RNA干扰技术抗HBV和HCV感染

1、1会计学RNA干扰技术抗干扰技术抗HBV和和HCV感染感染23干扰素干扰素核苷类似物核苷类似物不能完全清除不能完全清除cccDNA抗病毒效果并不理想抗病毒效果并不理想4RNA i作为一种新型的抗病毒基因治疗技术作为一种新型的抗病毒基因治疗技术高效、特异的高效、特异的抗病毒作用抗病毒作用设计灵活的设计灵活的多靶位效应多靶位效应一种前景广阔的基因治疗手段一种前景广阔的基因治疗手段5678910111213141516外源性 dsRNA细胞膜病毒转座子转基因单链RNAdsRNA dsRNA2123nt dsRNA-核酸酶 RNAi核酸 mRNA 正义RNA 链互换 反义RNA- mRNA核酸酶 mR

2、NA降解RNAi或PTGS171819（3）RNAi抑制基因表达具有很高的效率抑制基因表达具有很高的效率，表型可以达到缺失突变体表型的程度，表型可以达到缺失突变体表型的程度，而且相对很少量的双链而且相对很少量的双链RNA分子（数量远分子（数量远远少于内源远少于内源mRNA的数量）就能完全抑制的数量）就能完全抑制相应基因的表达；相应基因的表达；（4）RNAi抑制基因表达的效应可以穿过抑制基因表达的效应可以穿过细胞界限，在不同细胞间长距离传递和维细胞界限，在不同细胞间长距离传递和维持。持。(5)有剂量依赖关系有剂量依赖关系（6）可以有效地与其他较成熟的基因功能）可以有效地与其他较成熟的基因功能研究

3、方法结合使用研究方法结合使用2021已知一个有效的siRNA序列，需要维持较长时间的基因沉默体内实验可能会引起一定的免疫反应和不良反应 以腺病毒载体为代表，可以直 接高效率感染细胞，避免由于质粒转染效率低而带来的种种不便；而且转染效果更加稳定病毒载体转录找到最有效HBV siRNA，需要大量siRNA进行研究体外实验筛选有效HBVsiRNA为简便、快速shRNA转染效率不及直接化学合成导入，发挥抗病毒作用相对siRNA操作较慢一些采用RNA聚合酶启动子， 操纵shRNA在哺乳动物细胞中的表达；抑制靶基因的作用持续数周甚至更久， 操作方便质粒载体转录 基因治疗体内实验的发展方向合成成本较昂贵，体

4、内药效学和药代动力学仍需进一步研究给药途径多样，体内可以直接 静脉注射，高效，半衰期长， 不良反应少。化学合成（修饰） 合成成本较高， 容易被RNAse污染，siRNA体外易降解 为早期siRNA抗HBV治疗的常用制备方法，导入细胞相对常用制备方法，导入细胞相对容易，发挥抗病毒效应相对较 快速直接化学合成（未修饰） 适用性 缺 点 优 点制备方法 各种制备方法的优缺点各种制备方法的优缺点2223242526272829303132333435363738已知一个有效的siRNA序列，需要维持较长时间的基因沉默体内实验可能会引起一定的免疫反应和不良反应 以腺病毒载体为代表，可以直 接高效率感染细

5、胞，避免由于质粒转染效率低而带来的种种不便；而且转染效果更加稳定病毒载体转录找到最有效HBV siRNA，需要大量siRNA进行研究体外实验筛选有效HBVsiRNA为简便、快速shRNA转染效率不及直接化学合成导入，发挥抗病毒作用相对siRNA操作较慢一些采用RNA聚合酶启动子， 操纵shRNA在哺乳动物细胞中的表达；抑制靶基因的作用持续数周甚至更久， 操作方便质粒载体转录 基因治疗体内实验的发展方向合成成本较昂贵，体内药效学和药代动力学仍需进一步研究给药途径多样，体内可以直接 静脉注射，高效，半衰期长， 不良反应少。化学合成（修饰） 合成成本较高， 容易被RNAse污染，siRNA体外易降解 为早期siRNA抗HBV治疗的常用制备方法，导入细胞相对常