酸放散、热放散联合检测新生儿ABO溶血病结果研究

1、酸放散、热放散联合检测新生儿abo溶血病结果研究摘要目的分析酸放散和热放散2种方法联合 检测新生儿abo溶血病结果，以供临床参考。方法 选取462 例检测abo溶血病的标本进行抗体释放试验，采用酸放散和 热放散2种方法同时进行，放散液选用75 ul,检验报告结 果取阳性者。结果2种方法联合检测阳性病例有366例，阳 性率为79.22%；酸放散阳性320例，阳性率69. 26%；热放 散阳性343例，阳性率74. 24%； 2种方法联合检测阳性率较 酸放散试验阳性率高，p0. 05o结论酸放散与热放散同时应 用可提高阳性率。日龄在13d、7d后、a型患儿采用热放 散，46d采用酸放散，可提高新生

2、儿abo-hdn阳性检出率, 减少漏检。关键词酸放散热放散阳性率漏检新生儿溶血病是母婴血型不合导致免疫性溶血性疾病， 其主要是abo血型和rh血型不合2种，临床表现为水肿、 黄疸、贫血、肝脾肿大，严重者可发生胆红素脑病，造成生 命威胁或不可逆转神经系统后遗症13,降低生活质量。 我国以abo-hdn多见，不及时诊治往往造成严重后果。临床 上早期诊治可减少或阻断胆红素脑病的发生4。本文探讨 抗体释放试验采用酸放散和热放散2种方法联检的临床诊断 价值，现报告如下。1资料与方法1.1资料来源2011年11月-2012年6月我院新生儿科住院和婴儿室 abo血型不合的高胆红素血症或疑似ab0溶血患儿共4

3、62例, 日龄023d,男250例，女212例。0a型189例，0b型273 例。1.2仪器与试剂抗-a、抗-b标准血清、ab0标准红细胞、rh （d）血型 鉴定试剂，由上海血液生物医药有限公司生产。微柱凝胶血 型卡、37。（2孵育器、卡式离心机、ii号稀释液、diacidel放 散液、diacidel洗涤液为瑞士 diamed公司生产。日产久保 田配血专用离心机。1. 3方法用edta （乙二胺四乙酸）抗凝管抽取34ml静脉血， 摇匀离心分离血浆后作abo、rh血型鉴定（盐水试管法或微 柱凝胶血型卡式法）及abo溶血病抗体释放试验。抗体释放 试验：取压积红细胞2ml分2管进行洗涤，一管用于酸

4、放 散、一管用于热放散；酸放散采用diacidel洗涤液洗涤（或 盐水洗涤）4次，热放散用生理盐水选涤4次，每次以1000 r/ min离心2 min,每次尽量抽尽上清液弃去，最后1次留 少量清洁的上清液作对照管；用吸管测量压积细胞后，酸放 散加入等量的diacidel放散液，离心1 min （1000 r/ min）, 取分离出的上清液，即为病人红细胞的放散液，加入 diacidel缓冲液摇匀至蓝色备用；洗涤好的热放散管加入与 压积红细胞相等的生理盐水后摇匀，放入561水浴箱5 7min （不要盖）后取出，离心（ 1000 r/min） 12 min, 取出上清即为红细胞的热放散液。取微柱凝

5、胶卡分别标记酸 放散、热放散、上清对照、oc字样，标记好后在各孔（oc 孔加入oc）内加入0.8%1.0%与病人血型相同的标准红细 胞悬液50 pl,再加入相应的放散液75 pl （上清孔内加入 75ul ±清液，oc孔加入热放散液或酸放散液75 ul）后放 入孵育器孵育15min,离心lomin观察结果，结果报告取阳 性者。1. 4统计学分析pems 3. 1软件包进行组间比较，p0.05o 462例新生儿 abo溶血病抗体释放试验检测结果（见表1）,酸放散与热 放散检测不一致的病例凝集强度比较（见表2）。统计学分析：（1）.酸放散阳性与热放散阳性整体比较：x2=2. 8247,p

6、=0. 0928（2）.酸放散、热放散联合阳性与酸放散比较： x2=l 1.9753, p=0. 0005 ；与热放散比较:x2二 3. 2066 ,p=0. 0733（3）.日龄：酸放散与热放散比较：比较x2=3. 8728, p=0. 0491；比较 x2=l. 1097, p=0. 292；比较 x2=l. 1868, p=0. 2760（4）.血型比较：a型酸放散与热放散比较x2=4. 3016, p=0. 0381, b型酸放散与热放散比较x2=0. 3985, p=0. 52793讨论新生儿abo-hdn血清学检测主要是新生儿溶血三项试 验，即直接coomb, s试验（dat）、游

7、离抗体试验和抗体释 放试验，3项试验中抗体释放试验敏感度最高，是最可靠的 检测方法5,也是判定hdn最有力的证据6。抗体释放试 验是通过物理或化学方法把吸附于细胞膜上的抗体解离下 来，成为放散液，通过标准红细胞检测抗体及其相对应的特 异性。阳性说明含有与母体相对应的抗体，可确诊为ab0溶 血病。因抗体释放试验对新生儿ab0-hdn的早期诊断、评估 疾病程度、选择治疗方案等有其特殊的指导意义7,其阳 性率的高低可直接影响到新生儿ab0-hdn的诊断和治疗，早 期诊断和早期光疗或早期应用大剂量人血丙种球蛋白可迅 速降低血清胆红素，缩短黄疸病程8, 9,在一定程度上 可以替代换血疗法10, 11,减

8、少换血并防止胆红素脑病的 发生12, 13 o从上文的结果可见，酸放散与热放散联合检测阳性率明 显高于单一方法，与酸放散比，p0. 05,差异无统计学意义, 但阳性百分率高于单一的热放散。热放散阳性时酸放散有46 例为阴性，占9. 96%,而酸放散为阳性时热放散有23例为阴 性，占4. 98%,两者检测的差异说明用单一检测方法均出现 不同程度漏检，该组病例漏检以酸放散多严重，p 从 日龄阶段观察各个阶段均存在检测结果不一致的病例，随日 龄的增大不一致逐渐减少，以13d的患儿最多，占76. 68%(53/69),统计学比较 x2=10. 7231,p=0. 0011,有统计学意义，若此阶段单用酸

9、放散时即有9. 92%阳性病例漏检，该 组病例13d共有383例，即有38例阳性病例被漏检，使 用热放散时有15例漏检，此阶段用单一检测方法漏检现象 严重，因此2种方法同时使用减少漏检，提高阳性率，为临 床提供可靠的诊疗依据。13d是新生儿ab0溶血病早期治 疗最佳时期，李伟生14等报道“日龄w3d与日龄3d治疗 比较血清胆红素下降，hb的变化及黄疸消退时间差异有统计 学义。据笔者观察，该组病例使用酸放散与热放散同时检测, 结果取阳性者，其阳性结果与临床诊断相符，结果不一致的 病例按阳性报告后，按新生儿ab0-hdn治疗效果好。追踪这 些病例病史、临床表现及实验室检查，患儿黄疸出现较早， 生后

10、24h3d内出现，进展快，母亲血型均为0型，患儿为 a或b型，以间接结合胆红素升高为主，hb、rbc均有所下 降，未查出其他原因，而患儿红细胞放散液中抗体的特异性 是用标准红细胞来确定的，其阳性说明含有与母亲相对应的 特异性抗体，符合临床诊断为abo-hdn,另一方面新生儿溶 血病3项实验是公认可靠的实验检测方法，确诊hdn实验室 主要依据是患儿红细胞放散液中被检出来自母体的对应的 特异性抗体，其阳性可确诊为ab0-hdne15,这些检测结果 不一致的病例符合abo-hdn诊断，只是因检测方法的不同， 出现漏检，用2种方法同时检测正好互补不足。酸放散与热放散比较：日龄13d时热放散较酸放散阳

11、性率髙，p=0. 0491,差异有统计学意义；a型患儿使用热放 散时阳性率较酸放散高，p=0. 0381,差异有统计学意义。统 计学分析在4d后漏检差异已没有统计学意义。但结果应为 阳性的病例可能出现阴性检测结果，假阴性可能误导临床诊 断和治疗。新生儿abo-hdn溶血病抗体释放试验由于检测方 法和放散液剂量16的不同常出现阳性率不一致，产生漏 检，因此若单种方法检测为阴性而又高度怀疑其为阳性病 例，不妨采用另一种方法检测，提高检出率。本文及多种文 献资料证实检测方法的不同和患儿日龄的不同导致检出阳 性率也不同，因此2种或多种方法同时检测可互补不足，另 检测abo溶血病尽量争取生后13d内检测

12、，以达到最大限 度减少漏检，为患儿提供早期确诊早期治疗机会，减少胆红 素脑病的发生。检测结果不一致的病例抗体凝集强度+4+ 均有，以+多见，占 50. 72% (35/69), 2+占 33. 33% (23/69), 3+-4+占15.94% (11/69),不一致随着凝集强度的增强而减 少。综上所述，若能用2种方法同时检测，可互补不足，提 高阳性率，减少漏检，从而减少不必要的误诊，指导临床正 确用药；若不能两者同时应用时，可在日龄13d、7d后采 用热放散、a型患儿选用热放散进行检测，46d患儿采用 酸放散，以提高阳性率。参考文献1 张丽，冯强新生儿溶血病的检测与防治进展j. 实用医技杂志

13、，2005, 12 (1)： 254-255.2 金汉珍，黄德琨，官希吉.实用新生儿学m.3版. 北京：人民卫生出版，2003： 649._3 saintaro h, shdko okazuya ntaro h. shdko. 0. kazuya y. placental transfer of igg subclasses in a japanese population j pediatries international, 2004, 421： 337-338.4 梁武华.早期监测干预对新生儿abo溶血病并胆红 素脑病的影响j 广西医学,2010, 32 (10)： 1205-1206.

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