动物生理实验-白细胞计数

1、动物生理学实验动物生理学实验2021-11-212实验一实验一 白细胞的计数白细胞的计数【实验目的实验目的】2021-11-213【基本原理基本原理】2021-11-214【方法步骤方法步骤】2021-11-215 用移液管吸取用移液管吸取3.98mL的白细胞稀释液至试管中备用；的白细胞稀释液至试管中备用； 用酒精棉球消毒采血部位，干燥后，用消毒过的采血针刺破用酒精棉球消毒采血部位，干燥后，用消毒过的采血针刺破皮肤，使血液流出；皮肤，使血液流出； 第一滴血用第一滴血用干棉球干棉球拭去不要，当第二滴血积聚较多时，用微拭去不要，当第二滴血积聚较多时，用微量毛细吸血管量毛细吸血管准确准确吸取血液吸取

2、血液20L，擦净管外粘附的血液，然，擦净管外粘附的血液，然后将血液轻轻吹入盛有稀释液的试管底部，并用上清液清洗后将血液轻轻吹入盛有稀释液的试管底部，并用上清液清洗吸血管吸血管23次，轻轻摇动试管使血液与稀释液充分混匀。次，轻轻摇动试管使血液与稀释液充分混匀。2021-11-216 计数板为一长方形厚玻璃板，中间有四条平行槽沟，在中间的两计数板为一长方形厚玻璃板，中间有四条平行槽沟，在中间的两条槽沟之间，有一条横槽沟，使其构成两个长方形的平台；条槽沟之间，有一条横槽沟，使其构成两个长方形的平台； 平台币整个玻璃板的平面低平台币整个玻璃板的平面低0.1mm，当放上一块盖玻片后，平台，当放上一块盖玻

3、片后，平台与盖玻片之间的距离为与盖玻片之间的距离为0.1mm； 两平台中心部分各有一个计数室，划分为两平台中心部分各有一个计数室，划分为9个大方格，每个大方格个大方格，每个大方格面积为面积为1mm2，体积为，体积为0.1mm3，四角的大方格又分为，四角的大方格又分为16个中方格，个中方格，用于白细胞计数。用于白细胞计数。 计数室只能用自来水和蒸馏水相继冲洗，然后用丝绢轻轻拭净，计数室只能用自来水和蒸馏水相继冲洗，然后用丝绢轻轻拭净，不能用酒精和乙醚洗涤。洗净后在低倍镜下熟悉计数室的构造。不能用酒精和乙醚洗涤。洗净后在低倍镜下熟悉计数室的构造。2021-11-217【方法步骤方法步骤】2021-

4、11-218 将计数室上的盖玻片放妥并置于显微镜上，用洁净的玻璃棒蘸取将计数室上的盖玻片放妥并置于显微镜上，用洁净的玻璃棒蘸取少量已稀释并混匀的血细胞悬液，在计数室和盖玻片交界处一次少量已稀释并混匀的血细胞悬液，在计数室和盖玻片交界处一次性滴入计数室，使之灌满，滴入计数室的血细胞悬液不得过多或性滴入计数室，使之灌满，滴入计数室的血细胞悬液不得过多或过少；过少； 静置静置23min待血细胞下沉；待血细胞下沉； 在低倍镜下检查白细胞分布是否均匀，在低倍镜下检查白细胞分布是否均匀， 之后计数计数室四角的之后计数计数室四角的4个大方格中所有的白细胞总数。个大方格中所有的白细胞总数。【方法步骤方法步骤】

5、2021-11-219 加加20L血液于血液于0.38mL白细胞稀释液中，血液被稀释白细胞稀释液中，血液被稀释20倍。共计数倍。共计数4个大方格的白细胞总数，一个大方格的容个大方格的白细胞总数，一个大方格的容积积,0.1mm3，4个方格的总容积为个方格的总容积为0.4mm3； 白细胞数白细胞数/mm3=4个大方格的细胞总数个大方格的细胞总数0.420。 1 L=1106mm3【注意事项注意事项】2021-11-2110l采血部位消毒后，涂一层凡士林可以使血液成滴便于吸收。采血部位消毒后，涂一层凡士林可以使血液成滴便于吸收。l吸血时将吸管下端开口放入血液中部，尽量利用毛细管现象使血液吸血时将吸管

6、下端开口放入血液中部，尽量利用毛细管现象使血液自动进入吸管内。血液加入试管后，须充分摇匀，动作要轻，避免自动进入吸管内。血液加入试管后，须充分摇匀，动作要轻，避免出现气泡和破坏血细胞。出现气泡和破坏血细胞。l细胞悬液滴入计数室的液量要适当。过多则混悬液溢出并流入两侧细胞悬液滴入计数室的液量要适当。过多则混悬液溢出并流入两侧深槽内，使盖玻片浮起，导致计数不准。滴入量过少则不能充满计深槽内，使盖玻片浮起，导致计数不准。滴入量过少则不能充满计数室，反复充液可能造成计数室内有气泡，影响计数室体积，此时数室，反复充液可能造成计数室内有气泡，影响计数室体积，此时应洗净计数板，干燥后重做。应洗净计数板，干燥

7、后重做。l计数室内细胞分布要均匀。如果发现各大格的白细胞数目相差计数室内细胞分布要均匀。如果发现各大格的白细胞数目相差8个以个以上，表示血细胞分布不均匀，应重做。上，表示血细胞分布不均匀，应重做。l所用吸管、试管、计数板等必须十分干净，各种稀释液严防混入杂所用吸管、试管、计数板等必须十分干净，各种稀释液严防混入杂质或有细菌生长。计数板等用过之后，必须立即洗涤干净。质或有细菌生长。计数板等用过之后，必须立即洗涤干净。【实验报告书写要求实验报告书写要求】2021-11-21111.题目题目2.实验目的实验目的3.实验原理实验原理4.材料设备材料设备5.方法步骤方法步骤6.实验结果实验结果7.思考题思考题（1）操作过程中，哪些因素可能影响计数的准确性？）操作过程中，哪些因素