不同方法干燥紫苏梗迷迭香酸含量HPLC法检测分析

1、    不同方法干燥紫苏梗迷迭香酸含量hplc法检测分析    刘佳陇王胜升李虹摘要    为测定不同方法干燥处理的紫苏梗中迷迭香酸的含量，确定最适紫苏梗干燥方法，采用hplc法测定迷迭香酸的含量，即色谱柱为hypersil-c18（250 mm×4.6 mm，5 m），流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（3862），流速为1.0 ml/min，检测波长为330 nm，柱温为25 。结果表明，一步干燥得到的紫苏梗迷迭香酸含量普遍远高于二步干燥得到的紫苏梗;经阳光棚下晾干的紫苏梗迷迭香酸含量最高，晒干和45 烘干的紫苏梗迷迭香含

2、量稍低。由此说明，紫苏梗产地初加工应一步干燥且以阴干最佳，直接晾晒与低温烘干亦可。关键词    中药材;紫苏梗;干燥方法;迷迭香酸;高效液相色谱   r931.4            a  1007-5739（2019）13-0202-02                                   

3、0;                                                 开放科学（资源服务）标识码（osid）determination  of  rosmarinic  acid  content  in  caulis  perillae  fr

4、utescens  dried  by  different  methods  by  hplcliu jia-long    wang sheng-sheng    li hong（jiangsu longfengge traditional chinese medicine planting co.，ltd.，yangtze river pharmaceutical group，taizhou jiangsu 225300）abstract    in order to

5、 determine the content of rosmarinic acid in caulis perilla frutescens with different drying methods，and find out the optimum drying method for caulis perilla frutescens，the hplc method was used with a hypersil-c18 analytical column（250 mm×4.6 mm，5 m），the column temperature was 25 . an isocrati

6、c elution of methanol（a）and methanoic acid solution（b）（volume ratio of 3862） was applied，the flow rate was 1.0 ml/min，and the detector wavelength was set at 330 nm. the results showed that the rosmarinic acid content was much higher in caulis perilla frutescens dried through one step than two step.

7、the rosmarinic acid content of caulis perilla frutescens dried in sunshine shed was the highest，and rosmarinic acid contents of caulis perilla frutescens dried in the sun and dried at 45 were slightly lower. therefore，caulis perilla frutescens should be dried through one step in the preliminary proc

8、essing in producing areas，and drying in the shade is the best，drying in the sun directly or cryodrying are also acceptable.key words    traditional chinese medicine;caulis perilla frutescens;drying method;rosmarinic acid;hplc紫蘇梗又称苏梗，为唇形科植物紫苏（perilla frutescens（l.）britt.）的干燥茎1。气微香、味淡2，性辛、温，

9、归肺、脾经，具有理气宽中、止痛、安胎的作用，可用于治疗胸膈痞闷、胃脘疼痛、嗳气呕吐、胎动不安3。主要化学成分包含紫苏醛、柠檬烯、 -丁香烯、烷烃类、酯类及多环杂烯类等挥发油类化合物4-6，具有扩张皮肤血管、刺激汗腺分泌而解热、抗过敏、降血糖等作用7-10。紫苏梗主产于湖北、河南、山东、四川、河北、黑龙江等地。传统的干燥方法为阴干和晒干。因受产地广、种植方法多样、采收期不明确、干燥方法不统一以及利益驱使下的采收期延迟等因素的影响，导致市场上商品紫苏梗质量不稳、品质不佳。笔者通过长期生产实践发现，紫苏梗的产地采收加工对紫苏梗的质量影响很大，不同的干燥方法对紫苏梗中指标性成分迷迭香酸含量影响极大。本

10、文以前期所做紫苏梗采收期试验结果为依托，以迷迭香酸含量为指标，依据2015版中国药典11，采用高效液相色谱法测定采收期不同干燥方法干燥所得紫苏梗中迷迭香酸的含量，以期为确定紫苏梗最佳产地干燥方法提供参考，用于指导紫苏梗产地干燥加工。1    材料与方法1.1    仪器与药品普析l600-2高效液相色谱仪，普析l600-uv紫外检测器，lcwin2.0色谱工作站;shimadzu auw220d型（max=220 g/82 g，min=1 mg）和双杰jj500型（max=500 g，d=0.01 g）电子天平;新龙xl-100型多功能高速粉碎机;沪南电

11、炉烘箱厂202-00a型电热恒温干燥箱（1 200 w，10300 ）;天津奥特赛恩斯as5150型超声波清洗仪;迷迭香酸对照品采购于北京益尔康乐生物科技有限公司（批号：111871-201706，供含量测定用）;甲醇为色谱纯，甲酸为分析纯，丙酮为色谱纯，水为重蒸水。1.2    样品采集与处理试验检测用紫苏梗采自河南省商丘市夏邑县紫苏种植基地。紫苏梗收获期，从基地采取不同批次、不同部位的样品进行不同干燥方法处理。样品分为a、b、c 3批，a批为鲜品，2018年10月6日采集;b批为经过1 d日晒的半干品，2018年10月2日采集;c为雨后采集鲜品，2018年9月17日采集

12、。其中a批收集9份样品，分别编号为a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7、a8、a9;b批收集样品5份，分别标号为b1、b2、b3、b4、b5;c批收集1份样品。每份样品3株紫苏。共采集45株紫苏，分为15份样品。将干燥后的样品粉碎，过3号筛，装样品袋，编号，常温保存，待检12-13。1.3    对照样品溶液的制备精密称取迷迭香酸对照品10 mg，置25 ml容量瓶中，加60%丙酮至刻度，摇匀，精密量取5 ml，置于50 ml量瓶中，加60%丙酮至刻度，摇匀，配制成浓度为40 g/ml的对照品溶液，避光冷藏14-15。1.4    供试样品溶液的制备

13、参照2015版中国药典1的提取方法進行。每份样品，精密称定样品粉末（过3号筛）约0.5 g，分别置于具塞锥形瓶中（准确编号），精密加入60%丙酮25 ml，密塞，称定重量，超声处理（250 w，40 khz）30 min，再称定重量，用60%丙酮补足减失的重量，摇匀，0.2 m微孔滤膜过滤，续取滤液，置于进样瓶中，即可。1.5    色谱条件参照2015版中国药典第四部（通则0512）高效液相色谱法11，并经试验确定色谱条件。色谱柱为hypersil-c18（250 mm×4.6 mm，5 m）;流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（3862）;流速为1.0 ml/m

14、in;检测波长为330 nm;柱温为25 ;理论塔板数以迷迭香酸计算不低于3 000。1.6    样品含量测定按照1.4的方法制备供试品溶液，分别进样10 l;精密吸取40 g/ml对照品溶液10 l进样3次16-17。计算公式具体如下：样品含量（%）=（ax×cr×25）/（ar×mx×106×（1-n）×100式中，ax为供试品的峰面积;ar为对照品的峰面积;cr为对照品溶液的浓度（g/ml）;mx为供试品取样量（g）;n为样品含水量（%）。2    结果与分析根据已有的方法学结果11以及

15、研究组前期试验结果，本试验的线性关系、精密度、重复性、稳定性、回收率等均符合试验要求。从表1可以看出，不同的干燥方法对紫苏梗的有效成分含量影响比较大。对一步干燥（a批）样品检测结果对比分析发现，在适当的温度范围内，随着烘干温度的升高迷迭香酸含量明显降低，这说明高温会促使紫苏梗里的有效成分迷迭香酸散失或降解;阳光棚晾干（a5）的紫苏梗样品迷迭香酸含量高于晒干（a4）、烘干紫苏梗样品（a1、a2、a3）的迷迭香酸含量;在相同的干燥方法下，侧枝样品（a8、a9）迷迭香酸含量均高于主干（a6、a7）和全株（a2、a5），主干样品和全株样品（a6和a2，或a7和a5）的迷迭香酸含量基本一致，这是由于侧枝在全株茎杆中的占比很小所致;经过两步干燥的（b批：先日晒1 d成半干品，再分别45 烘干、60 烘干、75 烘干、晒干和阳光棚晾干）紫苏梗样品，迷迭香酸含量普遍比较低;经受雨淋的紫苏梗样品（c批），迷迭香酸含量显著下降，为0.006%，远远低于药典