冠状病毒科

1、冠状病毒科 冠状病毒在分类上属于冠状病毒科（coronaviridae）冠状病毒属（coronavirus)。冠状病毒的一个变种是引起“传染性非典型肺炎”的病原体。早在1937年讨论人员即从鸡体内分别出冠状病毒，呈球形或椭圆形，具有多形性，有包膜。电子显微镜观看发觉病毒的包膜上有类似日冕的棘突，故命名为冠状病毒（coronavirus)。除人冠状病毒外，冠状病毒属还包括自动物分别的其他6个冠状病毒种。 2003年4月16日， who宣布，严峻急性呼吸综合征（severe acute respiratory syndrome, sars）的病原体是一种新型冠状病毒，并将其命名为sars冠状病毒（

2、sars-coronary virus, sars-cov),sars冠状病毒抗原与人群中存在的一般冠状病毒抗体和抗冠状病毒oc43株的单克隆抗体均无交错反应。讨论认为该病毒很可能来源于动物，因为外界环境的转变和病毒适应性的增强则跨越了种系屏障而传染给人类，并实现了人与人之间的传扬。 一、生物学特性 冠状病毒直径为80160 nm，核衣壳呈螺旋状，包膜表面有花冠状突起。核酸为单正链rna，基因组为2000029000bp。对、酯类、紫外线以及理化因子较敏感，37数小时便丧失感染性。目前从人分别的冠状病毒主要有229e, oc43和sars冠状病毒（sars-cov）三个型别。冠状病毒可在人胚肾

3、及肠、肺的原代细胞中生长，感染初期细胞病变不显然，延续传代后细胞病变显然加强；与冠状病毒属中其他已知的成员不同，sars-cov病毒可引起vero和frhk-4细胞病变效应。 sars-cov对酸、脂溶剂、常用消毒剂及热敏感，56 30 min可灭活病毒，对低温有一定耐受性，在排泄物中可存活4天。 二、临床意义 sars-cov是sars的病原体。sars是2002年底至2003年上半年在世界上流行的一种急性呼吸道传染病，又称传染性非典型肺炎。自2002年11月16日我国广东省佛山市首次报道病例后，我国乃至世界快速形成流行趋势。截至2003年8月7日，世界上32个国家和地区浮现疫情，发病人数为

4、8465人，死亡人数为916人。我国内地发病人数5327人，死亡人数为349人。 患者是sars-cov的主要传染源，其传染性强，人群普遍易感，少数感染者被称为“超级传染源”，可感染数人至数十人。除患者外，带毒的动物也可引起传扬。传扬途径以近距离飞沫传扬和挺直接触呼吸道分泌物、体液传扬多见，少数也可通过消化道传扬。sars患者的病理变幻主要为肺实变。早期转变为肺水肿及透亮膜形成，符合早期急性呼吸窘迫综合征（ards)表现。之后肺泡腔内浮现大量的纤维黏液样渗出物，肺间质可见单核细胞浸润。部分患者肺泡内可见胞质内富含空泡的多核肺细胞。sars的发病机制既有病毒的挺直损伤，也有病毒诱发的细胞因子或其

5、他因子造成的免疫病理损伤。 sars的埋伏期为37天，起病急，以发热为首发症状，体温普通高于38，半数以上的患者伴头痛、关节肌肉酸痛、乏力等症状，部分患者可有干咳、胸痛、腹泻等症状。在发病第2天x射线胸片可浮现肺部阴影，肺部病变举行性加重，表现为胸闷、气促、呼吸困难，尤其在活动后显然。sars常引起严峻并发症，如休克、心率失常或心功能不全、肾功能伤害、肝功能伤害、dic、败血症、消化道出血等。who报告其死亡率约14。 三、微生物学检验 凡涉及sars-cov活病毒操作，均须在bsl4或bsl3试验室举行，包括标本采集在内的其他全部试验室操作，必需严格遵守试验室平安及个人防护措施。 （一）标本

6、采集与处理 将常规办法采集的鼻咽拭子洗液、漱口液、粪便等标本放入病毒保存运送液内，于28保存，长久保存需置于-70冰箱。急性期血清标本尽可能在发病初期采集，通常于发病后1周内，复原期血清标本在发病后34周采集。 （二）分别培养与鉴定 1分别培养 培养sars-gov选用vero或vero-e6细胞系，cpe的特点主要为病变细胞呈局灶性、变圆、折光变强，晚期展现葡萄串样表现。 2鉴定 (1)电镜检查法：将分别物用固定，置于碳化铜网上，用12负染色，电镜下观看结果，阳性者可见典型的冠状病毒，电镜检查仅用于分别物的鉴定，假如挺直用于标本的检查，阳性率较低。 (2)荧光免疫法：用荧光素标志的sars-cov单克隆抗体检测病毒感染细胞。 (3）核酸序列检测法：从培养物上清液提取病毒rna，逆转录合成cdn a文库，再举行亚基因组克隆，最后组装完成全基因测序，也可举行简便的部分基因测序。 （三）核酸检测 用巢式pcr及rt-pcr检测sars-cov的核酸，符合下面三项之一者方可推断为pcr检测结果阳性：起码需要两个不同解剖部位的临床标本检测阳性（如鼻咽分泌物和血液标本）；收集起码间隔2天的同一种临床标本检测阳性；在每一个特定检测中对原始标本用法两种不同的办法，或重复pcr办法检测阳性。 （四）杭体检测 who推举办法有elisa,ifa和中和实验(nt),