氯芬黄敏片(薄膜衣)检验方法验证记录

1、氯芬黄敏片(薄膜衣)检验方法验证记录【依据】ws-10001- (hd-1030) -2002.中国药典2010年版二部仪器：高效液相色谱仪 型号：电子天平 型号：马来酸氯苯那敏对照品中国药品生物制品检定所 批号：100047-200305双氯芬酸钠对照品中国药品生物制品检定所 批号：100334-2003021色谱条件色谱条件与系统适用性试验色谱柱填充剂：用十八烷基硅烷键合硅胶；流动相:庚烷磺酸钠溶液(庚烷磺酸钠15.2mg,加三乙胺08ml,加水800ml, 用冰醋酸调ph值至33±0丄加水至1000ml)-甲醇乙月青(25 : 30 : 18) 检测波长：为262nm2线性关系

2、考察对照品贮备液的制备：精密称取马来酸氯苯那皱对照品 ,置50ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至 刻度，摇匀，作为对照品贮备液，(每1h11小含 0.25mg)；精密称取双氯芬酸钠对照品 ,置25ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液，(每1ml中1.5mg) o线性测定1、精密量取对照品贮备液、各0.5ml,置25ml量瓶中，用流动相稀释至 刻度，摇匀；2、精密量取对照品贮备液、(2)各1汕,置25ml量瓶中,用流动相稀释至刻 度，摇匀；3、精密量取对照品贮备液、(2)各3ml,置25ml量瓶中,用流动相稀释至刻 度，摇匀；4、精密量取对照品贮备液、各5n±

3、,置25ml量瓶屮，用流动相稀释至刻 度，摇匀；5、精密量取对照品贮备液、各10ml,置25ml量瓶中，用流动相稀释至 刻度，摇匀；按以上述色谱条件,分别精密量取20ul,注入色谱仪，记录色谱图。马来酸氯苯那敏12345対照品稀释浓度(mg/ml)对照品进样最(ug)对照品谱图主成分而积平均结果以进样量(ug)为横坐标(x),以峰面积为纵坐标(y)进行线性凹归，得凹归方程为：y -才十 厂二结果显示：o双氯芬酸纳12345对照品稀释浓度(mg/ml)对照品进样量(ug)对照品谱图主成分面积平均结果以进样量(ug)为横坐标(x),以峰面积为纵坐标(y)进行线性回 归，得回归方程为：y = x +

4、 r =结果显示：o3稳定性试验取上述线性关系项下的每lml中含马来酸氯苯那敏0.05mg与双 氯酚酸钠0.3mg对照品溶液；按以上述色谱条件，分别于样品制备后0、2.5、5、7.5、10小 时，精密量取20ul,注入色谱仪，测定峰面积记录色谱图。马来酸氯苯那敏进样时间oh2.5h5h7.5hloh平均rsd结果显示：双氯芬酸纳进样时间oh2.5h5h7.5hloh平均rsd结杲显示:4重复性试验对照品溶液的制备：精密称取马來酸氯苯那敏对照品 ,置50ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液，(每lml中含0.5mg) o 精密称取双氯芬酸钠对照品 ,置50ml量瓶中，加

5、流动和使溶解，并精密量入上述马来酸氯苯那敏对照品贮备液5ml,并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液(每lml中 含双氯酚酸钠0.3mg与马来酸氯苯那敏0.05mg)。重复性试验:取氯芬黄敏片(批号：070401) 20片，精密称定：g,平均片g/片，研细，精密称取 6 份，(1)： g, (2)： g, (3)： g,(4)： g, (5)： g, (6)： g,(约相当于双氯芬酸钠15mg),分别置50ml量瓶屮，加流动相适量，超声使溶解，加流动相至刻度，摇匀，滤过，即得。) 测定法 精密量取上述溶液各20ul,注入液相色谱仪，记录色谱图；计算， 即得。马来酸氯苯那敏>100imld02

6、$cd>100040013«10sksiootmuns1o0k-m00imld025>1m(munqs供试样吊序号峰面积平均峰面积样阳进样浓度(mg/ml)对照品溶液供试样品1供试样品2供试样品3供试样品4供试样品5供试样品6计算:平均含量为%, rsd 为。结果显不：双氯芬酸纳xlooomijils«100k«1mk kco«»m1oo0xiji1s*1okxlmomijls*100k供试样站序号峰而积平均峰而积样站进样浓度(mg/ml)对照品溶液供试样品1供试样品2供试样品3供试样品4供试样品5供试样品6计算«100k

7、 k平均含量为 %, rsd 为。结果显示：o5加样回收率试验对照品溶液的制备：取重复性试验项下的对照品溶液；加样回收率试验：取已知含量的氯酚黄敏片适量，精密称取9份(1)： _g, (2)： _g, _g,(4)： g, (5)： g, (6)： g, (7)： g, (8)： g,(9)： g,分别置50ml量瓶中，分别精密加入马来酸氯苯钠敏对照品：.mg,(2)： mg, (3)： mg, (4)： mg, (5)： mg, (6)： mg,(7)： mg, (8)： mg, (9)： mg；再分别精密加入双氯芬酸钠对照品(1)： mg, (2)： mg, (3)： mg,(4)： mg

8、, (5)： _mg, (6)： mg, (7)： mg, (8)： mg, (9)： mg,照重复性试验项下方法制成每iml含马来酸氯苯钠敏约0. 04mg> 0. 05mg> 0. 06mg> 含双氯芬酸钠约0. 24mg> 0. 3mg> 0. 36mg的溶液各3份，按重复性试验项下方法 测定，马来酸氯苯那敏供试样品序号峰面积平均峰面积进样浓度(mg/ml)対照品溶液低浓度供试样品1供试样晶2供试样品3中浓度供试样品1供试样品2供试样品3高浓度供试样品1供试样品2供试样品3按计算，底、中、高3种浓度的回收率、rsd值供试品序号称样量称样含量加样量实测含量回收

9、率rsd值低浓度供试样品1供试样品2供试样品3中浓度供试样品1供试样品2供试样品3高浓度供试样品1供试样品2供试样品39份溶液的回收率平均值为%, rsd为 %o双氯芬酸钠供试样站序号峰而积平均峰而积进样浓度(mg/ml)对照品溶液低浓度供试样品1供试样品2供试样品3中浓度供试样品1供试样品2供试样品3供试样品1供试样品3按计算，底、屮、高3种浓度的回收率、rsd值供试品序号称样量称样含量低浓度供试样品1供试样品2供试样品3中浓度供试样品1供试样品2供试样品3高浓度供试样品1供试样品2供试样品3加样量实测含量回收率rsd值9份溶液的回收率平均值为%, rsd为 。6破坏试验辅料干扰试验按处方量

10、制备不含马来酸氯苯那敏和双氯芬酸钠原料药的样品, 照上述实验条件，保留至样品峰保留时间的2倍，记录色谱图。热稳定性试验 取本品适量，置120°c加热6h,取出放冷，研细，精密称取50ml量瓶屮，加流动相超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，即得（每lml 约双氯芬酸钠0. 3mg），照上述试验件试验，保留至样品峰保留时间2倍。记录色谱图。 光照试验 取本品适量，置5000lx光照24h,取出放冷，研细，精密称取,置 50ml量瓶屮，加流动相超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，即得（每1ml约 双氯芬酸钠0. 3mg），照上述试验条件试验，保留至样品峰保留时间2倍。记录色谱图。 强酸破坏

11、试验 取取本品适量，加盐酸溶液5ml溶解，放置2h,用imol r1氢氧化钠溶液屮和，用流动相转移稀释至一 50汕量瓶屮，并稀释至刻度，摇匀，同 法做空白试验，照上述试验条件试验，保留至样品峰保留时间2倍。记录色谱图。强碱破环试验 取本品适量，加lmol-l-1氢氧化钠溶液5ml溶解，放置2h,用 lmol-l* 盐酸溶液屮和，用流动相转移稀释至一 50汕量瓶小，并稀释至刻度，摇匀，同 法做空白试验，照上述试验条件试验，保留至样品峰保留时间2倍。记录色谱图。 结论：07有关物质方法学研究参考双氯芬酸钠原料项下的【有关物质】制定如下： 取本品10片，除去包衣后，研细，精密称取g（约相当于双氯芬酸

12、钠0. lg）,力fl乙醇20ml,超声处理10、20、30分钟或加热回流30分钟，滤过，滤液 挥干，残渣加乙醇10ml使溶解，作为供试品溶液（1ml中约含10mg的溶液）精密量取适量， 加乙醇稀释制成每lml中含0.1 mg 、02mg、0.4mg、lmg的溶液作为对照溶液，照薄层 色谱法试验，分别吸取上述溶液各10u1,分别点于硅胶gf254薄层板上以乙酸乙酯三氯甲烷 冰醋酸（25：25： 0.2）为展开剂，展开后，晾干，置紫外灯（254nm）下检视，供试溶 液如显杂质斑点与对照溶液的主斑点比，不得更深。序号样品处理方法试验结果备注1超声处理10分钟2超声处理20分钟3超声处理30分钟4加热回流30分钟结论：空口试验 称取干预胶化淀粉5.0g、干淀粉8.0g, ®脂酸镁0. lg分别过 80目筛网,得空白样品。（辅料比例同处方）分别取氯芬黄敏片样