糖皮质激素治疗对正常及慢性支气管炎大鼠模型气道和肺组织毒蕈碱受体的影响

1、    糖皮质激素治疗对正常及慢性支气管炎大鼠模型气道 和肺组织毒蕈碱受体的影响        糖皮质激素(GC)治疗对气道毒蕈碱受体（MR）影响的研究很少。我们通过吸入高浓度SO2气体的方法建立大鼠慢性支气管炎（慢支）模型，观察GC治疗对正常及慢支大鼠气道和肺组织MR的影响。材料与方法(1)选体重100150 g雄性Wistar大鼠48只,随机分为：正常大鼠GC治疗7 d组8只，其对照组8只；正常大鼠GC治疗14 d组8只，其对照组8只；慢支大鼠GC治疗7 d组8

2、只，其对照组8只。(2)大鼠慢支模型的建立:将大鼠暴露于250 ppm的SO2气体,5 h/d,5 d/周,共7周, 模型经病理检查证实。(3) 给药方法:治疗组大鼠腹腔注射地塞米松(江苏扬州制药厂生产)1 mg.kg-1.d-1,对照组注射0.2 ml的生理盐水。（4）结合试验:一定量的细胞膜制剂,分别与浓度递增的二苯羟乙酸奎宁酯(3H-QNB)在27水浴中孵育60 min后,加入5 ml冰冷的生理盐水终止反应,迅速通过玻璃纤维滤膜行负压抽滤,滤膜用5 ml冰冷的生理盐水冲洗2次后,凉干,液闪仪测量放射性。由总结合减去非特异结合,所得特异结合数据依Scatchard公式计算1,求出最大结合容

3、量（Bmax）及平衡解离常数（Kd）,结果以±s表示,显著性检验用t检验。 结果慢支及正常组大鼠气道和肺组织细胞膜制剂与MR的标记配基3H-QNB在上述条件下所进行的结合试验,随着后者浓度的递增而达到饱和,Scatchard作呈一直线（表1）。由表1可见，地塞米松治疗7 d及14 d均明显降低正常及慢支大鼠气道和肺组织MR的Bmax，但不改变MR与拮抗剂的亲和力Kd值，与治疗7 d组相比，地塞米松治疗14 d并不能使正常大鼠气道和肺组织MR进一步降低。表1地塞米松对正常及慢支大鼠气道和肺组织M受体的影响（±s）组别只数Kd(pmol/L)Bmax(fmol/mg prote

4、in)治疗7 d组831±1327±5治疗7 d对照组832±2239±10治疗14 d组830±1429±7#治疗14 d对照组832±1941±8慢支治疗7 d组841±2331±6*慢支对照组834±1946±11注：治疗组与其对应对照组比较P<0.01,*P<0.005；与治疗7 d组比较#P>0.05 讨论GC用来治疗慢支已有数十年的历史，早先大多缺乏客观指标来评价疗效，主要根据主观症状，现在大量的证据已表明慢支是一种气道炎症性疾病，从而为慢支应用

5、GC治疗提供依据。一些研究表明，短期口服GC可使大约10%30%的慢支患者肺功能改善，长期小剂量GC治疗可延缓病情发展2。GC治疗慢支的作用机制目前尚未完全弄清，除了其抗炎作用外，有人认为还与其上调气道肾上腺素能受体(-AR)，纠正气道-AR功能紊乱，松弛支气管及下调气道MR，减轻迷走神经反射所介导的支气管痉挛有关3。Emala等3给气道高反应狗的模型皮下注射甲泼尼龙3 d后，同时测气道平滑肌MR和-AR，发现气道平滑肌MR明显下降而-AR则显著上调，从而证明GC可通过上调-AR及下调MR来调节肺功能。GC上调-AR的作用机制现已阐明,系直接通过加强基因表达而增加-AR蛋白的合成。GC下调气道

6、MR的作用机制尚未弄清，Emala等在体外将甲泼尼龙与狗的气道平滑肌细胞一起孵育3 d后发现，气道平滑肌MR并无明显下降，但-AR却显著上调，由此我们认为GC下调MR非直接作用，而是在体内通过一种不明中介物的间接作用所致。本组研究结果提示，GC治疗除了能够显著下调慢支大鼠气道和肺组织MR外，对正常大鼠气道和肺组织MR也具有相似程度的下调作用，表明这种下调可能与疾病无关，系一种非特异性的作用。对正常大鼠的研究结果还表明，与治疗7 d组相比，GC 治疗14 d并不能使正常大鼠气道和肺组织MR进一步降低，表明GC下调气道和肺组织MR有一定自限性。总之，除了上调气道-AR和抗炎作用外，本研究结果还提示

7、，GC治疗可显著下调正常及慢支大鼠气道和肺组织MR，从而降低气道迷走神经张力,可能对慢支患者有利，GC下调气道MR的作用机制及临床意义仍有待深入研究。 作者单位：王国扬（102300 北京矿务局总医院呼吸内科）姚婉贞（北京医科大学第三临床医学院呼吸内科）赵鸣武（北京医科大学第三临床医学院呼吸内科）刘乃奎（北京医科大学心血管研究室）唐朝枢（北京医科大学心血管研究室）参考文献1，Chiba Y,Misawa M. Characteristic of muscarinic cholinoceptors in airways of antigen-induced airway hyperresponsive rats.Comp Biochem Physiol,1995,111:351-357.2，柳涛.糖皮质激素受体与气流阻塞.国外医学呼吸系统分册，1999,19:77-78.3，Emala CW, Clancy J, Hirshman CA. Glucocorticoid treatment dec