测有毒物质,判断物质的毒性。如检测致畸、致癌物质。培养各种正常 的或病变的细胞,用于生理、病例、药理等方面研究,为治疗和预防疾病提供理论依据。如为皮 肤大面积烧伤病人培养皮肤细胞进行皮肤移植。(二)动物体细胞克隆1. 动物体细胞克隆需要用到哪些生物技术?技术基础是什么?理论基础是什么?动物细胞培养、动物细胞核移植、动物早期胚胎培养、胚胎移植。技术基础是动物细胞培养。理 论基础是动物细胞
25、核的全能性。2. 动物体细胞克隆的操作过程是怎样的?甲动输咸熟律处一映取細胞卷、栓移重蛆电剝数卄理啊植為动哄叭“胞M麵胞一异細胞細胞淤沁I于喘g祖哄3. 为什么不能利用一个完整的动物细胞直接克隆出新的个体?因为动物细胞的全能性较低,一个完整动物体细胞目前无法克隆出新个体。4. 动物体细胞核移植的供核细胞通常是什么细胞,受核细胞常是什么细胞?用于核移植的供核细胞一般都选用传代10代以内的细胞,受核细胞是去核的卵细胞。5. 为什么常用卵母细胞(卵细胞)作为核移植的受核细胞?卵细胞的体积大,操作容易;卵细胞的细胞质中含有一些其它细胞没有的化学物质,容易诱 导重组细胞发育成完整个体;卵细胞营养物质丰富
26、,能满足胚胎发育早期的营养需要。6. 动物体细胞克隆过程中是否发生了变异?属于哪一种变异类型? 发生了基因重组。7. 克隆得到的动物遗传特性与供核个体完全相同吗?为什么?不完全相同,因为受体细胞质中还有线粒体DNA。8. 动物体细胞克隆是否体现了动物细胞的全能性?为什么?没有,只是体现了动物细胞核的全能性。9. 动物体细胞克隆有哪些应用?加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育;保护濒危物种,增加存活数量;克隆转基因动物,作为生物反应器,生产医用蛋白;克隆转基因动物可以作为异种移植的供 体,可以用于组织器官的移植;对克隆动物的研究可使人们更深入地了解胚胎发育及衰老过程;利用克隆动物做疾病模型,可
27、使人们更好地追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病;人的核移 植胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的组织、器官后,可用于组织器官的移植。10. 生殖性克隆与治疗性克隆有何异同?生殖性克隆的目的是利用克隆技术繁育新个体,属于人的个体水平克隆;治疗性克隆的目的是治 疗疾病,属于细胞水平克隆。相同点是它们都属于无性繁殖,生殖性克隆的初始阶段与治疗性克 隆相同。11. 如何理性看待生殖性克隆与治疗性克隆?中国认为应禁止生殖性克隆即克隆人试验,不禁止以治病救人为目的的治疗性克隆研究。我国政 府对生殖性克隆坚持四不原则:不支持、不赞同、不承认、不接受。(三)动物细胞融合与单克隆抗体1. 动物细胞融合的技术基础是什么
28、?理论基础是什么?操作过程怎样? 技术基础是动物细胞培养,理论基础是细胞膜的流动性。操作过程如下:2. 动物细胞融合过程中需要对融合细胞进行筛选吗?需要,因为既有自体融合细胞,还有异体融合细胞,还有没有发生融合的细胞,融合细胞中还有 多个细胞融合的杂交细胞。3. 动物细胞融合与植物原生质体融合相比,有哪些异同点?基本原理都是利用细胞膜的流动性,融合方法基本相同。不同点是动物细胞融合还可以用灭活的 病毒诱导融合。4. 动物细胞融合有哪些用途?可用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等,特别是利用杂交瘤技术制造单克隆 抗体。5. 动物体液免疫的过程是怎样的?二次免疫却】:,话励亍“吉疫|
29、 :7応无产记忆B细胞新的记忆B细胞龜初效应E细胞务抗体:与杭原特异性*(浆细胞)蹈 结台发挥免疫效应原f细胞器鮒跖*I直接刺激*(浆细胞)、*£感应阶段反应阶段效应阶段6什么细胞能够合成和分泌抗体?抗体合成和分泌的具体过程是怎样的?浆细胞能够合成和分泌抗体。具体过程为:核糖体合成多肽t内质网初步加工t具膜小泡运输t高尔基体进一步加工、包装T 分泌细胞运输到细胞膜t 细胞膜胞吐到细胞外。7. 每一个B淋巴细胞只能分泌一种抗体吗?是的。8. 每一种抗原只能刺激机体产生一种抗体吗?不是。因为每一种抗原往往有多个抗原决定簇(除非是单一抗原),会刺激机体产生多种抗体。9. 能够把效应B细胞直接在体
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 签定朝鲜停战协议书模板
- 测绘业务分包协议书范本
- 燃气安全合同协议书模板
- 深圳农民房交易协议合同
- 活动承包合同协议书范本
- 汽柴油沥青销售合同范本
- 村委秸秆清运协议书范本
- 稠州银行资金托管协议书
- 第三方委托装修协议合同
- 江苏商标申请代理协议书
- 国家重点研发计划“公共安全风险防控与应急技术装备”2023年立项项目
- YS/T 320-2014锌精矿
- 09S304 卫生设备安装图集
- 酸雾抑制剂化学品安全技术说明书
- 重点监管的危险化学品名录(完整版)
- 解三角形专题 - (解析版)
- 高等教育心理学学习提纲整理
- 桩基施工安全检查表
- 水玻璃有机酯自硬砂工艺简介
- 2022年公司管理制度发布流程
- XXX医院管道护理工作总结
评论
0/150
提交评论