常用缓冲溶液配制方法

1、页眉内容常用缓冲溶液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L ）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI ,再加水稀释至 200毫升PHXYPHXY2.05044.03.05011.42.45032.43.2508.22.65024.23.4506.42.85016.83.6505.0甘氨酸分子量 =75.07, 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L ）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+ 0.2 mol/L HCl ,再加水稀释到 20毫升pH(20 C )XYpH(20 C)XY2.254.

2、0703.251.4702.453.9603.450.9902.653.2953.650.5972.852.6423.850.2633.052.022邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23, 0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液PH0.2mol/LNa2HPO4 (<#)0.1mol/L柠檬酸 (<#)PH0.2mol/L Na2HPO4 (<#)0.1 mol/L柠檬酸 (<#)2.20.4010.605.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83

3、.1716.835.812.097.913.04.1115.896.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.614.555.453.87.1012.906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55Na2HPO4分子量 =14.9

4、8, 0.2 mol/L 溶液为 28.40 克/升。Na2HPO4 2H2O 分子量 =178.05, 0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/升。C4H2。7- H2O 分子量 =210.14, 0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。4 .柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液PH钠离子浓度（mol/L ）柠檬酸（克）C6H8。7 - H2O氢氧化钠（克）NaOH 97%盐酸（毫升）HCl （浓）最终体积 （升）2.20.2021084160103.10.2021083116103.30.2021083106104.30.202108345105.30.3524514468105.80

5、.45285186105106.50.3826615612610 使用时可以每升中加入 1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L )PH0.1 mol/L柠檬酸 (<#)0.1 mol/L柠檬酸钠(<#)PH0.1 mol/L柠檬酸 (<#)0.1 mol/L柠檬酸钠(<#)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.1

6、6.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89.210.8柠檬酸C6H8。7H2O:分子量210.14, 0.1 mol/L溶液为21.01克/升。柠檬酸钠Na3 C6H5O7 2H2O：分子量294.12, 0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。6.乙酸-乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L )pH(18 C )0.2 mol/L NaAc (<#)0.3 mol/LHAc (<#)pH(18 C)0.2 mol/LNaAc (<#)0.3 mol/LHAc (&l

7、t;#)2.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.60Na2Ac 3H2O 分子量 =136.09, 0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升。7 .磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2)pH0.2 mol/LNa2HPO4 (<#)0.2 mol/LNaH2PO4 (<#)pH0.2 mol/LNa2HPO4 (<#)0.2 mol/L

8、NaH2PO4 (<#)5.88.092.07.061.039.05.910.090.07.167.033.06.012.387.77.272.028.06.115.085.07.377.023.06.218.581.57.481.019.06.322.577.57.584.016.06.426.573.57.687.013.06.531.568.57.789.510.56.637.562.57.891.58.56.743.556.57.993.07.06.849.551.08.094.75.36.955.045.0Na2HPO4 2H2。分子量 =178.05, 0.2 mol/L 溶

9、液为 85.61 克/升。Na2HP0 4 12H2O 分子量 =358.14, 0.2 mol/L 溶液为 71.628 克/升。NaH 2P04 2H2。分子量 =156.01 , 0.2 mol/L 溶液为 31.202 克/升。磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：NaH2P。4： pKa1 =2.12 , pKa2=7.21;Na2HPO4： pKa1 = 7.21, pKa2= 12.32配酸性缓冲液：用 NaH 2P04, pH=14,配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH=68,配碱性缓冲液：用

10、Na2HPO4, pH =1012。用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐缓冲液的优点为：容易配制成各种浓度的缓冲液；适用的pH范围宽；pH受温度的影响小；缓冲液稀释后 pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于0.1。其缺点为：易与常见的钙Ca2+离子、镁 Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。(2)磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L)pHmol/L/15Na

11、 2HP04 (<#)mol/L/15KH 2 P04 (<#)pHmol/L/15Na 2HP04 (<#)mol/L/15KH 2P04 (<#)4.920.109.907.177.003.005.290.509.507.388.002.005.911.009.007.739.001.006.242.008.008.049.500.506.473.007.008.349.750.256.644.006.008.679.900.106.815.005.008.1810.0006.986.004.00Na2HP04 2H2。分子量 =178.05, 1/15M 溶液为

12、11.876 克/升。KH 2P04 分子量 =136.09, 1/15M 溶液为 9.078 克/升。8 .磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05M)X毫升0.2M K 2P04+ Y毫升0.2N Na0H加水稀释至29毫升pH(20 C)X (<#)Y (<#)pH(20 C)X (<#)Y (<#)5.850.3727.052.9636.050.5707.253.5006.250.8607.453.9506.451.2607.654.2806.651.7807.854.5206.852.3658.054.6809.巴比妥钠-盐酸缓冲液（18C）PH0.04M巴比妥钠

13、溶液0.2V盐酸PH0.04M 巴比 妥钠溶液（毫升）0.2N盐酸（毫 升）6.810018.48.41005.217.010017.88.61003.827.210016.78.81002.527.410015.39.01001.657.610013.49.21001.137.810011.479.41000.708.01009.399.61000.358.21007.21100巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升10. Tris -盐酸缓冲液（0.05M , 25C）50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。

14、PHX(<#)PHX(<#)7.1045.78.1026.27.2044.78.2022.97.3043.48.3019.97.4042.08.4017.27.5040.38.5014.77.6038.58.6012.47.7036.68.7010.37.8034.58.808.57.9032.08.907.08.0029.2三羟甲基氨基甲烷(Tris) HOCH2 CH2OHCHOCH2 NH2分子量=121.14;0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）PH0.05M 硼砂 (<#)

15、0.2M 硼酸 (<#)PH0.05M 硼砂 (<#)0.2M 硼酸 (<#)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0硼砂 Na2B407 10H2O,分子量=381.37;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。硼酸H3BO3,分子量=61.83,0.2M溶液为12.37克/升。硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。12.甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M）X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升PHXYPHXY8.6504

16、.09.65022.48.8506.09.85027.29.0508.810.05032.09.25012.010.45038.69.45016.810.65045.5甘氨酸分子量=75.07；0.2M溶液含15.01克/升。13.硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升PHXYPHXY9.3506.09.85034.09.45011.010.05043.09.65023.010.15046.0硼砂 Na2B407 10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为 19.07 克/升。14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）C

17、a2+、Mg2+存在时不得使用PH0.1MNa2CO3(<#)0.1MN 2HCO 3(<#)20 c37 c9.168.77199.409.12289.519.40379.789.50469.909.725510.149.906410.2810.087310.5310.288210.8310.5791Na2c02 10H20 分子量=286.2;0.1M 溶液为 28.62 克/升。N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。15.“PBS缓冲液PH7.67.47.27.0H2O100010001000100mlNaCl8.58.58.58.5gNa2HPO42.

18、22.22.22.2gNaH2PO40.10.20.30.4gpH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions名称(Name)配 制(Compounding way)不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 c5 c10 c15 c20 c25 c30 c35 c40 c草酸盐 标准缓 冲溶液cKH3(C2Q)2 - 2H2O 为 0.05mol/L。称取 12.71g四草酸钾 KH3(C2Q) 2 2H2O溶 于无二氧化碳的水 中，稀释至 1000ml1.671.671.671.671.681.681.691.691.69不

19、同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 c50 c55 c60 c70 c80 c90 c95 c-1.701.711.721.721.741.771.791.81-酒石酸 盐标准 缓冲溶 液在25c时，用无二 氧化碳的水溶解外 消旋的酒石酸氢钾 (KHC4H4Q),并剧烈 振摇至成饱和溶液不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 c5 c10 c15 c20 c25 c30 c35 c40 c-3.563.553.553.55不同温度时的 pH 值(pH in different temperature

20、s)45 c50 c55 c60 c70 c80 c90 c95 c-3.553.553.553.563.583.613.653.67-苯二甲 酸氢盐 标准缓 冲溶液c(C6HtCOHCOK)为 0.05mol/L ,称取于 (115.0 ± 5.0) C干 燥23h的邻苯二 甲酸氢钾(KHCHQ) 10.21g ,溶叱 CO 的蒸镭水，并稀释至 1000ml(注：可用十酸度计 校准)不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 c5 c10 c15 c20 c25 c30 c35 c40 c4.004.004.004.004.004.014.

21、014.024.04不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 c50 c55 c60 c70 c80 c90 c95 c-4.054.064.084.094.134.164.214.23-磷酸盐 标准缓 冲溶液分别称取在(115.0 士 5.0) C干燥2 3h的磷酸氢二钠(NaHPO) (3 . 53 ±0. 01)g和磷酸二 氢钾(KHPO) (3 . 39 士 0. 01)g ,溶土块 先煮沸过15不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 c5 c10 c15 c20 c25 c30 c3

22、5 c40 c6.986.956.926.906.886.866.856.846.84不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 c50 c55 c60 c70 c80 c90 c95 c-30min并迅速冷却 的蒸镭水中，并稀释 至1000ml (注：可 用于酸度计校准)6.836.836.836.846.856.866.886.89-硼酸盐 标准缓 冲溶液c(Na2B4O I0H2O)称 取硼砂(NaB'Q I0H2O)(3 . 80± 0 . 01)g(注意：不能烘！)， 溶于块先煮沸过1530min并迅速 冷却的蒸镭水中，并

23、 稀释至1000ml 0置 聚乙烯塑料瓶中密闭保存。存放时要防 止空气中的CQ的进 入(注：可用十酸度 计校准)不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 c5 c10 c15 c20 c25 c30 c35 c40 c9.469.409.339.279.229.189.149.109.06不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 c50 c55 c60 c70 c80 c90 c95 c-9.049.018.998.968.928.898.858.83-氢氧化 钙标准 缓冲溶 液在25 C,用无二氧 化碳

24、的蒸储水制备 氢氧化钙的饱和溶 液。氢氧化钙溶液的 浓度 c1/2Ca(OH) 2 应在(0.0400 0.0412 ) mol/L 。氢 氧化钙溶液的浓度 可以酚红为指示剂， 用盐酸标准溶液 c(HCl)=0.1mol/L 滴定测出。存放时要 防止空气中的二氧 化碳的进入。出现混 浊应弃去重新配制不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 c5 c10 c15 c20 c25 c30 c35 c40 c13.4213.2113.0012.8112.6312.4512.3012.1411.98不同温度时的 pH 值(pH in different te

25、mperatures)45 c50 c55 c60 c70 c80 c90 c95 c-11.8411.7111.5711.45-注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制常用pH缓冲溶液的配制和 pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions序号(No.)溶液名称(Solution name)配制方法(Preparation)pH值(pH value)1氯化钾-盐酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl与 25.0 ml 0.2mol/L KCl混合均匀后，加水稀释至 100 ml1.72氨基乙酸-盐酸在500 ml水中溶解氨