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文档简介
1、动物科学学院兽医临床诊断学实验指导书主 性 冯 杰 编写适用专业:动物医学 贵州大学二OO七年八月前 言兽医临床诊断学的基本内容涉及兽医临床检查的基本方法、基本知识、基本理论和临床操作技能;还介绍了实验室常用检验项目、检验方法及其诊断意义,以及兽医X线检查、B超检查和兽医心电图检查的基本知识等。通过学习,让学生熟练掌握临床检查的基本方法,并运用于临床一般检查和系统检查,最终达到初步的临诊分析能力,对动物常见疾病能够作出诊断和处置。兽医临床诊断学是一门实践性很强的课程。为了使学生不仅在理论上学好本门课的基本知识,而且能确实掌握有关的基本技能和操作技术,并能应用于临诊实际,以保证教学质量,必须在动
2、物保定、投药、一般检查、系统检查、血常规检查等方面加强实践动手操作能力。 实验项目-动物的接近与保定,要求学生掌握动物通用保定方法,确保临诊过程中人畜安全。实验项目-动物投药、注射及穿刺,要求学生熟练掌握动物投药、注射及穿刺技术。实验项目-一般检查,要求学生熟练掌握一般检查的内容及其临床意义。实验项目-循环系统检查、呼吸系统检查、消化系统检查,要求学生熟练掌握系统检查的内容及其临床意义。实验项目-血液的采集、抗凝及血常规检查,要求学生了解血常规检查的内容及程序。实验项目-现场病例诊疗分析,主要考查学生综合运用知识的能力和分析能力。其中血液的采集、抗凝及血常规检查和现场病例诊疗分析为综合性实验项
3、目。本指导书适用于动物医学本科专业的学生。在实验项目的编排上,做到循序渐进、由浅入深,重点突出培养学生的操作动手能力和综合运用知识的能力。目录 1.实验一:动物的接近与保定42.实验二:动物投药、注射及穿刺63.实验三:一般检查94.实验四:循环系统检查115.实验五:呼吸系统检查136.实验六:消化系统检查157.实验七:血液的采集、抗凝及血常规检查178.实验八:现场病例诊疗分析24附:实验报告的基本内容及要求26贵州大学实验报告27实验一:动物的接近与保定实验学时:2实验类型:操作实验要求:必修一、实验目的通过本实验的学习,使学生熟悉接近动物的原则,掌握通用动物保定方法,为今后的临诊工作
4、奠定基础。 二、实验内容 动物接近;动物保定。三、实验原理、方法和手段本实验为操作性,方法及手段详见实验步骤。四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要求和具体条件,采用以学生自主训练为主的开放模式组织教学。五、实验条件成年黄牛两头、保定绳、诊疗室等。六、实验步骤(以黄牛为例)1黄牛接近(1)接近黄牛前,应向饲养员了解其性情,有无咬、踢、抵等恶癖,然后以温和声音打招呼,再从其侧方慢慢接近。(2)接近后,用手抚摸黄牛颈侧待其安静后,再行检查。(3)检查时,应将一手放于黄牛适当部位(如肩部、髋结节),一旦黄牛剧烈骚动抵抗时,即可作为支点向对侧推动并迅速离开。2.黄牛保定(1)钳鼻保定法。用鼻钳子钳压
5、鼻中隔,或用拇指和中指捏住鼻中隔,向后上方提举保持之。对穿有鼻环的牛,牵拉鼻环绳即可。(2)捆角保定法。用一根绳拴在双侧牛角根部,并用此绳将牛头固定于立柱或树干上。(3)柱栏保定法。可用二柱栏、四柱栏、五柱栏、六柱栏保定。(4)双环套倒牛法。用12-15米长的圆绳1条,一端拴在牛角根部,另端由颈背侧引向后方,经肩胛后方及髋结节前方时,分别绕背胸及腰腹部各作一环套,再引绳向后。两环套之绳交叉点均在倒卧对则。随后,由2人固定牛头并向倒卧侧按压,3人向后牵拉倒绳,牛因绳套压迫,胸腹肌紧缩,后肢屈曲而自行倒卧。(5)提肢倒牛法。用7-8米长的圆绳一条,折成一长一短的双叠,在折叠部做猪蹄扣,套在倒卧侧前
6、肢掌部。先将短绳穿过胸下,从对侧经背部返回交1人固定。再将长绳引向后方,在髋结节之前绕腰腹部作一环套,并继续引向后方,交1人固定。放倒时,拉紧前方短绳,提举倒卧侧前肢;再将后方绳环经臀部移至胫部,收紧并向后方牵拉,使绳紧缚后肢,牛即先坐下而后卧倒。倒卧后的保定应根据需要进行。短时间保定且牛体不大时,可令一助手坐在后肢后方的地上,牢固地抓住上侧后肢并用力向后拉,脚抵于另一后肢的跗关节上,用力向前蹬,另一助手紧抓前肢并牢固地使其屈曲,同时用一膝抵住患畜颈部。需长时间保定时,可将两前肢用绳捆在一起,向前伸直,固定;同样,两后肢捆好后,向后拉直固定;另1人固定头部。七、思考题牛五柱栏保定如何操作?适合
7、于哪些检查或手术?八、实验报告要求学生作好实验预习、实验记录和实验报告。在正式实验前先作实验预习,并以书面形式交于实验指导老师,检查可行后方能作正式实验。实验过程中对实验相关内容及步骤作详细记录。实验完毕后填写实验报告,交由指导教师批阅。九、其它说明条件具备时可增加其他动物的保定内容。实验二:动物投药、注射及穿刺实验学时:2实验类型:操作实验要求:必修一、实验目的通过本实验的学习,使学生熟练掌握动物投药法、注射法及穿刺技术,为今后的临诊工作奠定基础。二、实验内容 投药法;注射法;穿刺术。三、实验原理、方法和手段本实验为操作性实验,方法及手段详见实验步骤。四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要
8、求和具体条件,采用以学生自主训练为主的开放模式组织教学。五、实验条件诊疗室、黄牛两头、保定绳、穿刺针、注射器、输液器、胃导管、长颈橡胶瓶、5%碘酊棉球、75%酒精棉球及生理盐水等。六、实验步骤(以黄牛为例)(一)长颈橡胶灌药法:主要用于少量的水剂药物或将粉剂、研碎的片剂、加适量的水而制成的溶液、混悬液、糊剂、中药及其煎剂、片剂、丸剂、舔剂等,经口灌给病畜。1牛站立保定,一手握角根,另手握鼻中隔,或装着鼻钳子,使头稍高抬固定。2术者站在斜前方,左手食、中指从牛的一侧口角处伸入口腔,并轻压舌头,右手持盛满药液的灌药瓶,自另侧口角伸入舌背部抬高瓶底,并轻轻振抖,如用橡胶瓶时可压挤瓶体,促进药液流出,
9、在配合吞咽动作中继续灌服,直至灌完。注意不要连续灌注,以免误咽。(二)片剂、丸剂、舐剂投药法:术者用一手从一侧口角伸入拇指顶上颚打开口腔,另手持药片、药丸或用竹片刮取舔剂,自另侧口角送入舌根部,同时抽出另手使其闭口,并用右手掌托其下颌骨,使头稍高抬,待其自行咽下。(三)经鼻胃导管投药法:1动物保定,固定牛头。2术者站于牛头稍右前方,用左手无名指与小指伸入左侧上鼻翼的副鼻腔、中指、食指伸入鼻腔,与鼻腔外侧的拇指固定内侧的鼻翼。3右手持胃管将前端通过左手拇指与食指之间沿鼻中隔徐徐插入胃管,并加以固定,防止病畜骚动时胃等滑出。4当胃管抵达咽部后,随病畜咽下动作将胃管插入食道。有时可能拒绝不咽,推送困
10、难,此时不要勉强推送,应稍停或轻轻抽动胃管,诱发吞咽动作,顺势将胃管插入食道。5判定胃管正确插入食道后,再将胃管前端推送颈部到下 处。连接漏斗,先投少量清水,证明无误后,即可投药。也可连接投药唧筒,将药液压送入胃内。6投药之后,再投以少量清水,冲净胃等内残留的药液,然后徐徐抽出胃管。用完的胃管放在煤酚皂溶液中浸泡消毒、备用。7注意事项(1)插入或抽动胃管时要小心、缓慢,不宜粗暴。(2)当病畜呼吸极度困难,或有鼻炎、咽炎、喉炎、高温时,禁用胃管给药。(3)当证实胃管插入食道深部后,方可进行投药。如投药后引起咳嗽、气喘,应立即停止。(4)药物误投入肺的表现及其抢救措施(四)皮下注射法:将药物注射于
11、皮下组织内,经毛细血管、淋巴管吸收,一般经5-10分钟呈现效果。凡是易溶解无强烈刺激性的药品及菌苗、疫苗等均可作皮下注射。1部位:牛在颈侧或肩胛后方的胸侧。2方法:局部剪毛消毒后,用左手的拇指和中指捏起皮肤,食指压其顶点,使其形成三角凹窝。右手持注射器,迅速将什头刺入凹窝中心的皮肤内,深2厘米左右。放开皮肤,抽动活塞不见回血时,注入药液。药液多时,应分点注射。注射完毕拔出针头,局部涂以碘酊。(五)肌肉注射法:肌肉内血管丰富,注射后药液吸收较快,仅次于静脉注射;又因感觉神经比皮下少故引起疼痛较轻,临床上应用较多。1部位:臀部和颈侧。2方法:剪毛消毒后,将针头先刺入肌肉内,再接连吸好药液的注射器,
12、抽拔活塞确认无回血后,注入药液。先接好针头一次操作也可。注射时,不要将针头全刺入肌肉内,以免折断时不易取出。(六)静脉注射法:将药液直接注于静脉管内,随着血流很快分布到全身,奏效迅速,但排除较快,作用时间短。1部位:在颈静脉沟上1/3与中1/3交界处进行颈静脉注射。2方法:剪毛消毒后,以左手指压在颈静脉沟下1/3处,在上方静脉怒张后,用16#垂直刺入上1/3与中1/3交界处静脉,见到回血后,将针头顺血管走向推进1厘米,将药液徐徐注入。注射完毕,左手拿酒精棉球压紧针孔,右手迅速拔出针头。为了防止针孔溢血,继续紧压局部片刻,最后涂以碘酊。(七)瘤胃穿刺法: 可作为急性瘤胃膨胀时的一种急救措施,以免
13、造成窒息或瘤胃破裂。有时为采取瘤胃内容物,或向瘤胃内注药,也需实施本手术。1部位:在左肷窝部,由髋结节、腰椎横突和最后肋骨三者之间所构成的等距离点处。当瘤胃膨胀时,取其膨胀部顶点。2方法:剪毛消毒后,先切1厘米长的皮肤切口,将套管针对准右侧肘头,迅速刺入深约10-20厘米。用酒精棉球围绕并固定套管,抽出内针,以纱布块堵住管口进行间歇放气。套管针堵塞时,可插入内针疏通或稍摆动套管。排气后可向瘤胃内注入防腐止酵剂。完毕插入内针,用力压迫腹壁、慢慢拔针、切口涂碘酊,并用火棉胶覆盖。紧急情况下,无套管针时,可就地取材,切开皮肤后用竹管、放血针头等迅速穿刺排气,先救命后再采取抗感染措施。七、思考题1牛颈
14、静脉注射的操作要点是什么?2胃管投药时,如何判断胃管进入食道?八、实验报告要求学生作好实验预习、实验记录和实验报告。在正式实验前先作实验预习,并以书面形式交于实验指导老师,检查可行后方能作正式实验。实验过程中对实验相关内容及步骤作详细记录。实验完毕后填写实验报告,交由指导教师批阅。实验三:一般检查实验学时:2实验类型:操作实验要求:必修一、实验目的通过本实验的学习,使学生熟练掌握般检查的内容和方法,为判断病情的大体情况和进一步检查奠定基础。二、实验内容 整体状态观察;皮肤和被毛检查;可视粘检查;浅在淋巴结检查;T、P、R检查。三、实验原理、方法和手段本实验为操作性实验,方法及手段详见实验步骤。
15、四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要求和具体条件,采用以学生自主训练为主的开放模式组织教学。五、实验条件诊疗室、黄牛两头、保定绳、体温计、听诊器等。六、实验步骤(以黄牛为例)(一)整体状态观察1精神状态:观察病畜神态、根据其耳的活动,眼的表情及各种反应、举动而判断。分为抑制状态和兴奋状态。2营养:根据肌肉的丰满度、皮下脂肪的蓄积量及被毛的情况而定。分为营养良好和营养不良。3发育:根据骨骼发育程度及躯体大小而定。如体长、体高、体重、胸围、管围等。4 躯体结构:注意头、颈、躯干、四肢及关节的形态和比例。5姿势(二)被毛和皮肤检查1鼻镜:健康牛鼻镜有少许水珠,触之有凉感。病理情况常为干燥、增温和
16、龟裂等。示热性病和前胃疾病。治疗过程由干转湿,为病情好转征兆。2被毛:清洁、光泽及脱落情况。3皮肤颜色:主要检查白色皮肤的动物。4皮肤温度:正常时牛鼻镜冰凉、角根有温感。分为全身性皮温升高、局限性皮温升高、全身性皮温降低、局限性皮温降低(该部水肿或外周神经麻痹)。5皮肤湿度:通过视诊和触诊。6皮肤弹性:牛有最后肋骨后部。7皮下组织:浮肿、气肿、血肿、脓肿、淋巴外渗、疝、肿瘤。(三)可视粘膜检查(以眼结合膜为例)检查有无肿胀、外伤、分泌物及颜色。检查巩膜可扭转牛头,检查结膜则大拇指拨开下眼睑。水牛较深,黄牛较浅。(四)浅在淋巴结检查颌下、肩前淋、膝襞及乳房上淋巴结等。(五)体温检查:直肠温。黄牛
17、体温范围:37.539.50C。(六)呼吸数检查:黄牛1025次/次。(七)脉搏数检查:检查尾动脉,距尾根10厘米腹面。黄牛4080次/分。七、思考题病理情况下眼结膜检查有哪些颜色变化?八、实验报告要求学生作好实验预习、实验记录和实验报告。在正式实验前先作实验预习,并以书面形式交于实验指导老师,检查可行后方能作正式实验。实验过程中对实验相关内容及步骤作详细记录。实验完毕后填写实验报告,交由指导教师批阅。实验四:循环系统检查实验学时:2实验类型:操作、验证实验要求:必修一、实验目的通过本实验的学习,使学生熟练掌握心血管系统检查的内容及方法,为心血管系统疾病及全身疾病的检查奠定基础。二、实验内容
18、心搏动视诊和触诊;心脏叩诊;心脏听诊;血管检查。三、实验原理、方法和手段本实验为操作性和验证性实验,方法及手段详见实验步骤。四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要求和具体条件,采用以学生自主训练为主的开放模式组织教学。五、实验条件诊疗室、黄牛两头、保定绳、听诊器等。六、实验步骤(以黄牛为例)(一)心搏动视诊和触诊1黄牛站立保定,左前肢前跨,充分露心区。2检查者于黄牛左侧,观察左侧肘后心区被毛及胸壁振动情况。3触诊时用右手搭于髻甲部,左手贴于左肘后方心区。(二)心脏叩诊1黄牛站立保定,左前肢前跨,充分露心区。2肩胛骨垂直向下至心区进行叩诊,标记清浊音过渡点;往后上45度叩诊,同样标记清浊音区过
19、渡点,两点弧线连接,即为心浊音区后上界。(三)心脏听诊1黄牛站立保定,左前肢前跨,充分露心区。2左第四、第三肋间,右第四肋骨。黄牛心音较马清晰,水牛心音模糊,犬心音清亮。3听心率、强度、分裂、杂音及心率不齐等。(四)动脉血管检查。牛为尾动脉。(五)静脉血管检查(以牛颈静脉为例)。颈静脉波动超过下三分之一时,多为病态。有阳性、阴性和伪性之分。七、思考题心脏异常听诊音有哪些? 颈静脉波动有哪几种?八、实验报告要求学生作好实验预习、实验记录和实验报告。在正式实验前先作实验预习,并以书面形式交于实验指导老师,检查可行后方能作正式实验。实验过程中对实验相关内容及步骤作详细记录。实验完毕后填写实验报告,交
20、由指导教师批阅。实验五:呼吸系统检查实验学时:2实验类型:操作、验证实验要求:必修一、实验目的通过本实验的学习,使学生熟练掌握呼吸系统检查的内容及方法,为呼吸系统疾病及全身疾病的检查奠定基础。二、实验内容 呼吸次数、呼吸式、上呼吸道、鼻液、咳嗽及胸廓检查等。三、实验原理、方法和手段本实验为操作性和验证性实验,方法及手段详见实验步骤。四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要求和具体条件,采用以学生自主训练为主的开放模式组织教学。五、实验条件诊疗室、黄牛两头、保定绳、叩诊槌及叩诊板、听诊器等。六、实验步骤(以黄牛为例)(一)呼吸次数的测定:在一般检查已讲。(二)呼吸式观察:健康者通常呈胸腹式呼吸,
21、深度、间隔时间均匀。病情况为胸式呼吸和腹式呼吸。(三)鼻液检查:为呼吸道及肺脏病理性产物(健康水牛除外)。检查其是否为单侧或双侧、数量、性质及混杂物。(四)咳嗽检查:听取咳嗽声音、性质及咳嗽反应。人工诱咳法:站立,一手置于其髻甲部,另手握住挤压喉头及第一、二气管环。也可用捂鼻法。正常可引起一至二声咳嗽,如呈频繁咳嗽,常为喉、气管的敏感反应。(五)胸部视诊、触诊和叩诊1视诊:观察胸廓外形,对称性及局部变化。2触诊:通过触摸,判断胸壁敏感性、有无浮肿、气肿,以及肋骨有无变形或骨折。3叩诊:用槌板叩诊法。由前往后,由上而下,每隔3-4厘米叩诊。叩诊区后下界为髋结节水平线与第11肋骨交点及肩关节水平线
22、与第8肋骨交点的圆弧连线,终于第4肋。前界为肩胛骨后角向下所着垂线。上界为肩胛骨后角引向髂结节的连线与第11肋的线段。(六)胸部听诊。用听诊器,在上述肺区每隔3-4厘米听诊。听不清晰,可作运动或捂鼻放开后听诊。牛较强,可听到“夫夫”音。有时可听到罗音、胸膜摩擦音(吸气末和呼气初,示纤维素性胸膜炎。)。七、思考题胸部异常呼吸音有哪些? 鼻液和咳嗽检查包括哪些内容?八、实验报告要求学生作好实验预习、实验记录和实验报告。在正式实验前先作实验预习,并以书面形式交于实验指导老师,检查可行后方能作正式实验。实验过程中对实验相关内容及步骤作详细记录。实验完毕后填写实验报告,交由指导教师批阅。实验六:消化系统
23、检查实验学时:2实验类型:操作、验证实验要求:必修一、实验目的通过本实验的学习,使学生熟练掌握消化系统检查的内容及方法,为消化系统疾病及全身疾病的检查奠定基础。二、实验内容 饮食欲、口腔、咽、食管、腹部、直肠、排粪动物、粪便检查等。三、实验原理、方法和手段本实验为操作性和验证性实验,方法及手段详见实验步骤。四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要求和具体条件,采用以学生自主训练为主的开放模式组织教学。五、实验条件诊疗室、黄牛两头、保定绳、叩诊槌及叩诊板、听诊器等。六、实验步骤(以黄牛为例)(一)采食状况检查1采食和饮水。牛用舌卷食草饲料。2反刍和嗳气。时间、次数。采食后一小时至半小时反刍,每次
24、反刍持续20-60分钟,每个食团再咀嚼40-60次,每昼夜4-8次。每小时嗳气15-30次。3呕吐。牛少呕吐,呕吐则不安、呻吟,腹肌剧烈收缩。(二)口腔检查。检查者握捏牛鼻及中隔,强行上提,另手从口角伸入拉出舌头。湿度、温度、颜色、舌苔、完整性及牙齿情况。(三)咽的检查。主要通过视诊和触诊。结核、腮腺炎和放射线菌。(四)食管检查。主要通过视诊和触诊。(五)腹部视诊、触诊和叩诊1大小、形状;敏感性及紧张度。2瘤胃检查。上部叩诊呈臌音,触诊呈面团样硬度,听诊随每次蠕动波可出现逐渐增强后又逐渐减弱的沙沙音、吹风样或远雷音,第分钟2-3次。3瓣胃检查。右侧第7-9肋间肩关节水平线水平线上下3厘米范围。
25、4真胃及肠管。真胃在右侧第9-11肋间、沿肋弓下。真胃如肠音,似流水声或含嗽音。肠音短而稀少。(六)肝脏。右侧肋弓下深部触诊。(七)排粪动作及粪便检查(八)直肠检查七、思考题直肠检查的适应症是什么?排粪动作及粪便的感观检查包括哪些内容?八、实验报告要求学生作好实验预习、实验记录和实验报告。在正式实验前先作实验预习,并以书面形式交于实验指导老师,检查可行后方能作正式实验。实验过程中对实验相关内容及步骤作详细记录。实验完毕后填写实验报告,交由指导教师批阅。实验七:血液的采集、抗凝及血常规检查实验学时:2实验类型:综合实验要求:必修一、实验目的通过本实验的学习,使学生了解血常规检查的内容及方法,为全
26、身疾病的检查奠定基础。二、实验内容 血液采集、抗凝、血常规检查检查。三、实验原理、方法和手段本实验为综合性实验,原理、方法及手段详见实验步骤。四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要求和具体条件,采用以学生自主训练为主的开放模式组织教学。五、实验条件1 实验动物:牛、猪、犬不限。2 实验药品:5%碘酊、75%酒精、抗凝剂及相关药剂。3 实验器械:绷带、采血针、药棉、计数器、血细胞自动分析仪等。六、实验步骤(一)血液采集。装在小试管或带橡皮塞的抗生素小瓶中。若分离血清,则不必加抗凝剂。(二)血液抗凝1 EDTA二钠。夺取血游离钙丰螯合物而起抗凝作用。配成10%溶液,第2滴可对5毫升血液起抗作用。
27、对血细胞形态影响小,可防止血小板聚集,在室温下数小时内,对血红蛋白、血小板读数计数及血片染色均无不良影响。2 草酸钾。夺取血游离钙形成不溶解的草酸钙而起抗凝作用。配成10%溶液,取0.1毫升于试管中烘干,可抗凝5毫升血液。优点是抗凝作用强,缺点是能使红细胞体积缩小6%,故不宜于PCV测定。3 双草酸盐合剂。草酸钾0.8克,草酸铵1.2克,加蒸馏水至100毫升,取此液0.5毫升于试管烘干,可抗凝5毫升血液。草酸铵可使红细胞肿胀,抵消草酸钾缺点。4 柠檬酸钠:与血游离钙结合成松散柠檬酸钙。配成3.8%溶液,取此液0.5毫升可抗凝5毫升血液.用于血沉及输血时的抗凝剂,不宜于血液化学检查。5 肝素。抗
28、凝血作用。配成1%溶液,取此液0.1毫升可抗凝5毫升血液。不宜作纤维蛋白原的测定。(三)血沉测定。红细胞沉降速度或称血沉,是指将抗凝血装入特制玻璃管中,在一定时间内,观察下降的毫米数。1原理:红细胞表面、白蛋白带负电荷,球蛋白、纤维蛋白带正电荷。电荷多少对血沉起着主要起决定作用。2方法:有魏氏法、涅氏法、温氏法、潘氏法、倾斜法和微量等。兽医临床常用魏氏法、涅氏法。报告宜标明是哪种方法。(1)魏氏法。魏氏管200刻度,全长30厘米,带刻度处20厘米。3.8%柠檬酸溶液1毫升与4毫升血液混合。吸上述抗凝血至血沉管,到0刻度为准。室温静置在15、30、45和60分四个时段观察红细胞沉降毫米数。(2)
29、涅氏法。涅氏管加10%EDTA4滴,再加血至0刻度处,混合。室温静置,于15、30、45和60分四个时段观察红细胞沉降数值。3意义。(1)血沉加快。贫血、发热病、感染性疾病、化脓、组织损伤、白蛋白丢失、风湿。(2)血沉减慢。脱水。(四)红细胞压积(packed cell volume)测定。1 温氏管,长110mm,分为10个大刻度,100个小刻度;长15cm充液长针头;水平电动离心机。2 用充液长针取10%EDTA抗凝血于温氏管10刻度,以3000rpm离心30分钟。3 读取红细胞柱高度。一般值在30%-40%之间。(五)血红蛋白(hemoglobin)测定1沙利氏比色法。(1)原理。血液与
30、盐酸作用后,变为褐色的高铁血红蛋白,与标准色柱相比,求出每百毫升血中蛋白克数。(2)器材和试剂。沙利氏血蛋白计,0.1mol/L或1%盐酸。(3)方法。在沙氏比色管加0.1mol/L或1%盐酸至刻度10或20处。用沙氏吸管吸血至20刻度处,加到盐酸液,反复冲洗混匀,静置10分钟,缓缓加入蒸馏水,直至与标准色柱相同为止。液体凹面读数,即为血红蛋白克数。一般100毫升血液含9-12克血红蛋白。2光电比色法。3试纸法。(六)红细胞计数1原理。血液按倍比稀释,计数一定容积内红细胞数并换算成每微升或立方毫米内的数目。 计数板也可用于白细胞和血小板计数。两个计数室,每个计数室9个大方格,大方格边长1mm。
31、四角大方格又分为16个中方格,用白细胞计数。中央大方格用于红细胞计数,由25个中方格组成,每个中方格又由16个小方格组成。计对角线5个中方格即80个方格内红细胞即可(或东西南北中五个中方格)。2器材及试剂。计数板、血盖片、沙利氏吸血管或红细胞稀释管、生理盐水或赫姆氏液。3方法。(1)试管稀释法。5ml吸管吸取红细胞稀释液3.98ml于试管。沙氏吸血管吸取全血样品至20刻度处,与上述稀释液混匀,再用毛细吸管吸取放于计数板计数。(2)红细胞吸管稀释法。红细胞吸管吸全血至刻度0.5处,再吸稀释液至刻度101处,食、拇指堵住上下端,混匀后先弃数滴,静置几分钟后计数。(3)先低倍镜,后高倍镜,数左不数右
32、,数上不数下。五个中方格,一个中方格含16个小方格,共计80个小方格。(4)呈圆形、淡黄色、发亮。(5)每立方毫米红细胞数公式:5X.200.10=10000X(七)白细胞计数1原理。一定量的血液用冰醋酸稀释后,可将红细胞破坏,然后在计数室内计数一定容积的白细胞数,再推算出每毫升血液内的白细胞数。2器材和试剂。血细胞计数板,沙利氏吸血管,0.5或1ml刻度吸管,小试管,显微镜,白细胞稀释液等。3方法(1)试管稀释法:1ml吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于试管。沙氏吸血管吸取全血样品至20刻度处,与上述稀释液混匀,再用毛细吸管吸取放于计数板计数。(2)白细胞吸管稀释法:白细胞吸管吸全血至刻度0
33、.5处,再吸稀释液至刻度11处,食、拇指堵住上的下端,混匀后先弃数滴,静置几分钟后计数。(3)用低倍镜计数四角大方格的白细胞,用公式计算每立方毫米的白细胞数。公为10.20.X4=50X(10为体积倍数,20为稀释倍数,X4为每角白细胞数)。4意义。(1)增多。大多细菌感染,组织急性炎症,注射血清疫苗,大出血,急性溶血。(2)减少。病毒性感染,如猪瘟、流感、马传贫;再障、严重感染、高度衰竭、内毒素性休克、应用氯霉素。(八)白细胞分类计数1血片制作。(1)洁净脱脂两玻片,一载一推。(2)耳尖血一滴于玻片一端。(3)推片于血滴前,向后轻拖血滴扩散,再向前30度推成均匀血膜,自然干燥。2血片染色。(
34、1)染液配制。瑞染粉0.1克,甲醇60毫升。(2)缓液配制。 1%磷酸二氢钠 30.0 1%磷酸氢二钠 20.0 蒸馏水加至 1000.0(3)染色过程蜡笔血膜两端划线,放于支持架上。加染液1-2分钟,再加缓冲液,3-5分钟后,水或蒸馏水冲洗。自然干燥后镜检。3镜检计数。(1)先低倍后油镜。按一定方向曲折移动分类计数,总数不低于100个。(2)嗜碱性白细胞特点。圆形或椭圆形,胞浆中呈深紫色较小的颗粒。(3)嗜酸性白细胞特点。圆形或椭圆形,胞浆中有较大的呈鲜红色的颗粒。(4)嗜中性白细胞特点。圆形或椭圆形,胞浆中有圆形或椭圆形,呈淡玫瑰色的小颗粒。根据细胞核形态分为髓细胞、幼稚型、杆状型和分叶型
35、核细胞。(5)淋巴细胞特点。圆形,核呈深蓝紫色、圆形、致密、常偏位。胞浆呈天蓝色。(6)大单核细胞,大,呈不正、多边、多角形,胞浆呈烟灰色、较暗,核呈紫褐色、近似椭圆或不正形。4临床意义。白细胞数在生理或病理情况下均可发生改变,由于外周血中细胞的组成主要是中性粒细胞和淋巴细胞,尤其是中性粒细胞数量最多,约占白细胞的50%。故在大多情况下,白细胞的增多或减少,主要受中性粒细胞的影响。因此,白细胞增多或减少通常与中性粒细胞的增多或减少有着密切关系和相同意义。各类白细胞变化的临床意义分述如下。(1)中性粒细胞。各种粒细胞均起源于骨髓多能干细胞.粒细胞具有较强的运动能力、吞噬活性和复杂的杀菌系统,凭借
36、其渗透性、变形性、趋化性及吞噬功能等生理特性而捕捉、杀灭组织中、体腔内或血液中的病原体,对机体有重要的保护作用。当病原微生物侵入机体引起局部炎症时,中性粒细胞通过变形运动,从血管内皮细胞间游出,趋向炎症区,将入侵的病原体或坏死细胞吞噬,并通过细胞内溶酶体释放的蛋白水解酶将其消化,防止病原微生物在体内的扩散。中性粒细胞增多。见于急性感染或炎症,如化脓性胸膜炎、化脓性腹膜炎、创伤性心包炎、肺脓肿、胃肠炎、肺炎、子宫炎、乳房炎等,某些传染病如炭疸、猪丹毒等,某些慢性传染病如鼻疽、结核,以及大手术后、外伤、酸中毒前期、烫伤等。核左移伴有白细胞总数增高,称为再生性左移,表示机体的反应性强,骨髓造血功能旺
37、盛,能释放大量粒细胞至外周血,常见于感染,尤其是化脓菌引起的急性感染,也可见于急性中毒、急性溶血、急性失血等。仅核左移对病性的严重程度和机体的反应能力的估计具有一定价值。如白细胞总数和中性粒细胞百分数略增高,并核左移,表示感染程度较轻、机体抵抗力强;但核左移而白细胞总数不增高,甚至减少者,称为退行性左移。在再生障碍性贫血等病理状态下,表示骨髓造血功能减低,粒细胞成熟受阻,严重感染如败血症时可出现这一现象,表示机体反应性低下,骨髓释放粒细胞功能受抑制。核右移主要见于重度的贫血和应用抗代谢药物治疗后及感染的恢复期,但在疾病进展期出现中性粒细胞核右移变化,则提示预后不良。中性粒细胞减少。白细胞总数减
38、少时其主要是中性粒细胞减少,引起中性粒细胞减少的病因很多,主要见于病毒感染性疾病、再生障碍性贫血、缺铁性贫血、骨髓转移癌、放射线、放射性核素,化学药品等均可引起。(2)嗜酸性粒细胞。嗜酸性粒细胞亦具有吞噬作用和变形运动,因细胞内颗粒不含有溶菌酶、吞噬细胞素,而含较多的过氧化物酶和碱性蛋白,故杀菌力远不如中性粒细胞。它能吞噬抗原抗体复合物。对组胺、抗原抗体复合物、肥大细胞释放的嗜酸粒细胞趋化因子等多种物质有趋化性,并分泌组胺酶灭活组胺,减轻某些过敏反应。当寄生虫病或某些过敏症时,组织中肥大细胞增多,血中组胺浓度升高,刺激骨髓释放或生成嗜酸性粒细胞能力加强,导致血液中嗜酸性粒细胞增多;若用肾上腺皮
39、质激素进行治疗、过敏反应消失时,嗜酸性粒细胞也减少。嗜酸性粒细胞增多。主要见于变态反应性疾病(如过敏反应)、寄生虫病(如肝片吸虫、球虫、旋毛虫病等)、皮肤病(如湿疹、疥癣等)以及注射血清之后和某些恶性肿瘤等。嗜酸性粒细胞减少。见于毒血症、尿毒症、严重创伤、中毒、饥饿及过劳等。大手术后,嗜酸性粒细胞常常消失,几天后又常常急剧增多,临床症状也见好转。在长期应用肾上腺皮质激素后也可出现嗜酸性粒细胞减少。(3)嗜碱性粒细胞是一种少见的粒细胞,其生理功能中突出的特点是参与超敏反应。嗜碱性粒细胞的增多与减少,此种情况比较少见,在外周血中本来不易见到,故其减少无临床意义。(4)淋巴细胞源于骨髓适血干细胞,其
40、数量较多,约占白细胞总数的四分之一。淋巴细胞不是一种终未细胞,而是一种不活跃的处于静止期的细胞。它具有与抗原起特异反应的能力,是重要的免疫活性细胞。淋巴细胞因发育和成熟途径不同,可分为胸腺依赖淋巴细胞和骨髓依赖细胞两种类型,即T淋巴细胞和B淋巴细胞,它们之间又有效应细胞和记忆细胞之分。淋巴细胞增多。见于某些感染性疾病,主要是病毒感染如猪瘟、流行性感冒,也可见于某些细菌感染如结核杆菌、布氏杆菌以及血孢子虫病等。淋巴细胞减少。当嗜中性白细胞绝对值增多,伴随减少的常常是淋巴细胞,说明机体与病原处于激烈斗争阶段,以后淋巴细胞由少逐渐增多,常为预后良好的象征。(5)单核细胞。诱导免疫反应。通过吞饮或吞噬
41、可溶性抗原和颗粒性抗原,在溶体酶的作用下将抗原分解,然后通过递质、将抗原提供给淋巴细胞,以激活淋巴细胞在特异性免疫中起重要作用。吞噬和杀灭某些病原体。吞噬红细胞和消除损伤组织及死亡的细胞。主要处理衰老的或异常的红细胞以及清理炎症反应场所。抗肿瘤活性。实验证明激活的巨噬细胞在体外对肿瘤细胞的生长有抑制作用,也有杀灭肿瘤细胞的能力。对白细胞生成的调节。单核细胞和吞噬细胞可产生集落刺激因子,在单核细胞和中性粒细胞生成中可能起反馈性调节作用。单核细胞增多,见于某些原虫性疾病如焦虫病、锥虫病,某些慢性细菌性疾病如结核、布氏杆菌病以及某些病毒性疾病如马传染性贫血等。单核细胞减少,主要见于急性传染病的初期和各种疫病的垂危期。七、思考题红细胞常规检查包括哪些内容?八、实验报告要求学生作好实验预习、实验记录和实验报告。在正式实验前先作实验预习,并以书面形式交于实验指导老师,检查可行后方能作正式实验。实验过程中对实验相关内容及步骤作详细记录。实验完毕后填写实验报告,交由指导教师批阅。实验八:现场病例诊疗分析实验学时:4实验类型:综合实验要求:必修一、实验
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