基因工程知识点

1、专题1基因工程1.1 DNA重组技术的根本工具1 .基因工程又叫DNA重组技术,是指依据人们的梦想,进行严格的设计,弁经过体 外DNA重组 和转基因 等技术,给予生物以新的遗传特征,从而创立出更切合人们需要的新 的生物种类和生物产品. 操作水平是DNA分子水平,操作环境是在体外.2 . “分子手术刀限制性核酸内切 酶.这种酶主假设从 原核生物 中别离纯化出来的. 迄今已从近300种微生物中别离出了约 4000种 限制酶. 能够区分双链DNA分子的某种 特定 核甘酸序列；切开两个两个核甘酸之间的磷酸二酯键,形成黏性尾端或平尾端.3 .“分子缝合针DNA连结 酶.将切下来的DNA片段拼接成新的DN

2、A分子,恢复被限制酶切开的 磷酸二酯键.种类：1E.coli DNA连结酶：只好将双链 DNA片段互补的 粘性 尾端之间连结起来2T4 DNA连结酶：既能够“缝合双链 DNA片段互补的 粘性 尾端,又可 以“缝合双链DNA片段的 平 尾端,但连结 平 尾端之间的效率比拟低4 .“分子运输车基因进入受体细胞的载体.作为载体的必需条件：能自我复制、有切割位点、有遗传标志基因等.载体的种类：细菌质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒1.2 基因工程的根本操作程序 1 .基因工程的根本操作步骤主要包含：目的基因的获得 ;基因表达载体的建立 ；将目的基因导入受体细胞 ；目的基因的检测与判定 . 2 .目的基

3、因的获得方法：从基因文库中获得、利用PCR提取目的基因、人工合成法.是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术.原理DNA双链复制.条 件：模板DNA ; RNA引物；四种脱氧核甘酸 ；热稳固DNA聚合酶Taq酶.方法：DNA 受热变性解旋为单链、冷却后 RNA引物与单链相应互补序列 联合、DN课合酶作用下延长合成互补链.4 .基因表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳固存在；能够 遗传 给下一代；使目的基因能够表达和发挥作用.5 .基因表达的载体的构成目的基因 +启动子+停止子+标志基因6.转变：目的基因进入受体细胞内,而且在受体细胞内保持稳固 和表达 的过程.7,导入植物细胞：农杆

4、菌转变 法表达载体导入农杆菌,再让农杆菌感染植物细胞这是双子叶植物和裸子植物中常用的基因转变方法；基因枪 法,这是票据叶植物中常用的基因转变方法； 花粉管通道 法,这种方法十分简易经济, 我国的转基因抗虫棉就是用这种 方法获得的.8,导入动物细胞：显微注射法,将基因表达载体提纯,用显微注射仪注射到受精卵中.9,导入微生物细胞：Ca 2+办理受体细胞成为 感觉态 细胞,再进行混淆.10 .检测能否插入目的基因,利用 DNA分子杂交 技术,目的基因DNA一条链作探针 与受体细胞中提取的 DNA杂交,看能否有杂交带.检测能否转录出了mRN A利用DNA分子杂交 技术,目的基因DNA一条链作探针与受体

5、细胞中提取的mRNA杂交,看能否有杂交带. 检测目的基因能否译成蛋白质.抗体 与蛋白质进行 抗原-抗体 杂交,看能否有杂交带.还能够依据其性状进行 个体 水平的判定.11 3基因工程的应用一、植物基因工程成就12 抗虫转基因植物一 杀虫基因：主要有 Bt毒蛋白 基因、 蛋白酶抵挡剂 基因、 淀粉酶克制剂 基因、 植物凝聚 素基因等.13 抗病转基因植物抗病基因： 使用最多的是 病毒外壳蛋白 基因和 病毒的复制酶 基因；抗真菌转基因植物中可使用的基因有 几丁质酶 基因 抗毒素合成 基因.14 其余抗逆转基因植物：抗逆基因： 调理浸透压的 基因使植物细胞浸透压高升以适应盐碱或干旱环境、抗冻 一蛋白

6、基因、抗除草剂基因.15 利用转基因改进植物的质量举例：将必需氨基酸含量多的 蛋白质编码 基因导入植物中,或许改变这些氨基酸合成途径中 某种重点酶的活性,以提升植物 氨基酸 含量.二、动物基因工程1 .用于提升动物生长速度：外源 生长激素基因2 .用于改进畜产品的质量：肠乳糖酶基因, 转基因牛的 乳糖 含量减少.3 .用转基因动物生产药物基因根源：药用 蛋白 基因+乳腺蛋白基因的 启动子成就：乳腺生物反响器4 .用转基因动物作器官移植的供体原理：使移植动物器官没有抗原,就不会发生免疫排挤 区区 之法！ 将器官供体基因组导入某种调理因子,以克制 抗原决定基因 的表达, 或想法 除掉抗原决定基因.

7、5 .基因工程药品根源：转基因 工程菌.成就：白细胞介素、扰乱素、抗体、疫苗、激素等.三、基因治疗1 .观点：把 正常基因 导入病人体内,使 该基因的表达产物 发挥功能,从而抵达治疗疾病的目的,这是治疗遗传病的 最有效 手段.2 .种类：体外基因治疗和体内基因治疗.3 .原理：遗传病患者一般缺乏 正常 基因,因此导入正常基因后,使基表达,即可对病情起到缓解作用.4 .4蛋白质工程的兴起1 .基因工程的实质：将一种生物的基因转移到另一种生物体内,后者能够产生它原来不能产生的 蛋白质,从而表现出新的性状.基因工程在原那么上只好生产自然界已存在的蛋白质,天然蛋白质不必定完整切合人类生产和生活的需要.2 .蛋白质工程的目的：生产 切合人们生活需要 的弁不是 自然界已存 在的蛋白质3 .蛋白质工程的目标：依据人们对 蛋白质 功能的特定需求,对蛋白质 的构造进行分子设计4 .蛋白质工程的根本门路：预期蛋白质功能一设计预期蛋白质 构造一推断应有的 氨基酸序列找到相对应的 脱氧核音序列,能够创立 自然界不存在 的蛋白质5 .观点：