课题1 微生物的实验室培养 练习(二)

1、课题1 微生物的实验室培养 练习(二)班别： 姓名： 座号： 1、下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ）A将接种环放在火焰上灼烧 B将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 D划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连2有关倒平板的操作错误的是（ ）将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上D等待平板冷却凝固后需要倒过来放置3.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ）先将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落4.涂

2、布平板操作需要用到（ ）A.接种环、滴管、酒精灯B.接种环、移液管、酒精灯C.涂布器、移液管、酒精灯D.涂布器、接种环、酒精灯5微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（ ）A细菌的大小、形状、颜色B菌落的大小、形状、颜色C有无鞭毛 D培养基的不同6以下操作用到接种环的是（ ）A平板划线操作B系列稀释操作C涂布平板操作D倒平板操作7能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（ ）A.将未接种的培养基放在实验桌上培养B.将未接种的培养基放在窗台上培养C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养 D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养8要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ）A固体培养基B

3、液体培养基C加入青霉素的培养基D加入高浓度食盐的培养基9农田土壤的表层，自生固氮菌的含量比较多，将用表层土制成的稀泥浆，接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其它细菌分开，对培养的要求是（ ）加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒温箱培养 28 -30温度下培养A B C D10下列有关微生物的培养或纯化的叙述，错误的是（D）A微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种B培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径C分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法D分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基练习(三)1通过选择培养基可以从混

4、杂的微生物群体中分离出所需的微牛物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法不能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ） A大肠杆菌 B霉菌 C放线菌 D固氮细菌2在培养基中加入伊红和美蓝可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，这种培养基称为( )A选择培养基 B鉴别培养基 C液体培养基 D固体培养基3下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 （D）A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1

5、mL，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，37恒温培养2448小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数4下列关于微生物的培养和运用的叙述，错误的是（B）A通过消毒不能杀死物体内所有的微生物 B利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目C平板划线法和稀释涂布法常用于微生物的接种D微生物所用的培养基成分和植物组织培养用的培养基成分不同5（双选）在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10-6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述正确的是：（BC）AA同学出现这种结果的原因是土样不同B可以将A同学配制的培养基在不加土样的

6、情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误DB、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则6、请回答下列微生物培养与应用的有关问题：（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。（3）若用稀释涂布平板

7、法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。6.答案：（1）温度 酸碱度 易培养 生活周期短（2）灭菌 消毒 损伤DNA的结构（3）比例合适（4）鉴定(或分类)（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.（6）灭菌18（山东临沭

8、一中高三选修测试，生物，8）能够测定样品活菌数的方法是( )A稀释涂布平板法 B直接计数法 C重量法 D比浊法19.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于（ ）A空白对照 B标准对照 C相互对照 D条件对照20.培养SARS病毒时，应选用（ ）A固体培养基 B含有多种无机盐的培养液 C活的鸡胚 D牛肉汤21在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为溶化 调pH 加棉塞 包扎 培养基的分装 称量AB CD24（安徽卷，理综，6）下列是关于“检测土壤中细

9、菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105 、106倍的土壤稀释液和无菌水各01ml，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数1.伊红美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是（ ）A大肠杆菌在该培养基中形成特定的菌落 B大肠杆菌能使培养基改变颜色C大肠杆菌菌的代谢产物与伊红美蓝结合，使菌落呈深紫色，并有金属光泽  D大肠杆菌能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活22甲、乙、丙是三种微生物，下表I、是用

10、来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ）粉状硫 10gK2HPO4 4gFeS04 0.5g 蔗糖 10g(NH4)2SO4 0.4g H20 100ml MgS04 9.25g CaCl2 0.5gI+十+A、甲、乙、丙都是异养微生物 B、甲、乙都足自养微生物、丙是异养微生物 C、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物 D、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物二、非选择题：本题包括6小题，共50分。54某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一

11、起。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：主要步骤：制备两种培养基：一种是 培养基，另一种 的培养基。分别分成两份，依次标上A，A和B，B，备用。分别向A、B培养基中接种 。接种后，放在恒温箱中培养34天。分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A、B培养基中。 接种后，把A、B培养基放入恒温箱中培养34天。回答问题：在步骤中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有 、 。第两个步骤的目的是 。54.无氮加青霉素混合菌培养基高压蒸气灭菌接种环在酒精灯火焰上灭菌接种过程在酒精灯火焰附近进行获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌55空气中的含菌量是衡量空

12、气质量的指标之一，为了检测学校生物实验室、教室、校长室、小树林4个地方空气中的含菌情况，请利用所提供条件设计一个实验。（1）、请用100ml量筒、4副培养皿、煮沸过的 洗碗水，设计取样的实验步骤。（2）、请用4支试管、滴管、0.01%亚甲基蓝溶液，设计检测的实验步骤。（3）、实验结果的预测和分析。（4）、你所设计的实验检测到的是_细菌的相对数量。55.(1)用量筒取等量的煮沸过的洗碗水,分别倒入4只培养皿中； 分别将以上4只培养皿露置于4个场所； 静置13天后，同时加盖取回（2）分别取等量放置过的洗碗水放入4支试管中 在每只试管内滴加510滴0.01%亚甲基蓝溶液，置于温暖处（3）根据4支试管

13、内洗碗水在相同时间内褪色的程度，来判定空气中的含菌量，其中褪色程度最大的，空气中含菌量相对最高；褪色程度最小的，空气中含菌量最低。 （4）好氧性7（2009·宁夏理综，40）（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑、和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。   （2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌处理，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是；操作者的双手需要进行清洗和；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能。 

14、0; （3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。   （4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的。   （5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。   （6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。7（1）温度pH易培养生活周期短 （2）干热灭菌法消毒损伤DNA的结构（3）比例合适 （4）鉴定（或分类） （5）将未接种

15、的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生（6）灭菌9从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种

16、方法是，获得图B效果的接种方法是。（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行，接种前要进行，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。 9（1）海滩等高盐（2）以淀粉为唯一碳源高温（3）稀释涂布平板法平板划线法（4）pH调整高压蒸汽灭菌无菌6某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题：培养基中加入化合物A的目的是筛选 ，这种培养基属于 培养基。“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ，实验需要振荡培

17、养，由此推测“目的菌”的代谢类型是 。培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量 的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量 。转为固体培养时，常采用 的方法接种，获得单菌落后继续筛选。实验结束时，使用过的培养基应该进行 处理后，才能倒掉。答案： 目的菌 选择 化合物A 异养需氧型 减少 增加 划线 灭菌1富集培养的微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件，是仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多

18、个方面进行选择，如温度、PH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。利用富集培养技术从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物请分析回答：(1)本实验所需培养基为 碳源为 。(2)实验原理是 。(3)重复培养的目的是 。(4)的菌落中大部分是降解 微生物。(5)为 组，为 组，设置的目的是 。(6)采用 法，接种到的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是 。1.答案： （1）选择培养基 对羟基苯甲酸 （2）利用以对羟基苯甲酸为唯一的碳源选择培养基，经富集培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物 （

19、3）增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例 （4）对羟基苯甲酸 （5）对照 实验 说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物 （6）单细胞挑取 接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物24. （山东卷，理综，34）科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的 、大小及形状不同，在电场中的 不同而实现分离。可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供 和 。分别在加入和未

20、加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的 ，确定该蛋白质的抗菌效果。细菌培养常用的接种方法有 和 。实验结束后，对使用过的培养基应进行 处理。5.（上海卷，理综，39）39.（9分）氯苯化合物是重要的有机化工原料，原因不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案（图1）筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培养基配方如表1。（1）配制号固体培养基时，除添加号液体培养基成分外，还应添加1%的_。（2）培养基配制时，灭菌与调PH的先后顺序是_。（3）从用途上来说，号培养基和号培养基分别属于_培养基和_培养基。在号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_。（4）

21、在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_。（5）将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的号培养液中培养，得到生长曲线（如图2）。从图2可知SP1菌在_培养条件下最早停止生长，其原因是_。5.答案：（1）琼脂（2）先调PH，后灭菌（3）通用 选择 硝酸铵（4）芽孢（5）20mg/L氯苯 硝酸最早耗尽有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和作用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功的筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。(1)培养基中加入的化合物A是_，为微生物的

22、生长提供_，这种培养基属于_培养基。(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入_。(3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。为获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是_，操作时采用_灭菌的方法；还可用_的方法接种。(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是_。答案(1)纤维素碳源选择(2)刚果红(3)接种环灼烧稀释涂布平板(4)防止造成环境污染分解物质的总量020406080酶的活性020406080C酶的活性020406080B酶的活性020406080A酶的活性020406080D29右图表示某有机物加入某种酶后在080的环境中，有机物的分解总量与温度的关