《索氏提取法》PPT课件

1、粗脂肪的提取和定量测定索粗脂肪的提取和定量测定索氏提取法氏提取法 一、实验目的一、实验目的 l掌握用索氏提取法测定粗脂肪含量的原理及操掌握用索氏提取法测定粗脂肪含量的原理及操作。熟习分量分析的根本步骤。作。熟习分量分析的根本步骤。二、实验原理二、实验原理l 脂肪是丙三醇甘油和脂肪酸结合成的脂类化合物，能溶于脂溶性有机溶剂。脂肪是丙三醇甘油和脂肪酸结合成的脂类化合物，能溶于脂溶性有机溶剂。 l 本实验利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性，用脂溶性溶剂将脂肪提取出来，借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进展，通常运用的脂溶性溶剂为乙醚，或沸点为本实验利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性，用脂

2、溶性溶剂将脂肪提取出来，借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进展，通常运用的脂溶性溶剂为乙醚，或沸点为3060的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外，还有游的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外，还有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故称为离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故称为“粗脂肪。同时，样品中结合形状的脂类主要是脂蛋白不能直接提取出来，所以该法又称为游离脂类定量测定法。粗脂肪。同时，样品中结合形状的脂类主要是脂蛋白不能直接提取出来，所以该法又称为游离脂类定量测定法。 索氏抽提法测定脂肪最大的缺乏是耗时索氏抽提法测定脂肪最大的缺乏是耗时过长，如能将样品

3、先回流过长，如能将样品先回流1 12 2次，然后次，然后浸泡在溶剂中过夜；次日再继续抽提，浸泡在溶剂中过夜；次日再继续抽提，那么可明显提高提取率。那么可明显提高提取率。 三、实验器材三、实验器材 1.BS210S型电子天平：参见左图北京赛多利斯天平公司消费，公用。操作指南：调整程度度，插上电源，启动“ON/OFF开关，按一下回零挡“TARE，使屏幕上显示0.0000。推开玻璃门，悄然将样品置于称量盘上，关上玻璃门，待屏幕上显示的数字稳定后记录下来，即为样品的分量g。留意，每次称量前都必需按一下回零挡“TARE，使屏幕上显示0.0000。称量室内尤其是称量盘上必需坚持清洁、枯燥；假设有药品撒落，

4、立刻用软毛刷清理干净。 2.HH-2型数显恒温水浴锅型数显恒温水浴锅 3.101C-3型电热鼓风枯燥箱型电热鼓风枯燥箱 l操作指南：插上电源插头，按下绿按钮电源开关操作指南：插上电源插头，按下绿按钮电源开关和黄按钮鼓风开关，将和黄按钮鼓风开关，将“设定设定/ /丈量按钮置于丈量按钮置于设定挡，调理设定挡，调理“温度设定旋钮，使显示器中的数字温度设定旋钮，使显示器中的数字为所需的温度，再将为所需的温度，再将“设定设定/ /丈量按钮置于丈量挡，丈量按钮置于丈量挡，此时显示器中的数字表示烘箱内的实践温度。将加热此时显示器中的数字表示烘箱内的实践温度。将加热旋钮一共有旋钮一共有3 3个打到适当的挡位，

5、烘箱开场加热。个打到适当的挡位，烘箱开场加热。此时绿灯亮，当温度到达所设定值时，红灯亮，烘箱此时绿灯亮，当温度到达所设定值时，红灯亮，烘箱停顿加热。以后烘箱会不断经过不断的加热停顿加热。以后烘箱会不断经过不断的加热- -停顿过停顿过程来坚持恒温，红绿灯也会相应地交替闪亮。请留意，程来坚持恒温，红绿灯也会相应地交替闪亮。请留意，本实验由于设定温度为本实验由于设定温度为120120，故在取出被烘干物品，故在取出被烘干物品时，请戴上手套。时，请戴上手套。 4.索氏提取仪索氏提取仪l由冷凝管、抽提管和平底烧瓶三个部件组成，经过规范磨口相对接。 l搭建安装：用铁架台、只十字夹、只龙爪、搭建安装：用铁架台

6、、只十字夹、只龙爪、根乳胶管和套索氏提取仪来搭建安装。留根乳胶管和套索氏提取仪来搭建安装。留意按照由下而上的顺序来搭建，参见图意按照由下而上的顺序来搭建，参见图2-72-7图图2-112-11。固定点分别是平底烧瓶的颈部和提取。固定点分别是平底烧瓶的颈部和提取管的颈部，索氏提取仪的高度以平底烧瓶的瓶管的颈部，索氏提取仪的高度以平底烧瓶的瓶颈略高于恒温水浴锅的液面为宜。留意：用龙颈略高于恒温水浴锅的液面为宜。留意：用龙爪夹玻璃仪器时，要先用手找好觉得，不能太爪夹玻璃仪器时，要先用手找好觉得，不能太紧否那么会夹破也不能太松否那么会打紧否那么会夹破也不能太松否那么会打滑而导致索氏提取仪的规范磨口接口

7、漏气。滑而导致索氏提取仪的规范磨口接口漏气。 5.其它器材：其它器材： l不锈钢镊子、药勺、滤纸、铁架台、十字夹、龙爪、手套、乳胶管。 四、实验试剂四、实验试剂l称取样品的分量根据资料中脂肪的含量称取样品的分量根据资料中脂肪的含量而定参考表而定参考表1-11-1。通常脂肪含量在。通常脂肪含量在10%10%以下的，称取样品以下的，称取样品101020g20g。脂肪含。脂肪含量为量为50%50%60%60%的，那么称取样品的，那么称取样品2 24g4g。 表表1-11-1几种干的植物种子和种仁中油脂的百分含量几种干的植物种子和种仁中油脂的百分含量 样品样品 含油量（含油量（% %） 样品样品 含油

8、量（含油量（% %） 向日葵种籽向日葵种籽 向日葵种仁向日葵种仁 蓖麻种籽蓖麻种籽 蓖麻种仁蓖麻种仁 芝麻种籽芝麻种籽 油菜种籽油菜种籽 花生种仁花生种仁 23.545.0 40.067.8 45.158.5 50.772.0 46.261.0 41.142.9 40.260.7 大豆种籽大豆种籽 油桐种仁油桐种仁 玉米谷粒玉米谷粒 小麦谷粒小麦谷粒 稻子谷粒稻子谷粒 豌豆种籽豌豆种籽10.025.0 47.868.9 3.09.0 1.62.6 1.32.4 0.71.9l将样品在将样品在8080100100电热鼓风枯燥箱内烘去电热鼓风枯燥箱内烘去水分，普通烘水分，普通烘4h4h，烘干时要防

9、止过热。样品颗，烘干时要防止过热。样品颗粒不宜太大，普通要在研钵中研碎样品。样品粒不宜太大，普通要在研钵中研碎样品。样品假设是液体，应将一定体积的样品滴在滤纸上，假设是液体，应将一定体积的样品滴在滤纸上，在在60608080电热鼓风枯燥箱内烘干后，再进电热鼓风枯燥箱内烘干后，再进展实验。展实验。 实验试剂实验试剂 l. .花生仁。花生仁。 . .石油醚：石油醚：C.P.C.P.，沸程，沸程30306060。五、实验操作五、实验操作l预备任务：将恒温水浴锅的水温事先加热预备任务：将恒温水浴锅的水温事先加热8080。务必保证提取管和烧。务必保证提取管和烧瓶内枯燥、干净；假设否，将其洗净并置于枯燥箱

10、内瓶内枯燥、干净；假设否，将其洗净并置于枯燥箱内120120烘干。烘干。 l折滤纸斗：取一张折滤纸斗：取一张11cm11cm的滤纸，折成筒状，再将其一端折起来封死，便的滤纸，折成筒状，再将其一端折起来封死，便做成了滤纸斗。做成了滤纸斗。l称样：先将数粒花生仁去皮，在碾钵中用碾锤彻底捣碎作为实验样品。参称样：先将数粒花生仁去皮，在碾钵中用碾锤彻底捣碎作为实验样品。参照实验设备和器材，将滤纸斗在电子天平上称重，然后用药勺取勺照实验设备和器材，将滤纸斗在电子天平上称重，然后用药勺取勺约约2g2g样品装入滤纸斗中，把滤纸斗的开口处折起来封死；防止样品泄样品装入滤纸斗中，把滤纸斗的开口处折起来封死；防止

11、样品泄出滤纸斗。调整滤纸斗的高度，使其放在抽提管中时略低于虹吸管的上弯出滤纸斗。调整滤纸斗的高度，使其放在抽提管中时略低于虹吸管的上弯头处。将装好样品的滤纸斗放在电子天平上称重，两质量之差即为样品的头处。将装好样品的滤纸斗放在电子天平上称重，两质量之差即为样品的质量。质量。 提取：将索氏提取仪按照图提取：将索氏提取仪按照图2-72-7图图2-112-11所示，从下至上安装。首先安所示，从下至上安装。首先安装好烧瓶，并调整其高度，使其刚好能浸入水浴锅中的水中。将安装装好烧瓶，并调整其高度，使其刚好能浸入水浴锅中的水中。将安装从水浴锅的水中取出，继续安装提取管，把装有样品的滤纸斗放入提取从水浴锅的

12、水中取出，继续安装提取管，把装有样品的滤纸斗放入提取管内，向提取管中渐渐倒入石油醚直至液面到达虹吸管上弯头部，正好管内，向提取管中渐渐倒入石油醚直至液面到达虹吸管上弯头部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入石油醚，使其液面到达第一次液面的一半。虹吸一次；再向提取管中倒入石油醚，使其液面到达第一次液面的一半。用乳胶管将冷凝管与自来水管相连，将冷凝管安装到提取管上，检查一用乳胶管将冷凝管与自来水管相连，将冷凝管安装到提取管上，检查一下，确保一切接口均对接完好不漏气，不打滑。悄然翻开自来水下，确保一切接口均对接完好不漏气，不打滑。悄然翻开自来水冷凝用，将索氏提取仪整个安装放入恒温水浴锅中加热提取水温冷凝

13、用，将索氏提取仪整个安装放入恒温水浴锅中加热提取水温8080左右，请观看软件中的视频左右，请观看软件中的视频 。提取时间。提取时间2 24h4h，约虹吸，约虹吸2020次以上，记录每次虹吸所需的时间和虹吸次数。附注：假次以上，记录每次虹吸所需的时间和虹吸次数。附注：假设要将样品的粗脂提取完全，提取时间至少为设要将样品的粗脂提取完全，提取时间至少为12h12h以上。由于实验时间以上。由于实验时间的限制，我们的提取率只能到达的限制，我们的提取率只能到达8080左右。左右。 回收石油醚：提取回收石油醚：提取2h2h后，当石油醚在提取管中的后，当石油醚在提取管中的液面即将到达虹吸管的上弯头处时，从水浴

14、锅中液面即将到达虹吸管的上弯头处时，从水浴锅中取出索氏提取仪安装，室温冷却取出索氏提取仪安装，室温冷却5 510min10min；取下；取下平底烧瓶，将提取管的下端口插入回收瓶中，倾平底烧瓶，将提取管的下端口插入回收瓶中，倾斜安装，提取管中的石油醚会虹吸而流入回收瓶斜安装，提取管中的石油醚会虹吸而流入回收瓶中，到达回收的目的。再装上平底烧瓶，继续放中，到达回收的目的。再装上平底烧瓶，继续放入恒温水浴锅中加热直至冷凝管下端无石油醚滴入恒温水浴锅中加热直至冷凝管下端无石油醚滴下，阐明平底烧瓶中的石油醚曾经蒸干。留意：下，阐明平底烧瓶中的石油醚曾经蒸干。留意：必需蒸干后才干放入枯燥箱烘干，否那么会引

15、起必需蒸干后才干放入枯燥箱烘干，否那么会引起火灾。取下平底烧瓶，回收提取管中的石油醚。火灾。取下平底烧瓶，回收提取管中的石油醚。 称量粗脂质量：将平底烧瓶放入称量粗脂质量：将平底烧瓶放入120120的电热鼓的电热鼓风枯燥箱中烘风枯燥箱中烘15min15min，取出冷却后称重须戴手，取出冷却后称重须戴手套，以免烫伤。再将平底烧瓶用洗涤剂洗净，套，以免烫伤。再将平底烧瓶用洗涤剂洗净，于于120120的电热鼓风枯燥箱中烘干约的电热鼓风枯燥箱中烘干约15min15min，取出冷却后称重，两者的质量之差就是粗脂的质取出冷却后称重，两者的质量之差就是粗脂的质量。量。 l 清洁清洁 从提取管中取出滤纸斗，清洗提取管，从提取管中取出滤纸斗，清洗提取管，整理好桌面上的仪器和试剂，并留意清洁本人整理好桌面上的仪器和试剂，并留意清洁本人的操作台，请教师验收，实验报告当场交给教的操作台，请教师验收，实验报告当场交给教师。师。 l 计算计算 样品粗脂的含量样品粗脂的含量%=粗脂的质量粗脂的质量/样品