梅毒检测方法-杨晓亮 ppt课件

1、 梅毒检测方法的对比梅毒检测方法的对比杨晓亮梅毒螺旋体 惨白梅毒螺旋体，抵抗力极弱 人是独一的传染源 先天性：母婴传播 后天性：主要是以性传播，也可经输血 传播一期梅毒 感染3周后左右，出现无痛性硬下疳，感染性极强二期梅毒发生于出现硬下疳2-8周，全身梅毒疹，淋巴结肿大，传染性极强三期梅毒 发生于感染2年后，也可长达10-15年，慢性肉芽肿。快速、准确、尽早地检测出梅毒螺旋体成为头等大事！ 梅毒检测现状梅毒螺旋体检查血清学检查法梅毒螺旋体检查 暗视野显微镜检查、直接免疫荧光实验及梅毒螺旋体镀银染色检查，其中的特异性较高。 适用于一、二期梅毒有病损者的患者，受取材及特殊显微镜限制，耗时长，难以为

2、临床所接受。 镀银染色 暗视野血清学检查法感染梅毒后，人体内会产生两类抗体：直接针对TP的特异性抗体是针对类脂质的抗体，无特异性血清学检查法 非螺旋体抗原实验(非特异性实验) 螺旋体抗原实验(特异性实验) 非特异性实验 类脂质为抗原检查病人反响素的实验方法,世界卫生组织确认诊断梅毒的规范实验有： 1、性病研讨实验室(VDRL)实验国外常用 2、不加热血清反响素(USR)实验 3、快速血浆反响素(RPR)实验国内常用 4 、甲苯胺红TRUST实验国内常用性病研讨实验室(VDRL)实验 用心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原与待测56加热灭活血清反响，由于摇动、碰撞，构成抗原抗体复合物，而构成肉眼可见的

3、凝集颗粒，即为阳性反响。 本法可作定量及定性实验，试剂及对照血清已规范化，费用低。此法常用，操作简单，需用显微镜读取结果，缺陷是一期梅毒敏感性不高。 不加热血清反响素(USR)实验 USR是VDRL抗原的改良，运用血清无需加热，敏感性及特异性与VDRL类似，实验结果可用肉眼察看 快速血浆反响素实验RPR RPR那么是USR的改良，将抗原包裹在活性炭颗粒上，敏感性及特异性与VDRL类似，优点是肉眼即可读出结果。 甲苯胺红实验TRUST TRUST是RPR抗原的改良，将RPR试剂中活性炭颗粒换成甲苯胺红颗粒。TRUST法与RPR法的对比 对非特异性反响素抗体导致的阳性标本： TRUST试剂稳定性强

4、 TRUST检出率和反复性高 TRUST试剂中外表包裹抗原的甲苯胺红颗粒比RPR试剂中的活性炭颗粒小更易耐受振荡导致非特异性实验的优点 规范化抗原，敏感性类似 普通用于初筛和疗效随访 操作简易，费用低廉非特异性实验的缺陷 敏感性和特异性差 生物学假阳性高 假阳性可出如今急、慢性感染,妊娠,高丙种球蛋白血症,结缔组织病,溶血性贫血和其他本身免疫性疾病,也可出如今老年人和一些安康人,但多数情况下查不出缘由。特异性实验 原理：以梅毒密螺旋体本身或非致病的密螺旋体为抗原,以检查病人血清中抗密螺旋体的特异性抗体。目前运用的方法 密螺旋体荧光抗体吸收FTA-ABS 梅毒密螺旋体血凝实验 (TPHA) 梅毒

5、密螺旋体凝集实验 TPPA 蛋白印迹实验 (WB) 酶联免疫吸附实验 (ELISA) 聚合酶链反响(PCR) 胶体金免疫层析法GICA密螺旋体荧光抗体吸收FTA-ABS 被以为是当前敏感性和特异性最高的实验方法 窗口期短：在1期梅毒头几天就可以测出特异性抗体F3G 但提取物为活菌，存在潜在危险性，故其运用遭到很大限制。 操作难度大，不做首选 梅毒密螺旋体血凝实验 (TPHA) 特异性高 易操作和定量 试剂昂贵、不易保管和规范化 生物学假阳性率低。 梅毒密螺旋体凝集实验 TPPA 将TP Nichols株的精制纯化抗原包被在人工载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的TP抗体进展反响发生凝集，产生

6、粒子凝集反响，由此可以检测出血清和血浆中的梅毒螺旋体TP抗体,并且可用来测定抗体效价。 TPPA和TPHA对比 TPPA包含了梅毒螺旋体的一切片段，敏感性更高 ，结果更易察看 TPPA试剂稳定性、特异性、敏感性批间差优于TPHA TPHA试剂保管时间短，批间差大蛋白印迹实验WB 免疫印迹法检测梅毒特异性抗体敏感度等于或高于其它同类方法 特异性与ELISA和TPPA两种方法一样 免疫印迹法敏感度高,特异性好,操作简单,不需特殊仪器设备,阴阳性结果界限清楚,易于判别,顺应于临床广泛开展。酶联免疫吸附实验 (ELISA) 原理为双抗原夹心法,采用梅毒抗原包被在酶标板上, 以辣根过氧化酶标志物的梅毒抗

7、原,测定梅毒感染的特异性抗体。优点 特异性和敏感性均为96%与FTA-ABS法比较 操作简便，可大批量完成标本的检测 易于自动化，本钱低 试剂稳定，保管时间久缺陷： 假阳性较之TPPA高 分析缘由： 1、试剂敏感性高宁可错杀三千 不可放过一个 2、人为操作聚合酶链反响(PCR) 优点： 直接检测TP的DNA物质,在早期梅毒、先天性及神经性梅毒诊断中敏感性和特异性高 缺陷： 普通实验室操作中容易呵斥PCR污染 仅用于检测病原,故并不能取代梅毒血清学检测方法。 胶体金免疫层析法GICA 运用胶体金作为标志物的一种固相膜免疫测定方法,检测梅毒特异性抗体,采用了双抗夹心法 二期梅毒、三期梅毒、晚期埋伏

8、梅毒的阳性实验符合率为100%,在一期梅毒中的敏感度为80%85%,对早期梅毒的敏感性均较差。 如何选择血清学实验？ WHO引荐用VDRL、RPR、TRUST对血清进展过筛实验 出现阳性者再用ELISA、TPPA等特异性方法做确认实验 TRUST+，ELISA+、TPPA+ TRUST+，ELISA-、TPPA- TRUST-，ELISA+、TPPA+ 漏检 综上所述，RPR法和TRUST法虽操作简便、敏感性和特异性不够理想、早期和晚期梅毒检出率较低，且易受客观判别、溶血等要素干扰 TPPA法和TPHA法敏感性好、特异性强，是梅毒确实证方法，但条件要求较高、操作繁杂 ELISA敏感性和特异性较好、性能稳定且能仪器自动化等优点，其运用范围日益广泛 我们