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1、八正合剂抗感染作用及其对小鼠免疫功能的影响(1)作者:刘如意,任会勋,吴捷,董颖颖【关键词】八正合剂 摘要:目的探讨八正合剂治疗泌尿系统感染性疾病的药 理学作用及其对小鼠免疫功能的影响。方法将大肠杆菌注入 小鼠膀胱后观察药物对细菌上行感染肾脏的抑制作用,同时检测其对小鼠免疫功能的影响。结果八正合剂灌胃给药可显 著降低大肠杆菌上行感染肾脏的带菌剖面百分率 ED50 为 g/kg , 95%可信限为 /kg ,显著提高小鼠巨噬细胞吞噬率和 吞噬指数,对体液免疫和细胞免疫影响不大。结论八正合剂 治疗泌尿系统感染性疾病的作用机制主要与其增强巨噬细 胞吞噬功能、清除尿路细菌有关。关键词:八正合剂;抗感染
2、;小鼠;免疫AntiinfectionactionofBazhengmixtureandeffectsofBMonimmunefunctioninmiceABSTRACT:ObjectiveToexplorethepharmacologicalactionofBazhengmixtureoninfectionsdiseaseofurinarysystemandeffectsofBMonimmunefunctioninmice.MethodsAfterwasinjectedintobladderofmice,thekidneyswereexaminedfortheantiinfectionact
3、ionofBMonascendinginfection;andtheeffectsofBMonimmunefunctionofmiceweretested.ResultsBMigremarkablydecreasedthepercentageofkedneysinfectionsareacausedbyascendinginfectionofED50wasg/kgandthe95%CLwas/kg;BMwasalsofoundeffectiveinincreasingtherateofcarbonparticleclearanceandtheindexofcarbonparticleclear
4、ance,butBMhadnosignificanteffectsonbodyfluidimmunityandcellimmunityintestformice.ConclusionThemechanismofBMintreatinginfectionsdiseaseofurinarysystemaremainlyassociatedwiththeincreasingrateofcarbonparticleclearance,andwithbacteriaclearanceinurinarysystem.KEYWORDS:Bazhengmixture;antiinfection;mice;im
5、munity 八正合剂源于宋朝“太平惠民和剂局方”中的八正散 由扁蓄、瞿麦、车前子、大黄、木通、滑石、栀子、甘草等 8 味中药经现代制药技术加工而成,具有清热、通淋和利尿 功效 1 。近年来,临床上采用该方对各种泌尿生殖系统感 染性疾病进行了大量的辩证施治 , 均显示出良好的疗效 然而对其药理学作用基础尚缺少明确的认识。本研究将大肠 杆菌注入小鼠膀胱后观察药物对细菌上行感染肾脏的抑制 作用 ; 同时检测其对小鼠免疫功能的影响,旨在阐明该药治 疗泌尿系感染性疾病的药理学作用机制。1 材料与方法23 ,材料药品和试剂八正合剂 , 每毫升含生药,陕西中医学院制 药厂生产; 硫酸庆大霉素注射剂, 陕西
6、西安妇幼制药厂生产; MTT ConA均为美国 Sigma 公司产品。动物 ICR 品系小鼠,雌性,体质量 g;绵羊、鸡等动物 均由西安交通大学医学院实验动物中心提供。大肠杆菌 O111B4 标准株由北京生物制品研究所提供。方法小鼠膀胱上行性肾感染模型制备 45及分组取 ICR 品系 小鼠90 只, 随机分为正常对照组、肾感染模型组、庆大霉素 40mg/kg 对照组、八正合剂 5、 7、 11 、 14、 21 、 28g/kg 剂量 组,每组10 只。各组小鼠禁食 24h 后,乙醚吸入麻醉,碘 酒和酒精分别消毒尿道口,用注射器抽取大肠杆菌菌液,插 入尿道,进入膀胱后注入菌液 , 结扎尿道口
7、2-4h 以防菌液外 漏,并继续禁水 4h。第 2 天开始给药, 庆大霉素组每天肌肉 注射 2次, 间隔 10h, 每次 20mg/kg ;正常对照组和肾感染 模型组用蒸馏水 25mL/kg 灌胃,八正合剂各剂量组按上述剂 量灌胃,每天 1 次,连续 5d。感染后第 5 天,脱颈椎处死小 鼠,无菌条件下取双侧肾脏 , 纵切后将剖面盖印于平皿琼脂 培养基上,37C培养 18h 后,记录有活菌存在的肾剖面数, 求出各组小鼠肾脏带菌剖面百分率。小鼠免疫功能检测6腹腔巨噬细胞吞噬功能:上述 各组小鼠于最后 1 次给药后 1h,每只鼠腹腔注射 5%鸟红细 胞混悬液 /只, 4h 后处死小鼠,测腹腔巨噬细
8、胞的吞噬百分 率和吞噬指数。溶血素形成:小鼠动物数、分组、给药均 同前,于给药第 1 天,每鼠腹腔注射 5%鸡红细胞混悬液,进 行免疫,于最后 1 次给药后2h,小鼠眼眶取血分离血清,测 溶血素形成。溶血空斑形成:小鼠动物数、分组、给药及 免疫均同前,于最后 1 次给药后 2h,将小鼠脱颈椎处死,解 剖取出脾脏,将两个小鼠脾脏放在一起匀浆,测溶血空斑形 成。淋巴细胞转化:小鼠动物数、分组、给药均同前,于 灌药的第 1 天和第 3 天,每只鼠肌肉注射 PHA10mg/kg 于第 5天给药后 2h,小鼠剪尾取血,涂片,瑞氏染液染色,油镜 下观察外周血淋巴细胞转化率。统计学方法采用软件处理数据,计数
9、资料用 Fisher 直 接概率法分析,计量资料用 t 检验。2 结果 八正合剂对小鼠膀胱上行性肾感染大肠杆菌的影响见表 1。与模型组比较,八正合剂各剂量组小鼠带菌肾剖面百分 率均低于肾感染模型组,其中 7-28g/kg 剂量组与肾感染模 型组比较有非常显著性差异。经 Bliss 法计算,八正合剂的 ED50 为 g/kg,95 涮信限为/kg,相关系数 r=。八正合剂对感染小鼠免疫功能的影响八正合剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响见表2。表 1 八正合剂对小鼠膀胱上行性肾感染大肠杆菌的影响 (略)Table1TheeffectsofBazhengmixtureonmousebladderascendingkidneyinfection表 2 八正合剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 (略)Table2TheeffectsofBMonmouseabdominalcavitymacr
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