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文档简介
1、金免疫技术(一)单项选择题(A型题)1、免疫技术由Faulk和Taylor始创,最初用丁A .金免疫电镜染色B.金(银)免疫光镜染色C.斑点免疫渗滤试验D.斑点金免疫层析试验E.金免疫定量检测2、有关胶体金颗粒大小特性的正确描述A.胶体金颗粒越大,入max越小B.胶体金溶液呈色与胶体金颗粒大小无关C.胶体金颗粒越大,呈色越深D.胶体金颗粒大小与制备时柠檬酸三钠加入量无关E.胶体金颗粒大小与制备时柠檬酸三钠加入量呈正比3、同时检定胶体金颗粒大小和均一度的方法是A .观察胶体金溶液的颜色B.分光光度计扫描入mnxC.扫描电镜D.对流免疫电泳E.免疫电泳4、在免疫金的制备原理中,胶体金与蛋白质结合力
2、为A.肽键结合力B.二硫键结合力C.氢键结合力D .静电引力E.疏水作用5、关丁胶体金保存的描述,正确是A.置丁洁净的玻璃器也B.加防腐剂不利丁保存C.使用时为提高标记效率不必低速率心去除凝集颗粒D保存过程产生少量胶体金凝集颗粒就会影响以后胶体金的标记E.应丁干燥处避光保存6、当前免疫电镜技术中应用量广的记物A.辣根过氧化物酶B.硝酸银C.胶体金D.铁蛋白E. FITC7、斑点金免疫渗滤试验间接法测血活标本中抗体,导致假阳性结果的主要原因A .血活标本中非目的IgF的干扰B.血活标本中非目的抗原的干扰C.洗涤不充分D.反应时间过长E.反应时间过短8、斑点金免疫层析试验竞争法测小分子抗原(a),
3、层析条的待测样品结果判读处应包被A.胶体金标记抗a抗B.标准抗原(a)C.抗免疫金抗体E.小鼠9、 免疫层析试验乂抗体夹心法测大分子抗原(b)层析条的待测样品结果判讯处应包被A.胶体金标记抗b抗B.抗b抗体C.抗免疫金抗体体D.标准抗原(b)E.人血活IgG10、用丁包被斑点金免疫层析试验载体膜质控条(线)的物质是A .抗免疫金抗体B.人白蛋白C.待测抗原标准品D.胶体金标记抗体E.胶体金颗粒11、关丁斑点金免疫析试验双抗体夹心法结果正确的判读A.仅出现一条棕红色质控条带者为试验结果阳性B.出现两条棕红色条带者为试验结果阳性C.出现棕红色质控条带者为试剂失效D.必须在5min内观察结果E.仅在
4、实验区出现一条棕红色条带者为试验结果阳性12、关丁斑点金免疫层析试验竞争法结果正确的判读A .仅出现一条棕红色质控条带为阴性B.出现两条棕红色条带为阳性C.无棕红色质控条带出现为试剂失效D.都无棕红色条带出现即为阳性E.出现一条棕红色条带即为阳性13、胶体金间接免疫层析法测血活抗体,常设计成反流免疫层析法的主要目的A .缩短反应时间B.减少样品用量C.提高灵敏度D.提高特异性E.减少血活中非特异性免疫球蛋白对实验结果的干拢14、关丁斑点金免疫渗滤和免疫层析实验操作,二者相同的是A.二者均需要胶体金标记物、洗涤液等深液试剂B.所有反应都是在固相膜的一个固定区域完成C.反应结果的判断,二者均不需酶
5、促底物反应呈色D.所有试剂均预制在膜上E.两者结果判读模式一样15、斑点金免疫渗滤试验来源丁A . RILB . dot-ELISAC.免疫层析实验D.免疫印迹实验E.荧光免疫组化染色16、关丁斑点金免疫层析实验原理正确的描述A.其实验的基本原理与dot-EISA相似B.其实验所用的试剂均被预先固相化在滤膜上C.样品以横流层析通过滤纸条不同区域时,完成酶促反应D.实验过程须洗涤E.其竞争法试验结果判断以出现两条沉淀线为阳性17、关丁斑点金固相膜免疫测定,下列错误的是A.可以适用丁定性和半定量试验B.其示踪物是胶体金颗粒C.免疫渗滤实验是利用了微孔膜的毛细管作用D.免疫层析实验是利用了微孔膜的穿
6、流性E.方法具有简便、快速、灵敏度较高的特点18、 免疫金(银)光镜染色技术中,常用的金离子(Au+)还原剂为A.对苯二酚B.苯酚C.甲醇D.草酸盐E.白磷19、关丁免疫金银染色的描述,错误的是A .敏感度较单纯免疫金染色高B.多用丁组织化学检测C.利用金颗粒对银离子的还原性D.具有定位精确的优点E.阳性结果为橘红色颗粒沉积20、免疫电镜技术中,最常用的免疫染色技术A.酶标记抗原免疫组化技术B.金免疫技术C.荧光免疫组化技术D .非标记抗体酶免疫组化技术E.铁蛋白标记免疫技术21、应用胶体金免疫层析法检测人尿液HCG试验中,C区应固化的成分为A.鼠源性HCG抗原B.金标性HCG抗体C.羊抗鼠抗
7、体D. HCG抗原E.抗HCG抗体22、免疫金(银)染色常用丁检测A. RFB. ANAC. T细胞及业群D.病蠹E.抗ds-DNA抗体(一)单项选择题(A型题)12345678910ACCDACABBA111213141516171819202.胶体金:是金盐被还原成金原子后形成的金颗粒悬:液,胶体金颗粒由一个基础金核(金原子Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在表面是内层负离子(AuCl2-),外层离子层H+则分散在胶体 金溶性中,以维持胶体金游离丁溶胶间的县液状态。3.免疫金:是指胶体与抗原(抗体)的结合物。4.免疫金标记技术:是批利用胶体金颗粒标记特异性蛋白,当这些标记物在相应的配体大
8、量聚 集时,肉眼可见红色或粉红色斑上噗,从而进行定性或半定量检测。四.问答题1.何谓金免疫测定技术?简述期技术类型及原理。金免疫测定技术是指用胶体金颗粒作为标记物进行抗原抗体反主尖的一类免疫学测定技术,其主要技术类型有斑点金免疫渗滤试验和金免疫层析试验。(1)斑点金免疫渗滤试验:在以硝酸纤维素膜为载本并包被了抗原或抗体的渗滤壮置中,依次 滴加标本、免疫金及洗涤液,因微孔滤膜贴置丁吸水材料上,故溶淮流经渗滤装置与膜上的抗原或抗 体快速结合并到浓缩作用,达到快速检测目的,阳性反应在膜上呈现红色斑点。(2)斑点金免疫层析试验:是将胶体标记技术和蛋白质层析技术相结合的以硝酸纤维素膜为载体的固相膜免疫分
9、析技术,滴加在膜一端的标本溶液受载体膜的毛细血管的作用向另一端移动,犹如层析析一般,在移动过程中被分析物与固定丁载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化,无关物则越过该区域而被分离,然后通过胶体金的呈色条带来判讯实验结果。2.简述免疫金电镜染色技术的原理、技术要点和注意事项。(1)原理:免疫金电镜染色技术原理是胶体金标记物与锐网上待检标本的相应蛋白质发生结合 反应,由丁胶体金颗粒具有高电子密度的特性,故金标蛋白结合处,电镜下可见黑褐粒,从而对细胞 膜上或细胞内的蛋白质进行定性与定位分析。(2)技术要点:标本包埋:用戊二醛对标本进行固定,后行饿酸固定(固定膜结构) , 丙酮或 乙醇逐级脱水,包埋(Epon812树脂),超薄切片(80nm),置300目锐网上;免疫组化染色:白 蛋白封闭,加第一抗体,孵育,PBS冲洗,卵白蛋白封闭,加第二抗体(胸部体金标记抗IgG抗体), 孵育,PBS冲洗,蒸僻水冲洗,醋酸双氧铀.枸椽酸锅复染,电镜观察。(3)注意事项:以上染色步骤除活洗外,皆在滴丁蜡膜(封
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