通塞脉片对实验性糖尿病足模型大鼠作用探究

1、通塞脉片对实验性糖尿病足模型大鼠作用探究摘要目的：观察通塞脉片(tsm)对糖尿病足(df) 模型大鼠足部创伤的治疗作用，并探讨其可能的作用机制。 方法：清洁级雄性sd大鼠，除10只作空白对照组外，其他 大鼠成功复制糖尿病足溃疡模型，随机分为模型组，二甲双 肌组，tsm 高、中、低剂量组(12.44, 6. 22, 3. 11 g kg-l)0 分别于给药第1, 4, 8, 13, 18天对大鼠进行溃疡创面拍照 观察伤口愈合情况，治疗18 d后对足溃疡组织进行病理组 织学检查，務胺法和tba法检测血清中超氧化物歧化酶(sod) 和丙二醛(mda)含量，放射免疫法检测血清白介素6 (il-6) 和

2、肿瘤坏死因子a (tnf- a )含量，免疫组织化学法观察大 鼠创面组织中vegf的表达和毛细血管数。结果：tsm可以改 善糖尿病足大鼠的病理形态学改变，加速4, 8, 13, 18 d 各时相点伤口愈合，降低第18天(修复后期)大鼠血清中 mda, il-6, tnf-a的含量，升高sod含量，其中tsm高剂 量组与模型组比较差异具有显著性(p2.3创面组织学观察每天观察创面愈合情况，以完全上皮覆盖作为创面 愈合的依据，给药第1, 4, 8, 13, 18天分别对大鼠进行溃 疡创面拍照；18 d后取足部溃疡区样本置于10%甲醛溶液中 固定，石蜡包埋，切片4 um, he染色，光学显微镜下观察

3、、 拍照。根据病变轻重程度，依次半定量为1级轻度“ + ”，2 级中度“”，3级重度“”，0级无病变组织标记为“-” o2.4血清中sod, mda检测 给药结束后(第18天)，大 鼠禁食12 h,颈总动脉插管取血,3 000 r min-1离心10 min, 留取血清，按照试剂盒说明书分别采用軽胺法和tba法检测, 用酶标仪分别在550, 532 nm测定吸光度并计算sod, mda 浓度。2. 5血清中促炎因子检测取血清，用放射免疫分析方 法检测血清中il-6, tnf-a的浓度，由北京华英生物技术 研究所检测。2. 6创面中vegf的表达和毛细血管数的测定 取足部溃 疡区样本置于10%甲

4、醛溶液中固定，石蜡包埋，切片4 urn, 作免疫组化染色，检测创面中vegf的表达和毛细血管数目。 vegf检测以胞浆出现棕黄色或棕褐色颗粒者判定为阳性细 胞，采用图像分析软件(image-pro plus 6. 0, ipp)进行 分析，测定图像中阳性区域的面积和阳性比率以及吸光度 值，计算vegf的表达水平；毛细血管计数以血管内皮浆呈 棕黄色为阳性，单个血管内皮细胞或细胞簇染色阳性判定为 1个微血管，计算毛细血管数目。2. 7统计学分析 实验数据以土s表示，应用spss 13.0 软件包进行统计分析，组间比较采用单因素方差分析和q检 验，p 血液学指标检测了 df大鼠的血清sod, mda

5、浓度和il-6, tnf-a的含量，模型组大鼠的mda, il-6, tnf-a 较对照组大鼠显著升高，sod较对照组显著降低，表明高脂 高糖会导致自由基在体内的大量堆积，过量的自由基与生物 膜中的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应，产生大量的氧化 中间产物，这些中间产物如il-6, tnf-a等都是促炎介质, 在伤口修复的后期(第18天)，持续的炎症反应会损伤组织 的修复。实验结果表明tsm高剂量组大鼠的血清sod含量明 显高于模型组(pguo jing, meng qing-hai, yinqiu-yi, lin chao, ma zhi, xu bin, qian xing, bao don

6、g-qiao, zhang ya-yun, zhang qichun, bian hui-min, hu xiao-ying(nanjing university of chinese medicine, nanjing 210023, china)abstract objective： to observe the effect of tongsaimai (tsm) tablets in treating foot trauma of diabetic foot (df) model rats, and discuss its potential mechanism. met hod :m

7、ale sd rats wereselected to duplicate the diabetic foot ulcer model and randomly divided into the blank control group, the model group, the metfomin treatment group, and tsm 12. 44,6. 22,3. 11 g kg-1 groups (n=10) the healingof ulcer wounds were observed on day 1,4,8,13 and 18. after 18 days, a hist

8、opathologic examination was conducted for ulcer tissues. the contents of superoxide dismutase (sod) and malondialdehyde (mda) were detected by hydroxylamine and tba methods. the content of interleukin-6 (il6) and tumor necrosis factor a (tnf-a ) were det erm ined with the radioimm uno assa y.the imm

9、unohis to chemical met hod was used to observe the expression of vascular endothelial growth factor(vegf) in ulcer tissues and the number of capillary vessels resuit： tsm could alleviate the pathological changes of diabetic foot rats, accelerate the ulcer healing on 4, 8, 13, 18 d, reduce mda, il-6, tnf- a , vegf content in rat serum at 18 d ( after the rehabilitat