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文档简介

1、实验三 不同植物离体叶片抗逆性比较一、实验目的一、实验目的1 1、认识植物在逆境或者其他损伤的情况下,、认识植物在逆境或者其他损伤的情况下,细胞受损伤原理以及丈量方法细胞受损伤原理以及丈量方法2 2、掌握电导率的测定方法、掌握电导率的测定方法3 3、学会运用统计学方法,对不同植物在冷害、学会运用统计学方法,对不同植物在冷害后其细胞损伤程度进展比较和分析。后其细胞损伤程度进展比较和分析。二、实验原理二、实验原理 植物细胞膜对维持细胞的微环境植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。细胞和正常的代谢起着重要的作用。细胞膜不仅是分隔细胞质和胞外环境的屏膜不仅是分隔细胞质和胞外环境的屏障

2、,而且也是细胞与环境发生物质交障,而且也是细胞与环境发生物质交换的主要通道,又是细胞感受环境变换的主要通道,又是细胞感受环境变化刺激的部位。化刺激的部位。 细胞膜的选择透性是其维持细胞膜的选择透性是其维持生理功能的最重要的条件之一。生理功能的最重要的条件之一。各种逆境损伤都会呵斥质膜选择透性的改动或丧失,各种逆境损伤都会呵斥质膜选择透性的改动或丧失,例如低温、冰冻、干旱脱水等导致的细胞膜机械损例如低温、冰冻、干旱脱水等导致的细胞膜机械损伤以及逆境和衰老过程中的膜脂过氧化作用,都可伤以及逆境和衰老过程中的膜脂过氧化作用,都可以增大细胞膜通透性。因此,细胞质膜透性的测定以增大细胞膜通透性。因此,细

3、胞质膜透性的测定常作为植物抗性研讨中的一个重要生理目的。常作为植物抗性研讨中的一个重要生理目的。 当质膜的选择透性因逆境损伤而当质膜的选择透性因逆境损伤而明显改动或丧失时,细胞内的物质明显改动或丧失时,细胞内的物质( (尤其是尤其是电解质电解质) )大量外渗,从而引起组织浸泡液的大量外渗,从而引起组织浸泡液的电导率发生变化,经过测定外渗液电导率电导率发生变化,经过测定外渗液电导率的变化,就可反映出质膜的损伤程度和所的变化,就可反映出质膜的损伤程度和所测资料抗逆性的大小。测资料抗逆性的大小。 膜透性增大的程度与逆境胁迫强膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关,也与植物抗逆性的强弱有关。度有关,也与植

4、物抗逆性的强弱有关。 因此,比较不同植物或同一植物不因此,比较不同植物或同一植物不同种类在一样胁迫温度下膜透性的增大程同种类在一样胁迫温度下膜透性的增大程度,即可比较植物间或种类间的抗逆性强度,即可比较植物间或种类间的抗逆性强弱。弱。电导仪电导仪 电导率是物质传送电流的才干,是电阻率的倒数。在液电导率是物质传送电流的才干,是电阻率的倒数。在液体中常以电阻的倒数体中常以电阻的倒数电导来衡量其导电才干的大小。电导来衡量其导电才干的大小。电导率电导率-电阻率的倒数即称之为电导率电阻率的倒数即称之为电导率L L。电导电导L L的计算式如下式所示:的计算式如下式所示: L=l/R=S/l L=l/R=S

5、/l电导的单位用姆欧又称西门子电导的单位用姆欧又称西门子(S)(S)。用用S S表示,由于表示,由于S S单位太大。常采用毫西门子,微西门子单位单位太大。常采用毫西门子,微西门子单位1S=103mS=106S1S=103mS=106S。普通用当量电导来表示电导率。电导率普通用当量电导来表示电导率。电导率L L的单位是的单位是 (S/cm) (S/cm)电导仪的用法电导仪的用法DDS307型电导率仪型电导率仪机箱键盘显示器多功能电极架电极电导电极温度电极电导率:0.00S/cm-100mS/cmTDS:溶解性总固体, 衡量水中一切离子的总含量ppm) 0.00mg/L-1000mg/L温度: 0

6、99.9度运用过程:运用过程:1将多功能电极插入电极插座中,用蒸溜水将多功能电极插入电极插座中,用蒸溜水清洗电极,并将电极浸泡在双蒸水中。清洗电极,并将电极浸泡在双蒸水中。2翻开电源,仪器进入丈量形状,预热翻开电源,仪器进入丈量形状,预热30min3按压按压“电导率电导率/TDS为切换键。为切换键。4) 假设插上温度电极,那么电导显示为假设插上温度电极,那么电导显示为25度度的电导率值,假设不插温度电极,那么需求丈量的电导率值,假设不插温度电极,那么需求丈量当前液体温度,然后将温度调至当前温度。当前液体温度,然后将温度调至当前温度。5将被测液用玻棒搅均匀;用双蒸水冲洗电将被测液用玻棒搅均匀;用

7、双蒸水冲洗电导电极,将电极浸入被测液中,读取显示器上的导电极,将电极浸入被测液中,读取显示器上的数据,为当前被测液的电导率值数据,为当前被测液的电导率值us/cm).三、三、 实验资料实验资料1 1、资料处置、资料处置 采集所研讨植物的茎叶采集所研讨植物的茎叶4 48 8枝枝10cm10cm左右,分别左右,分别做如下处置用纸分包,并写好标鉴做如下处置用纸分包,并写好标鉴) )。1 1对照无冰冷处置对照无冰冷处置2 24 4度冰冷处置度冰冷处置30min30min3 30 0度冰冷处置度冰冷处置30min30min3 32020度冷害处置度冷害处置30min30min2 2、仪器和药品:双蒸水、

8、仪器和药品:双蒸水、 水浴锅、电导仪水浴锅、电导仪各组需求:电炉各组需求:电炉1 1台、塑料杯台、塑料杯1212个、大小烧杯各个、大小烧杯各2 2 只、试管只、试管1212支,试管夹支,试管夹2 23 3个个四、实验方法四、实验方法 浸泡法浸泡法 1 1、取材、取材 每处置取大小相当的植物叶片假每处置取大小相当的植物叶片假设干片设干片( (尽量保证叶片的完好性,少含尽量保证叶片的完好性,少含茎节茎节) ),用自来水洗净后再用蒸馏水冲,用自来水洗净后再用蒸馏水冲洗洗3 3次,用滤纸吸干外表水分,将叶片次,用滤纸吸干外表水分,将叶片剪成小片剪成小片 ( (避开主脉避开主脉) ); 每种处置下快速称

9、取鲜样每种处置下快速称取鲜样3 3份三份三个反复,每份个反复,每份0 01 g1 g,分别置于,分别置于10 10 m1m1去离子水的试管中,用玻棒搅动。使去离子水的试管中,用玻棒搅动。使样品浸入水中。盖上盖子置于室温下浸样品浸入水中。盖上盖子置于室温下浸泡处置泡处置12 h12 h。每。每1 1 植物有植物有4 4个处置,个处置,3 3 个反复,共个反复,共1212个试管。贴上标鉴。个试管。贴上标鉴。2 2、电导率的测定、电导率的测定 1 1先丈量空白电导率蒸溜水的先丈量空白电导率蒸溜水的电导电导 2 2用电导仪测定浸泡后的浸提液用电导仪测定浸泡后的浸提液电导电导(S1)(S1); 3 3然

10、后用沸水浴加热然后用沸水浴加热1Omin1Omin,冷,冷却至室温后摇匀,再次测定煮沸后浸提液却至室温后摇匀,再次测定煮沸后浸提液电导电导(S2)(S2)。五计算五计算按下式计算相对电导率值:按下式计算相对电导率值:相对电导率相对电导率L L= =S1-S1-空白电导率空白电导率/ /S2-S2-空白电导率空白电导率 S1: S1:煮前的电导率煮前的电导率 S2: S2:煮后的电导率煮后的电导率 空白电导率空白电导率: :蒸馏水的电导率蒸馏水的电导率 单位:单位:us/cmus/cm21SS相对电导度的大小表示细胞膜受损伤的程度相对电导度的大小表示细胞膜受损伤的程度 由于室温对照也有少量电解质

11、外渗,故由于室温对照也有少量电解质外渗,故按下式计算由于低温或高温胁迫而产生的外渗,按下式计算由于低温或高温胁迫而产生的外渗,称为损伤度或损伤性外渗。称为损伤度或损伤性外渗。 损伤度损伤度% %= =式中式中 Lt Lt 处置叶片的相对电导度;处置叶片的相对电导度; Lck Lck对照叶片的相对电导度。对照叶片的相对电导度。 1001CKCKtLLL1.1.比较不同植物经不同冰冷处置后叶片细比较不同植物经不同冰冷处置后叶片细胞透性的变化情况,并加解释。胞透性的变化情况,并加解释。2.2.计算相对电导率值,列表写上各植物不计算相对电导率值,列表写上各植物不同处置下的相对电导率值和损伤率。同处置下的相对电导率值和损伤率。3.3.比较不同植物的抗逆性。比较不同植物的抗逆性。六、分析与讨论六、分析与讨论 本卷须知本卷须知 1. 1. 整个过程中,叶片接触的器具必需整个过程中,叶片接触的器具必需绝对干净全部器皿要洗净,也不要绝对干净全部器皿要洗净,也不要用手直接接触叶片,以免污染。用手直接接触叶片,以免污染。 2. 2. 测定前电极要用双蒸水清洗,用后测定

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