华中科技大学发酵工程_第五章_发酵工业种子制备

1、http:/ 种子扩大的级数：制备种子需逐级扩大培养的次数 级数愈少，愈利于简化工艺及控制，并可减少种子罐污染杂菌的机会，减少消毒及值班工作量，减少因种子罐生长异常而造成的发酵波动。http:/ 糖、氨基氮、磷酸盐的含量 菌丝形态、菌丝浓度和培养液外观 有无杂菌污染 v其他参数，如接种前酶活、种子罐的溶氧和尾气等 http:/ v生产车间种子制备阶段：种子罐扩大培养 http:/ v无菌方式接保藏的菌种至斜面培养基上，成熟后挑选正常菌落至试管斜面和摇瓶。v菌种产孢子能力强及孢子发芽、生长繁殖迅速，可用固体培养基培养孢子v菌种产孢子能力不强或孢子发芽慢，可用摇瓶液体培养法v不产孢子的菌种，保藏基

2、础上，在一定温度下活化即可http:/ v实验室制备的孢子斜面或摇瓶种子移接到种子罐进行扩大培养v种子罐培养一获得足够的菌种数量，二种子罐的培养基接近发酵罐培养的醪液成分和培养条件，使菌体适应发酵环境 http:/ v但考虑能否在一定时间内获得优质、足量的但考虑能否在一定时间内获得优质、足量的种子以满足发酵的需求种子以满足发酵的需求 http:/ 接种龄 种子罐中培养的菌体从开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间 种子培养期应取菌种的对数生长期为宜，菌种过嫩或过老，不但延长发酵周期，而且会降低产量。http:/ http:/ v接种量过多，菌丝生长过快、溶氧不足，衰老细胞增加等，发酵后劲不足

3、v种量过少延长发酵周期，形成异常形态，而且易造成染菌。 v以生产菌种在发酵罐中的繁殖速度为依据v接种量的大小直接影响发酵周期。http:/ http:/ 斜面冷藏时间v 培养基v pHhttp:/ http:/ 培养温度 v温度过低，菌种生长发育缓慢v温度过高会使菌丝过早自溶在制备土霉素生产种子过程中，高于37培养时，孢子接入发酵罐后表现出糖代谢变慢，氨基氮回升提前，菌丝过早自溶，效价降低等现象。http:/ 制备土霉素生产菌种龟裂链霉菌孢子时发现，在含有少量水分的试管斜面培养基下部孢子长得较好，而斜面上部由于水分迅速蒸发呈干瘪状，孢子稀少http:/ 通气与搅拌 v足够的通气量，以保证菌种代

4、谢正常，提高种子的质量 v搅拌可提高通气效果，促进生长繁殖，过度搅拌导致培养液大量涌泡，液膜表面的酶易氧化变性，泡沫过多增加染菌机会，增加能耗。v丝状微生物不宜剧烈搅拌。http:/ v对孢子的生产能力有较大影响 v冷藏时间越长，生产能力下降越多 链霉素生产中，斜面孢子在6冷藏两个月后的发酵单位比冷藏一个月的降低18，比冷藏3个月的降低35。 http:/ pH v选择最适种子培养pH的原则是获得最大比生长速率和适当的菌量v培养最后一级种子的培养基的pH应接近于发酵培养基的pH，以便种子能尽快适应新的环境 http:/ v菌种稳定性的检查 测定其生产能力，从中挑选高产菌株，并及时对退化菌种进行

5、复壮 v提供适宜的生长环境v种子无杂菌检查，保证纯种发酵。 种子液生化分析项目主要有：营养基质的消耗速度、pH变化、溶氧变化、色泽和气味等http:/ ；v种龄对于生芽孢的种子尤其重要。若接种物含大量芽孢，将给后续发酵带来较长迟滞期 http:/ 举 例： 酵母发酵时的种子扩大培养酵母发酵时的种子扩大培养v酿酒酵母的扩大培养 最初采用纯种进行酵母发酵并设计出酵母繁殖流程，他将每一步的接种量规定为10，并控制繁殖条件与酿造时一致 现代的流程中，接种量为1%或更低，控制的条件也与酿造时不同。http:/ 丝状真菌发酵的种子扩大培养丝状真菌发酵的种子扩大培养 丝状真菌既可以利用孢子，也可以利用菌丝体作为接种物接种到发酵罐进行发酵 http:/ 利用孢子作为接种物利用孢子作为接种物 灰黄霉素产生菌展青霉一试验表明在良好的通气条件下，培养基中含氮是在0.050.1（w/v）之间时，可以产生大量的孢子 http:/ v不能产生无性孢子