分子生物学DNA重组与转座

1、第七章 DNA的重组与转座 7.1 同源重组 7.2 位点特异性重组 7.3 转座作用 7.4 逆转录转座子 广义上广义上，任何造成基因型变化的基因交流过程都，任何造成基因型变化的基因交流过程都叫遗传重组（叫遗传重组（genetic recombination）. 狭义上狭义上，指涉及到，指涉及到DNA分子内断裂分子内断裂-复合的基因交复合的基因交流，有时又称交换（流，有时又称交换（crossing over）. 通过不同个体间的基因交换，可以保证遗传的多通过不同个体间的基因交换，可以保证遗传的多样性，从而为选择奠定物质基础。样性，从而为选择奠定物质基础。 遗传重组包括遗传重组包括同源重组同源

2、重组，位点专一性重组位点专一性重组，转座转座重组和异常重组重组和异常重组。 7.17.1同源重组同源重组( (homologous recombination) 一、定义：同源重组也称交换，指减数分裂过程一、定义：同源重组也称交换，指减数分裂过程中染色体间遗传物质的交换，即在两个双螺旋中染色体间遗传物质的交换，即在两个双螺旋DNA分子中任何一对同源序列作底物进行交换。分子中任何一对同源序列作底物进行交换。 同源重组发生在同源重组发生在DNA 的同源序列之间。在生物细的同源序列之间。在生物细胞中很普遍，如真核生物非姊妹染色体之间的交换，胞中很普遍，如真核生物非姊妹染色体之间的交换，姊妹染色体的交

3、换，细菌及其某些低等真核生物的姊妹染色体的交换，细菌及其某些低等真核生物的转化、转导、接合等都属于同源重组。转化、转导、接合等都属于同源重组。同源重组的机制同源重组的机制（一）、断裂复合：（一）、断裂复合： 减 数 分 裂 中 ，减 数 分 裂 中 ，染色体减数分裂和配染色体减数分裂和配对时，在染色单体水对时，在染色单体水平上发生物理断裂，平上发生物理断裂，断裂可通过交叉重接断裂可通过交叉重接而解除张力，从而产而解除张力，从而产生两个相互重组的染生两个相互重组的染色单体。色单体。（二）重组过程（二）重组过程: :由由HollidayHolliday提 出 ， 后 经提 出 ， 后 经 M e

4、s s e l s o nM e s s e l s o n ，RaddingRadding修改，可以分为以下修改，可以分为以下几个步骤几个步骤. .1 1、切断切断（nickingnicking）：同源联）：同源联会的两个会的两个DNADNA分子中任意一个分子中任意一个出现单链切口（由某些出现单链切口（由某些DNADNA内内切酶产生）。切酶产生）。2 2 、 链 转 换链 转 换 （ s t r a n d s t r a n d displacementdisplacement）：切口处形成）：切口处形成55端局部解链，由细胞内类似端局部解链，由细胞内类似于大肠杆菌于大肠杆菌DNA Pol

5、 IDNA Pol I的酶系的酶系利用切口处的利用切口处的3-OH3-OH合成新链，合成新链，而把原有链转换出来，使原有而把原有链转换出来，使原有链成为游离的链成为游离的5-5-单链区段。单链区段。3 3、单链侵入单链侵入（single-strand invasionsingle-strand invasion）由链置换产生）由链置换产生的单链区段侵入到参与联会的另一条的单链区段侵入到参与联会的另一条DNADNA分子因局部解链分子因局部解链而产生的单链泡中。而产生的单链泡中。4 4、LoopLoop切除切除：侵入的单链：侵入的单链DNADNA与参与联会的另一条与参与联会的另一条DNADNA分分

6、子中的互补链形成碱基配对，同时把与侵入单链的同源子中的互补链形成碱基配对，同时把与侵入单链的同源链置换出来，由此产生链置换出来，由此产生D-LoopD-Loop，其单链区随后被切除降，其单链区随后被切除降解。解。5 5、链同化链同化（strand assimilation strand assimilation ）LoopLoop切除中产生的切除中产生的3-OH3-OH断头和侵入的单链的断头和侵入的单链的5-P5-P由由DNA LigaseDNA Ligase联接，同联接，同时侵入的单链沿时侵入的单链沿5-35-3方向继续置换，方向继续置换，LoopLoop切除中产生切除中产生的的5-P5-P

7、断头。断头。6 6、异构化异构化：链同化过程中，：链同化过程中，DNADNA经过一定的扭曲旋转形成经过一定的扭曲旋转形成的异构体。的异构体。7 7、分支迁移分支迁移（branch migrationbranch migration）：两条）：两条DNADNA分子之间分子之间形成的交叉点可以沿形成的交叉点可以沿DNADNA移动，这一过程称为分支迁移。移动，这一过程称为分支迁移。 图、分枝迁移图、分枝迁移HollidayHolliday结构的拆分结构的拆分 重组体连接两个重组体连接两个DNADNA双链的双链的交换中间物含有交换中间物含有4 4股股DNADNA链，在链，在其连接处为转换配对所形成交其

8、连接处为转换配对所形成交叉链的连接点称为叉链的连接点称为HollidayHolliday结结构。该结构中由二对连锁在一构。该结构中由二对连锁在一起的起的DNADNA分子组成。分子组成。 HolidayHoliday中间体的形成只完中间体的形成只完成了重组的一半，由于连锁在成了重组的一半，由于连锁在一起的两条一起的两条DNADNA分子必须经过拆分子必须经过拆分（分（resolutionresolution）回复到彼此）回复到彼此分开的双螺旋状态。拆分的方分开的双螺旋状态。拆分的方式有两种，需要内切酶在交叉式有两种，需要内切酶在交叉点处形成一对切口，然后由连点处形成一对切口，然后由连接酶连接。接酶

9、连接。 细菌细菌DNA的重组的重组 1、细菌重组酶：、细菌重组酶： 1）RecA蛋白：为蛋白：为E。coli RecA基因的产物，基因的产物，RecA蛋白是催化重组基本反应的酶，能通过碱基配对使蛋白是催化重组基本反应的酶，能通过碱基配对使两个两个DNA连接成杂交分子。连接成杂交分子。2）Rec BCD酶：亦称核酸外切酶酶：亦称核酸外切酶V，它通过，它通过Chi序列序列识别靶位点。该酶具有多种活性，可以在单链结合识别靶位点。该酶具有多种活性，可以在单链结合蛋白的存在下松开蛋白的存在下松开DNA双链，同时还具有双链，同时还具有ATP酶活酶活性，它在重组中的作用是提供具有性，它在重组中的作用是提供具

10、有3-末端的单链区末端的单链区域。域。3）ruvABC：其中：其中ruvA和和B基因产物可促进异源双基因产物可促进异源双链结构的形成。链结构的形成。 1 1、单链摄入和链交换、单链摄入和链交换 RecARecA蛋白作用于蛋白作用于DNADNA分子，用单链去置换双链分子的分子，用单链去置换双链分子的同源区段，这个反应称单链摄入。同源区段，这个反应称单链摄入。RecARecA蛋白的这种作用蛋白的这种作用是通过与游离的单链是通过与游离的单链3-3-端结合，并引导单链端结合，并引导单链DNADNA侵入双侵入双链链DNADNA中，这种作用还需要中，这种作用还需要RecBCDRecBCD的协助。的协助。

11、E.coliE.coli中有一种中有一种ChiKaiChiKai结构结构： 5-GCTGGTGG-35-GCTGGTGG-3 3-CGACCACC-5 3-CGACCACC-5 RecBCDRecBCD沿双链滑行至沿双链滑行至ChiChi结结构附近时，将其附近的兔耳构附近时，将其附近的兔耳结构的一端切开形成具有结构的一端切开形成具有3-3-端的单链区，端的单链区，RecARecA再与再与此单链此单链DNADNA的的3-3-端结合并端结合并引入另一双链结构中导致重引入另一双链结构中导致重组，组，RecBCDRecBCD则沿双链继续则沿双链继续寻找下一个寻找下一个ChiChi结构。结构。 兔耳结构

12、兔耳结构：RecBCDRecBCD结结合合DNADNA，使解链速度大于恢，使解链速度大于恢复双螺旋的速度，所以形成复双螺旋的速度，所以形成二个单链环，称兔耳结构。二个单链环，称兔耳结构。 同源重组的作用同源重组的作用 1 1、维持种群的遗传多样性、维持种群的遗传多样性 2 2、在真核生物中同源重组使同源染色体的染色单体间发生、在真核生物中同源重组使同源染色体的染色单体间发生物理连接，这样使第一次减数分裂时同源染色体能平均分配至物理连接，这样使第一次减数分裂时同源染色体能平均分配至子代细胞中。子代细胞中。 3 3、有助于、有助于DNADNA损伤的修复，发生重组的位置常含有错配的损伤的修复，发生重

13、组的位置常含有错配的碱基。碱基。 7.2 位点专一性重组位点专一性重组 特指噬菌体特指噬菌体DNA整合到细菌染色体整合到细菌染色体DNA的过程。最早在的过程。最早在phage的遗传学研究中发现的，的遗传学研究中发现的，DNA通过重组整合到大肠通过重组整合到大肠杆菌染色体的专一性位点上，转变为原噬菌体杆菌染色体的专一性位点上，转变为原噬菌体DNA的非活性的非活性状态（溶源状态）。在溶菌状态时，状态（溶源状态）。在溶菌状态时，DNA以环状分子独立以环状分子独立存在，两种状态的转换都与位点专一性重组有关。位点专一存在，两种状态的转换都与位点专一性重组有关。位点专一性重组不是由性重组不是由DNA序列的

14、同源性所引起，仅涉及短的同源序序列的同源性所引起，仅涉及短的同源序列。列。 整合和切除过程是在细菌整合和切除过程是在细菌DNA和噬菌体和噬菌体DNA专一的附专一的附着位点（着位点（attachment site , att） 上进行的，上进行的， 细菌的附着位点称细菌的附着位点称attBattB，由序列由序列BOBBOB组成，噬菌体的组成，噬菌体的附着位点称附着位点称attPattP，由序列，由序列POPPOP组成，其中组成，其中O O序列为序列为attBattB和和attPattP所共有，称为核所共有，称为核心序列。重组就发生在这段心序列。重组就发生在这段序列上。序列上。 在重组过程中在重组

15、过程中DNADNA以线性形式插入细菌以线性形式插入细菌染色体，此时原噬菌体被重染色体，此时原噬菌体被重组产生的两个新的组产生的两个新的attatt（attLattL，attRattR）位点所固定，）位点所固定，整合过程在整合过程在attBattB和和attPattP之间之间识别，而切除过程在识别，而切除过程在attLattL和和attPattP之间识别。之间识别。 Figure . Does recombination between attP and attB proceed by sequential exchange or concerted cutting? Specialized r

16、ecombination involves breakage and reunion at specific sitesFigure 14.21 Staggered cleavages in the common core sequence of attP and attB allow crosswise reunion to generate reciprocal recombinant junctions. Specialized recombination involves breakage and reunion at specific sitesFigure . Recombinat

17、ion between two paired duplex DNAs could involve reciprocal single-strand exchange, branch migration, and nicking. Specialized recombination involves breakage and reunion at specific sitesFigure . Int and IHF bind to different sites in attP. The Int recognition sequences in the core region include t

18、he sites of cutting. Specialized recombination involves breakage and reunion at specific sitesSite-specific recombination: ( ( 位点专一重组）位点专一重组）AntibodydiversityH and L are all encoded by three gene segments: V, D, J V-39bp28-D-2839bp-JTwo heavy chains (H)250155Two light chains (L)2504Enormous number (

19、108) of different H and L gene sequences can be produced by such a recombinationOne antibody example produced by site-specific recombination7.3 7.3 转座重组转座重组 同源染色体上的重组比例较少，较多的还是非同源染色体间同源染色体上的重组比例较少，较多的还是非同源染色体间的转座重组。的转座重组。 原核生物，真核生物基因组中都有一些不必借助同源序列可原核生物，真核生物基因组中都有一些不必借助同源序列可以从一个部位移动到另一个部位的以从一个部位移动到另一

20、个部位的DNADNA片段，片段，这些片段称转座这些片段称转座子子（transposon or transposable elementtransposon or transposable element）。转座作用）。转座作用与供体和受体部位之间的序列没有任何关系。与供体和受体部位之间的序列没有任何关系。 所有的转座子都有两个所有的转座子都有两个结构特征结构特征：其一两端有：其一两端有20-40bp20-40bp的反向的反向重复序列；其二转座子的中间具有编码转座酶的基因，这种重复序列；其二转座子的中间具有编码转座酶的基因，这种酶催化转座子插入新的位置。酶催化转座子插入新的位置。 转座子的转座子

21、的共性共性：1 1、两端都有反向重复序列、两端都有反向重复序列 2 2、具有编码转座酶的基因，催化转座子插入新的位、具有编码转座酶的基因，催化转座子插入新的位点点原核生物的转座原核生物的转座（一）转座子的类型和结构特征（一）转座子的类型和结构特征 1 1、简单转座子，即插入序列（、简单转座子，即插入序列（insertion sequence, insertion sequence, ISIS）。）。ISIS在大肠杆菌的质粒中很常见，如在大肠杆菌的质粒中很常见，如IS1IS1有有1010个拷贝，个拷贝，ISIS可编码转座酶，是自主单位。可编码转座酶，是自主单位。 5-GAC-CAG-35-GAC

22、-CAG-3 IS IS的共性：的共性： 1 1、ISIS的末端为反向重复序列，的末端为反向重复序列，15-20bp15-20bp，二者可以不完，二者可以不完全相同。全相同。 2 2、ISIS转入宿主转入宿主DNADNA序列时，使宿主序列时，使宿主DNADNA产生同向重复序列，产生同向重复序列，靶位点长度一般为靶位点长度一般为5-9bp5-9bp，形成，形成5-9bp5-9bp的同向重复。的同向重复。 Transposition ( ( 转座作用）转座作用）IS element转座酶转座酶在宿主在宿主DNADNA上上切割切割ISIS插入缺口后插入缺口后形成同向重复形成同向重复2 2、复合转座子

23、：较大，由两个重复序列夹着中心区的编、复合转座子：较大，由两个重复序列夹着中心区的编码其他蛋白如抗药性基因组成，通常以码其他蛋白如抗药性基因组成，通常以TnTn命名。复合转座命名。复合转座子的重复序列就是子的重复序列就是ISIS，可从一个位点转座到另一个位点，可从一个位点转座到另一个位点，或从一个复制子转座到另一个复制子。或从一个复制子转座到另一个复制子。（二）转座子的转座机制（二）转座子的转座机制 转座子都是具有编码与转座作用有关的酶转座子都是具有编码与转座作用有关的酶转座转座酶，而转座子的末端大多数都是反同重复序列。其转座机酶，而转座子的末端大多数都是反同重复序列。其转座机制为：制为： 在

24、转座酶的作用下，在转座子两端和靶位点产生在转座酶的作用下，在转座子两端和靶位点产生切口，所形成的突出单链末端与转座子两端切口，所形成的突出单链末端与转座子两端 的反向重复的反向重复序列相连，然后由序列相连，然后由DNADNA聚合酶填补缺口，连接酶封闭切口。聚合酶填补缺口，连接酶封闭切口。转座作用的机制分为三种类型：转座作用的机制分为三种类型：复制型转座复制型转座：留一个，转一个：留一个，转一个非复制型转座非复制型转座：直接转移：直接转移保守型转座保守型转座：为另一种非复制型转座，转座过程中，转座子从供体位点切除，插：为另一种非复制型转座，转座过程中，转座子从供体位点切除，插入到靶位点，其中每一

25、个核苷酸都被保留下来。入到靶位点，其中每一个核苷酸都被保留下来。Figure Mutransposition generates a crossover structure, which is converted by replication into a cointegrate .1、Replicativetransposition proceeds through a cointegrateFigure Nonreplicativetransposition results when a crossover structure is released by nicking. This in

26、serts the transposon into the target DNA, flanked by the direct repeats of the target, and the donor is left with a double -strand break.2、 Nonreplicativetransposition proceeds by breakage and reunionFigure 15.6 Nonreplicative transposition allows a transposon to move as a physical entity from a don

27、or to a recipient site. This leaves a break at the donor site, which is lethal unless it can be repaired. Transposition occurs by both replicative and nonreplicative mechanisms Figure Both strands of Tn10 are cleaved sequentially, and then the transposon is joined to the nicked target site.Nonreplic

28、ativetransposition proceeds by breakage and reunion.（三）转座子转座频率的控制（三）转座子转座频率的控制对于细胞来说，控制转座子调换的频率是很重要的，为了自下对于细胞来说，控制转座子调换的频率是很重要的，为了自下而上，转座子必须能维持某一最小的移动频率，但是太大的频而上，转座子必须能维持某一最小的移动频率，但是太大的频率会破坏宿主细胞，每一个转座子好像都有控制它自身调换频率会破坏宿主细胞，每一个转座子好像都有控制它自身调换频率的机制，机制的多样性通过率的机制，机制的多样性通过Tn10Tn10被描写。被描写。Tn10Tn10为复合型转座子，两端

29、为复合型转座子，两端各有一重复序列各有一重复序列 5NGCTAGCN3 5NGCTAGCN3 3NCGATCGN53NCGATCGN5IS10R是是Tn10的活性组件，的活性组件，IS10L是功能缺陷型，其转是功能缺陷型，其转座酶的活力是座酶的活力是IS10R的的1-10%，靠近，靠近IS10R有两个方有两个方向相反的启动子。向相反的启动子。1 1、 甲基化控制：甲基化控制：Tn10Tn10上有二个甲基化位点（上有二个甲基化位点（GATCGATC），），一个位于一个位于ISIS上，另一个位于转座子的转座酶启动子上。上，另一个位于转座子的转座酶启动子上。Tn10Tn10与宿主与宿主DNA DNA

30、 一起复制时，产生半甲基化，转座子激一起复制时，产生半甲基化，转座子激活，编码出转座酶，导致转座，一旦两个位点均被甲基活，编码出转座酶，导致转座，一旦两个位点均被甲基化，则转座酶停止合成，转座停止。化，则转座酶停止合成，转座停止。GATCGATC2 2、 通过启动子调节：通过启动子调节：Tn10Tn10上有二个方向相反的启动子，上有二个方向相反的启动子，向外的启动子较强，称向外的启动子较强，称PoutPout，转录产物为一短链，转录产物为一短链RNARNA，向，向内的启动子内的启动子PinPin较弱，转录产物为一个有编码区段的较弱，转录产物为一个有编码区段的RNARNA，可翻译出可翻译出47K

31、D47KD的转座酶，两种转录产物的转座酶，两种转录产物RNARNA之间有之间有40bp40bp的的重叠，可结合从而抑制转座酶的表达。重叠，可结合从而抑制转座酶的表达。.（四）转座子引起的某些遗传学效应（四）转座子引起的某些遗传学效应 引起插入突变引起插入突变 插入位置上出现新的基因插入位置上出现新的基因 插入位置出现靶插入位置出现靶DNADNA的少数核苷酸对重复的少数核苷酸对重复 导致染色体畸变导致染色体畸变 切除，转座子从原来的位点上消失。切除，转座子从原来的位点上消失。真核生物的转座作用真核生物的转座作用 较清楚的是果蝇的较清楚的是果蝇的P P成分，玉米的成分，玉米的Ac-DsAc-Ds元

32、件元件1 1 玉米的转座成分玉米的转座成分玉米中存在几组控制元件：玉米中存在几组控制元件：Ac-DsAc-Ds，spmspm， DtDt等，不同品系等，不同品系中其数目和位置不同。较清楚的是中其数目和位置不同。较清楚的是Ac-DsAc-Ds元件，其中元件，其中AcAc是自主成分，是自主成分，DsDs是非自主成分。是非自主成分。AcAc是一是一个个Figure The Ac element has two open reading frames; Ds elements have internal deletions.Controlling elements in maize form fami

33、lies oftransposons完整的转座子，长完整的转座子，长4563bp4563bp，可转录出，可转录出3600bp3600bp的的mRNAmRNA，含，含807807个密码子序列，在编码个密码子序列，在编码序列两侧有序列两侧有11bp11bp的反向的反向重复序列，重复序列，AcAc具有转座具有转座酶基因，可以自主移动，酶基因，可以自主移动，它能引起较高回复频率它能引起较高回复频率的突变，的突变，AcAc突变可导致突变可导致玉米合成花色素苷。玉米合成花色素苷。 Ds Ds元件是在转座酶基因上有缺失的元件是在转座酶基因上有缺失的AcAc元件，在元件，在AcAc成分的激活下，成分的激活下，

34、DsDs成分可以转座成分可以转座到新的靶位点，使靶位点处的基因失活，改变基因的表达活性，到新的靶位点，使靶位点处的基因失活，改变基因的表达活性，DsDs突变能引起稳定突变能引起稳定的突变，产生无色的玉米粒。的突变，产生无色的玉米粒。2 2 果蝇中的果蝇中的P P元件元件果蝇中两个品系果蝇中两个品系P P型和型和M M型型杂交时，会出现：杂交时，会出现： P P雄雄+M+M雌雌 后代不育后代不育 P P雌雌+M+M雄雄 后代可育后代可育 P P品系中有品系中有P P因子，因子，M M品系中品系中无。无。P P元件长度是变化的，元件长度是变化的，但序列同源，最长但序列同源，最长P P元件长元件长约

35、约2.5 Kb2.5 Kb，有四个与转座，有四个与转座作用有关的可译框（作用有关的可译框（ORFORF）。）。P P元件的两侧有元件的两侧有31bp31bp的反向的反向重复序列，在靶位点上形重复序列，在靶位点上形成成8bp8bp的正向重复。的正向重复。P P元件在体细胞中，仅前两元件在体细胞中，仅前两个内含子个内含子0 0、1 1可被剪切，外可被剪切，外显子显子2 2和和3 3 不发生剪接，产不发生剪接，产生的生的mRNAmRNA为为ORF0-ORF1-ORF2ORF0-ORF1-ORF2，编码编码66KD66KD的蛋白，为转座酶的蛋白，为转座酶的抑制物。的抑制物。P P元件在卵细胞中，可剪切

36、元件在卵细胞中，可剪切除去除去0 0、1 1、2 2、和、和3 3个内含子，个内含子，将全部将全部4 4个外显子剪接在一个外显子剪接在一起，起，mRNAmRNA的翻译产物为的翻译产物为87KD87KD的转座酶，致命的转座酶，致命P P元件发生元件发生转座，使配子细胞不育，导转座，使配子细胞不育，导致后代不育。致后代不育。 在卵细胞中有细胞质，精细胞几乎无细胞质，卵细胞中早在卵细胞中有细胞质，精细胞几乎无细胞质，卵细胞中早已充满了转座酶的阻遏物，固已充满了转座酶的阻遏物，固P P品系的雌果蝇与任何品系品系的雌果蝇与任何品系的雄果蝇杂交，后代全都可育，而的雄果蝇杂交，后代全都可育，而M M品系中，

37、由于卵细胞品系中，由于卵细胞中无完整的中无完整的P P成分，也就无转座酶的抑制物，当其与成分，也就无转座酶的抑制物，当其与P P品系品系的雄果蝇杂交时，的雄果蝇杂交时，P P成分被激活，表达出转座酶产生转座，成分被激活，表达出转座酶产生转座，导致配子不育，使后代不育。导致配子不育，使后代不育。逆转录作用（逆转录作用（reverse transcription reverse transcription ） 19701970年年TeminTemin等和等和BaltimoreBaltimore分别从劳氏肉瘤病毒分别从劳氏肉瘤病毒和小白鼠白血病病毒等致病和小白鼠白血病病毒等致病RNARNA病毒中分离

38、出逆转录病毒中分离出逆转录酶，迄今已知的致癌酶，迄今已知的致癌RNARNA病毒都含有逆转录酶。病毒都含有逆转录酶。 定义定义: : 以以RNARNA为模板，按照为模板，按照RNARNA中的核苷酸顺序合中的核苷酸顺序合成成DNADNA的过程称为逆转录，由逆转录酶催化进行。的过程称为逆转录，由逆转录酶催化进行。7.4 逆转录转座子 将从DNADNA的转移过程称转座，从DNARNADNA的转移过程叫逆转录转座。 逆转录转座子特性：与高频自发突变有关；刺激寄主细胞基因组发生多种形式的遗传重排；插入单元两端的DNA序列在插入过程中增加314bp；转座单元的末端含有长度为250bp的反向重复；转座过程与转

39、座单元的复制同时进行；转座子通过编码蛋白质作用于转座单元来对自身功能的转座功能进行调控。 逆转录转座逆转录子的结构特点 逆转录作用关键酶是逆转录酶和整合酶(IN)。逆转录子自身编码逆转录酶和整合酶。按结构分：具有与逆转录病毒类似的长末端重复结构（LIT），并含gag和pol基因，但无被膜蛋白基因enu，不具有LTR但有3polyA，其中心编码区含有gag和pol类似的序列，5端常被截短。 另一方面，真核生物由于在核结构，其转录和翻译过程在时空上被分隔开与转录有关酶并非是由移动因子编码，而是由其他基因通过反式作用提供。逆转录子的作用机制 他们倾向于整合在 富含AT区域?整合后的成串Ty因子存在，

40、可能是Ty因子易于插入另一个Ty因子内或是因存在共同的靶序列； 因子常位于tRNA基因，SrRNA基因以及U6的基因临近或上游，显示这些转座子的整合位点与RNA聚合酶iii转录的启动子或相关序列有关联。 逆转录座子自身编码整合酶，其整合部位两侧有固定长度的正向修复，表明整合酶能交错切开靶序列，整合后通过复制使靶序列倍增。逆转录子的生物学意义 对基因表达的影响 对转录因子介导基因的重排方式：逆转录子可提供同源序列促进同源重组；逆转录子经逆转录作用插入新的位点；逆转录子编码的反式因子或顺式序列引起基因重排； 逆转录子在进化中的作用 逆转录子除能促进基因组的流动，有利于生物遗传多样性外，它们分散在基

41、因组中成为进化的种子，当遇到合适的基因组序列环境通过突变形式成为新基因或基因结构域或是与先存的基因互配成为新的调节因子。 基因倍增途径：染色体间的不等量重组；基因的转座或逆转录。Figure . Does recombination between attP and attB proceed by sequential exchange or concerted cutting? Specialized recombination involves breakage and reunion at specific sitesSite-specific recombination: ( ( 位点

42、专一重组）位点专一重组）AntibodydiversityH and L are all encoded by three gene segments: V, D, J V-39bp28-D-2839bp-JTwo heavy chains (H)250155Two light chains (L)2504Enormous number (108) of different H and L gene sequences can be produced by such a recombinationSite-specific recombination: ( ( 位点专一重组）位点专一重组）An

43、tibodydiversityH and L are all encoded by three gene segments: V, D, J V-39bp28-D-2839bp-JTwo heavy chains (H)250155Two light chains (L)2504Enormous number (108) of different H and L gene sequences can be produced by such a recombination转座作用的机制分为三种类型：转座作用的机制分为三种类型：复制型转座复制型转座：留一个，转一个：留一个，转一个非复制型转座非复制型转座：直接转移：直接转移保守型转座保守型转座：为另一种非复制型转座，转座过程中，转座子从供体位点切除，插：为另一种非复制型转座，转座过程中，转座子从供体位点切除，插入到靶位点，其中每一个核苷酸都被保留下来。入到靶位点，其中每一个核苷酸都被保留下