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1、苯对小鼠急性吸入毒性试验研究摘要:目的 研究苯急性毒性,观察气态苯吸入染毒致小鼠急性中毒一般表现和神经表现,探讨急性毒性机制。方法 通过建立气态苯静式吸入染毒小鼠的动物模型,实验组分别按33.9mg/L、43.25mg/L、55.21mg/L、70.47mg/L、89.95mg/L、115.12mg/L剂量组,对照组为NS组,每组10只,雌雄各半。连续染毒1.5h后,观察急性中毒行为表现,分组记录死亡时间及死亡数。结果 苯具有急性毒性;小鼠苯染毒各组都有急性中毒的表现,表现为兴奋症状、抑制症状(闭眼、侧卧),呼吸急促转衰弱,除低剂量组外每组都有小鼠死亡。运用改良寇氏法公式得LC50=1.848
2、,故LC50=70.4mg/L;s=0.0193(LC50的标准误);LC50 95%CI(可信区间)=(64.71,76.73)。结论 小鼠静式吸入苯蒸气有急性毒性。LC50=70.4mg/L,属于低毒毒物。关键词:苯 小鼠 吸入染毒 急性中毒 LC50近年来, 由于室内装修引发的环境污染与健康问题受到了普遍关注,其中苯是目前主要室内空气污染物之一。室内环境中的苯主要来自建筑装饰中使用大量的化工原材料,如涂料、填料及各种有机溶剂等13。尽管到目前为止,开展了大量有关苯毒性调查研究工作,但关于苯中毒的发病机制迄今尚未阐明4。本文通过建立苯静式吸入染毒小鼠的实验模型,模拟人体实际暴露苯情况,探讨
3、苯对机体的急性毒性危害的机制,以便为深入研究苯的毒性效应,为人接触苯的健康效应评价提供生物标志物奠定理论基础。1 材料与方法1.1 实验动物与分组试验动物选择与处理:选择健康、成熟的昆明种小白鼠(沈阳医学院实验中心提供),1722g,雌雄各半,分别按性别称重,编号。预实验得出LD0与LD100,LD50的计算方法符合改进寇氏公式的条件,随机分组,分6个剂量组和一个NS组,每组10只5。1.2 受试物:国药集团化学试剂有限公司生产的分析纯液态苯,比重为0.89g/ml,纯度99.5%。1.3 染毒方法:A-F实验组按照表1剂量接受苯气体静式吸入染毒,连续染毒1.5h;G对照组也在同等条件下的染毒
4、柜内,以自然挥发的水蒸汽为空白对照。表1 A-G组染毒剂量情况组别对数剂量剂量(mg/l)加苯量(ml)A1.5333.92.3B1.63643.253.1C1.74255.213.9D1.84870.475.0E1.95489.956.4F2.06115.127.8G0001.4 观察指标及方法:观察小鼠最早死亡时间和数量及染毒期间小鼠的中毒症状,用改良寇氏法计算出LD50,进行毒性分级。1.5 仪器:(1)电子天平,JA21001型,上海精科天平厂;(2)染毒柜,60L,沈阳医学院毒理组实验室1.6 统计分析实验数据采用SPSS 22.0统计软件进行方差分析和q检验。2结果2.1 急性毒性
5、一般表现和神经表现染毒后小鼠出现不同程度中毒症状大致表现为:兴奋症状:痉挛,乱跑、乱窜、反射亢进、管状尾;抑制症状:软弱无力、运动迟缓、闭眼、侧卧;呼吸由缓慢变为深浅;高剂量组出现症状较早且明显,随后出现抽搐,更严重者死亡,剂量越低出现的死亡数越少,低剂量组一般不出现死亡6。2.2 各组动物死亡情况,由表2可见, 表2 静式吸入染毒1.5h小鼠死亡情况组别染毒剂量(mg/L)动物数(只)死亡数(只)死亡率(p)存活率(q)pqA33.9410001.00B43.2510001.00C55.2110001.00D70.471060.60.40.24E89.951090.90.10.09F115.
6、1210101.0002.3 LC50的计算:因改良寇氏法实验设计要求,因A和B组动物死亡数相同,故A组不参加计算。按改良寇氏法公式计算:m=Xki(p0.5) Sm=ipq/n m:LC50代入数据计算得,LC50=70.4mg/L,可信限为(64.71,76.73)。根据我国农药急性毒性分级标准:剧毒物质:20mg/m; 高毒物质:20mg/ m;中等毒物质:2002000mg/ m;低等毒物质:2000 mg/ m。苯为低毒物质。3 讨论研究苯的急性毒性有利于了解其急性毒性作用与机制,但是温度会影响其挥发性,影响毒作用,通过对苯的研究,了解了苯的急性毒性的危害,提高对苯急性毒性的认识,了
7、解到苯属于低毒物质,但是在以后的学习和生活还是应积极建立预防和控制苯中毒,减少苯带来的危害,提高生活质量7。本文通过建立苯蒸气静式吸入染毒的实验模型,研究苯致机体急性毒性危害机制。结果表明,苯染毒小鼠后,出现不同的一般急性中毒表现和神经表现。4 结论根据本试验,得出以下结论:(1) 苯具有急性毒性。(2) LC50=70.4mg/L,属于低毒毒物。5 参考文献1 Snyder R,Witz G,Goldstein SD.The toxicology of benzeneJ.Environ Health Per- spect,1993,100:393-396.2Lee BL,New AL,Kok
8、 PW,et al.Urinary trans,trans-muconic acid determined by liquid chromatography:application in biological monitoring of benzene exposureJ.Clin- Chem,1993,39(9):1788-1792.3Weisel C,Yu R,Roy A.Biomarkers of environmental benzene exposureJ.Environ Health Perspect,1996,104(Suppl6):1141-1145.4Wiester Mj,W
9、insett DW,Richards WJ,et al.Partitioning of benzene in and animalsJ. Environment Health Perspectives,2002,110(3):255-261.5Subrahmanyam VV,Ross D,Eastmind DA,et al.Potential role of free radicals in bernzene-induced myelotoxicity and leukemiaJ.Free Rad-ical Biological Biology and Medicine,1991,11:495-515.6Robert S.Benzene and
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