《微生物学基础》

1、1 / 5平罗县职业教育中心Ping Luo Vocational Education Center教案所属系别：护理系？医化教研组授课班级：2014级19、20、21班主讲教师：丁英丽起止时间：2015年9月至2015年12月微生物学基础教案首页微生物学基础2 / 5授课教师丁 英丽课时序号39-40授课周次第12周授课时间2015.11.25授课对象2014级药剂专业授课班级2014级19、20、21班授课题目第七单兀微生物菌种保藏技术教学目标掌握：1、菌种衰退和复壮的概念。2、菌种保藏的目的和原理。 熟悉：菌种保藏的方法。教学重点与教学难点重点：菌种衰退和复壮的概念。 难点：菌种保藏的方

2、法。教学方法讲授、合作探究教 具 多媒体、板书教学内容知识回顾新课导入学习目标阅读授课内容：微生物菌种保藏技术本节小结知识延伸作业布置、课后预习布置作业P188,1、2、3、4题。参考资料微生物学基础/赵金海主编中国轻工业出版社出版，2015.4教学反思教学主要内容教学【知识回顾】一、名词解释遗传变异基因突变基因重组3 / 5教学主要内容程二、 基因突变的特点有哪些？三、 基因重组的方式有哪些？请描述其中可以将转化称为转染的过程。【新课导入】提问倒入新课。【教学目标】掌握：1、菌种衰退和复壮的概念。2、菌种保藏的目的和原理。熟悉：菌种保藏的方法。【授课内容】模块一菌种的衰退与复壮一、菌种的衰退

3、衰退是指由于自发突变的结果，而是某物种原有一系列生物学性状发生量变或质变的现象。菌种的衰退是发生在微生物细胞群中的一个由量变到质变的逐步演化过 程。【知识拓展】菌种原有的典型性状变得不典型时就称菌种退化，这种变异也称负变。【知识讲解】（一）菌种退化的原因衰退的原因：基因突变菌种不纯 培养条件不当常见的衰退现象：菌落和细胞形态的改变；生长速度缓慢，产孢子越来越少；代谢产物生产能力下降；（二）防止菌种衰退的方法控制传代次数（一般在DNA的复制过程中，碱基的错配率是5X10-4,自发突变的频率为10-810-9，米用良好的菌种保藏方法，可以减少移种 和传代的次数）；2创造合适的培养条件；3采用不易衰

4、退的细胞进行传代（对丝状微生物而言，通常采用稳定的单核孢子进行接种）；4采用有效的菌种保臧方法。二、菌种的复壮狭义的复壮是指在菌种已发生衰退的情况下，通过纯种分离和生产性能测定等方法，从衰退的群体中找出未衰退的个体，以达到恢复该菌原有典型性状的措施；广义的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常进行纯种的 分离和生产性能测定工作，以期菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变（正变）不断地从生产中选种。4 / 5教学主要内容菌种的复壮措施1纯种分离：（平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法等）。2通过寄主体内生长进行复壮（如杀螟杆菌的复壮3淘汰已衰退的个体（采用比较激烈的理化条件进行

5、处理，以杀死 生 命 力 较 差 的已 衰 退 个 体4联合复壮，用高剂量的紫外线辐射和低剂量的亚硝基胍联合处理。模块二 菌种的保藏一、菌种保藏的目的和原理目的： 存 活， 不 防 止 优随时为生产、科研提供优良菌种2、菌种保藏的原理：首先，要挑选典型菌种的优良纯种， 次，创造一个使微生物代谢不活泼、最好采用它们的休眠体进行保藏。 生长受抑制的环境条件。保护剂或酸碱中和剂，避免保藏过程中细胞受伤。二、菌种的保藏方法低温保方法：菌种管置4C冰箱 原理：低温下，微生物代谢强度明显下降 石蜡油低橡皮塞取代棉塞、加石蜡油。干将菌种置于土壤、 用于放线菌、 真空冷冻干燥法 加有保护剂的菌悬液在冻结状态下

6、予以真空干燥。 适用于各种微生物，便于大量保藏，菌种存活时间长，是目前最好的保藏 方法。液氮超低温保藏法 将菌种置于保护剂中，预冻后保存在液氮超低温冰箱中（ 适用于各种微生物的较理想的保藏方法【知识拓展】几种常用菌种保藏方法的比较再次,苴丿、添加藏法藏，定时传代保藏法藏法保燥保细纱、滤纸、硅胶等干燥材料上保藏。如砂土管法，适 芽孢菌和某些真菌保藏，保藏时间几至几十年。-196C)。方法名称主要措施适宜菌种保藏期评价5 / 5教学主要内容冰箱保藏 法（斜面） 冰箱保藏 法（半固 体）石蜡油封 藏法*沙土保藏 法冷冻干燥 法低温低温低温、缺氧干燥、尢宫养干燥、无氧、低温、有保护剂各大类 细菌、酵母菌 各大类*产孢子微生物各大类36月612月12年110年515年以上简便 简便 简便简便有效 简便有 效二、主要菌种保藏机构1国外著名菌种保藏中心ATCC、CSH、NIH、NRRL、WB、NCTC、CMI、CBS、IAM、IFO、AHU、KCC、SSI、WHO2、国内1978年7月，中国微生物菌种保藏管理