响应曲面法优化人参总皂苷动态连续循环提取工艺

1、 中药学院本科毕业论文（设计）题目： 响应曲面法优化人参总皂苷 动态连续循环提取工艺年级专业 2009级制药工程学 号 2009033194姓 名 赵瑜指导教师 吴庆光学历职称 博士/教授 教师单位 中药学院中药学教研室填表日期 2012年2月16日广州中医药大学中药学院2013届本科生毕业论文广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学术论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人或集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本

2、人承担。学位论文作者签名： 年 月 日- 23 - 目录目录响应曲面法优化人参总皂苷动态连续循环提取工艺- 2 -前言- 4 -研究部分- 5 -1 仪器与试药- 5 -1.1仪器- 5 -1.2试药- 5 -2方法与结果- 5 -2.1药材采集与预处理- 5 -2.2人参总皂苷的含量测定- 6 -2.2.1对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Re对照品适量，置10ml容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，即得0.24mg/ml对照品溶液。- 6 -2.2.2供试品溶液的制备及测定- 6 -2.2.3标准曲线的绘制- 6 -2.3连续回流提取工艺- 7 -2.3.1提取测定方法- 7 -2.3.1.1供试

3、品溶液的制备- 7 -2.3.1.2测定- 7 -2.3.2提取条件的单因素实验- 7 -2.3.2.1乙醇体积分数对人参总皂苷转移率的影响- 7 -2.3.2.2药材粒径对人参总皂苷转移率的影响- 8 -2.3.2.3溶剂流速对人参总皂苷转移率的影响- 9 -2.3.2.4浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响- 10 -2.3.3响应曲面分析实验- 11 -2.3.3.1响应曲面分析实验设计- 11 -2.3.3.2模型的建立与显著性检验- 11 -2.3.3.3拟合模型的建立- 13 -2.3.3.4响应面分析- 14 -2.3.3.5响应曲面法验证实验- 20 -3结论- 21 -4讨论-

4、21 -4.1采用动态连续循环提取的特点- 21 -4.2本工艺与其他文献报道工艺的优势- 21 -4.3响应曲面实验中药材粒径水平的设计及其指标- 22 -4.4验证实验的工艺条件- 22 -【参考文献】- 22 -致谢- 23 -响应曲面法优化人参总皂苷动态连续循环提取工艺作者：赵瑜（2009级制药工程专业 2009033194）指导老师：吴庆光（广州中医药大学中药学院中药学教研室）【摘要】：目的：优化人参总皂苷提取工艺。方法：以人参总皂苷转移率为指标，在单因素实验考察乙醇体积分数、药材粒径、溶剂流速、浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响的基础上，通过响应曲面法对人参总皂苷动态连续循环提取工艺

5、进行优化。结果：人参总皂苷的含量与所考察3个因素之间关系符合二次模型。优化后人参总皂苷的最佳提取工艺为：乙醇体积分数为78%，超微粉碎时间10min，溶剂流速24ml/min，浓缩温度65。人参总皂苷转移率为85.64%。结论：本方法科学、合理、可行，对人参总皂苷提取工艺应用于实际生产有重要的参考价值。【关键词】：人参总皂苷；动态连续循环提取；响应曲面法；转移率Optimization of Dynamic Continuous Circumfluence Extraction Technology of Total Saponin in Ginseng Fibrous Root by Res

6、ponse Surface MethodologyGraduate: ZhaoYuSupervisor: Wu Qingguang【Abstract】Objective: To optimize the extraction technology of total saponin in ginseng fibrous root.Method: By single factor experiment to investigate the impact of total saponin transfer rate in ginseng fibrous root about alcohol conc

7、entration, particle size of the medicinal materials ,solvent velocity , concentrate temperature and to optimize the extraction technology of total saponin in ginseng fibrous root by response surface methodology.Result: the relation fitted quadratic model between content of total saponin in fibrous r

8、oot of panax ginseng and 3 factors investigatedThe optimized extraction technology was as follows: alcohol concentration: 78%, particle size of the medicinal materials: Ultramicro -pulverized powder pulverized for 10 min, solvent velocity: 24ml/min, concentrate temperature: 65.The transfer rate of t

9、otal saponin in ginseng fibrous root was 85.64%. Conclusion: This method is scientific, reasonable and feasible, the ginseng fibrous root of total saponin extraction technology applied in actual production has important reference value.【Key word】Total saponins of ginseng fibrous root; Continuous cir

10、cumfluence extraction; Response surface methodology; Transfer rate前言人参为五加科植物人参Panaxginseng C.AMey的干燥根，具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智的功效1。大量药学研究表明，皂苷类成分为其发挥临床疗效的主要化学成分之一，近年来，人们围绕着人参皂苷的提取、分离等方面展开了深入细致的研究。因而在大生产中寻找一种快速、安全、简便、成本低、提取纯度高,而又不破坏成分的皂苷提取纯化工艺方法已成为实际生产中的关键问题。研究表明，人参皂苷提取工艺考察多采用水煎法、温浸法、乙醇回流法、超声法，而以超声

11、和回流提取效率相对较高2，而对于具体方法中一些影响皂苷提取率的因素如温度、药材粒径等研究相对较少，同时对于实验设计多以单因素和正交试验为主，前者不能顾及不同因素之间的交互作用，后者则实验工作量大，难免加大实验误差，鉴于此我们以人参总皂苷含量为评价指标,通过动态连续循环提取装置提取皂苷，本研究利用响应曲面法优选最佳提取工艺，为人参皂苷工业化生产提供科学依据。动态连续循环提取工艺是一种提取与浓缩同步进行的提取方法，提取液连续输送到浓缩装置中，回收的提取溶剂连续添加到提取装置中，药材长时间浸泡在热溶剂中，新提取溶剂不断补充，溶质高速溶出，提取时间短，能耗低，溶剂循环使用，减少溶剂的消耗率，同时有利于

12、有效成分的完全溶出。此工艺克服了索氏提取法中提取液长时间加热，药材与溶剂接触时间不足等缺点。可提高中药有效成分进行提取的提取效率，减少溶剂使用量和提取时间，是一项有前途的中药提取技术。响应曲面法是数学方法和统计方法结合的产物，用于受多个变量影响的问题进行建模和分析，采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系，通过对回归方程的分析来寻求最优工艺参数，是一种优化过程的综合方法。通过计算机运算，可以达到建立连续变量曲面模型，对影响过程的因子及其交互作用进行评价。响应曲面法的优点有：经济性原则，可以使用部分因子设计或特殊反应曲面设计，以较少的实验成本及时间获得不错且有效的资讯；深入探讨因子间

13、交互作用影响，由分析与配适模式来研究因子间的交互作用，并且进而讨论多因子对反应变量影响的程度；获得最优化的条件，根据数学理论求得最优的实验情况，同时利用配适反应方程式绘出模式三度空间曲面图与等高线图，观察并分析出最优的操作条件；减少模拟时间，获得模拟独立变量与反应变量关系之数学模型，借此将实验次数及时间降低。本文以人参总皂苷含量为评价指标,通过动态连续循环提取装置提取皂苷，本研究利用响应曲面法优选最佳提取工艺，为人参皂苷工业化生产提供科学依据。研究部分1 仪器与试药1.1 仪器台式连续粉碎机（DF-25，浙江温岭市林大机械有限公司）；细胞破壁超微粉碎机（WKZ-4，山东处青州市精诚医药装备有限

14、公司）；紫外分光光度计 (Bluestar A 北京莱伯泰科仪器有限公司)；分析天平（万分之一，北京赛多利斯天平有限公司）；分析天平（十万分之一，SARTORIUSA BS110S型，香港佳立国际有限公司，汕头市能手电器有限公司，慈溪市劳特电气有限公司联营制造）；旋转蒸发器（RE-52A，巩义市予华仪器有限责任公司）；循环水真空泵（SHZ-(B)，巩义市予华仪器有限责任公司）；水浴锅（HH-S型，巩义市予华仪器有限责任公司）；1.2 试药人参皂苷Re对照品(中国食品药品检定研究院，批号：Rg1: MUST-11041201)；香草醛（批号：20100315，分析纯，天津市百世化工有限公司)；高

15、氯酸（批号：20100904，分析纯，天津市百世化工有限公司）；冰醋酸（批号：20090320，分析纯，天津市百世化工有限公司)；乙醇（批号：20100806，分析纯，天津市百世化工有限公司)；人参须（批号为20100824，由霸王（广州）有限公司提供，经广州中医药大学中药学院中药教研室赖小平教授鉴定为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥须根。2 方法与结果2.1 药材采集与预处理批号为20100824，由霸王（广州）有限公司提供，经广州中医药大学中药学院中药教研室赖小平教授鉴定为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥须根。样品预处

16、理：传统粉碎 人参须适量，万能粉碎机粉碎，过30目筛，得人参须粗粉，DF-15型连续粉碎机粉碎，过60目筛，得人参须细粉。超微粉碎 人参须细粉适量，分别用细胞破壁超微粉碎机5min，10min，15min，标记为1号超微粉，2号超微粉，3号超微粉。所制备的药材样品置于密封袋中保存。2.2 人参总皂苷的含量测定2.2.1 对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Re对照品适量，置10ml容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，即得0.24mg/ml对照品溶液。2.2.2 供试品溶液的制备及测定供试品溶液的制备：精密称取人参须药材0.1g，加75%乙醇50ml，加热回流1.5h，放冷，滤过，收集滤液，减压浓缩至浸膏

17、，用10倍量蒸馏水溶解，溶液置于分液漏斗中。加乙醚萃取3次（20ml/10ml/5ml），弃去乙醚层。水层加入水饱和正丁醇萃取4次（30ml/20ml/15ml/10ml），合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇至干，用甲醇分次洗涤转移至25ml量瓶中，甲醇定容，作为供试品溶液。供试品溶液的测定：精密吸取待测溶液0.3ml至刻度试管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，在60下水浴加热15min，冰水冷却10min，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，即得待测液，于555nm处测定溶液的吸光度，计算人参皂苷的含量。2.2.3 标准曲线的绘制精密吸取人参皂苷对照品溶液0.

18、1ml、0.2ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml、0.7ml、0.8ml 分别置于刻度试管中，按2.1.2项制备样品测定吸光度，以人参皂苷重量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，如下图所示。图1人参皂苷Re对照品标准曲线图结果显示人参皂苷在24.12193.0g范围内呈良好的线性关系，相关系数r为0.9996，回归方程为Y=4.997X+0.002809。2.3 连续回流提取工艺2.3.1 提取测定方法2.3.1.1 供试品溶液的制备称取批号为20100824人参须药材中粉100g，置于提取管中，加入一定体积分数的乙醇溶液1000ml，热水循环加热40min，放出300ml提

19、取液于浓缩装置中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，3h后停止回流，浓缩液定容至500ml，精密吸取5ml，回收乙醇至无醇味，用10ml蒸馏水分次洗涤，转移至分液漏斗中。加入乙醚萃取3次（25ml/20ml/20ml）弃去乙醚层。用水饱和的正丁醇溶液萃取4次（20ml/15ml/15ml/10ml），合并正丁醇萃取液，回收正丁醇至干，用甲醇分次洗涤转移至25ml量瓶中，甲醇定容。2.3.1.2 测定×100%各种制备方法下人参总皂苷的含量按“2.2.3”项下测定方定测定人参总皂苷含量，并计算人参总皂苷的转移率。各种制备方法下人参总皂苷的含量人参总皂苷转移率=2.

20、3.2 提取条件的单因素实验2.3.2.1 乙醇体积分数对人参总皂苷转移率的影响精密称定本品粉末（过三号筛）约0.1g，置圆底烧瓶中，加0%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%乙醇50ml，加热回流0.5h，按“2.2.3”项下方法制备供试品，并测定人参总皂苷的含量，计算转移率，实验结果见表1 ，图2。表1 乙醇浓度对人参总皂苷转移率的影响编号取样量（g）乙醇浓度（%）吸光度样品含量（mg/g）人参总皂苷转移率(%)11.0014 800.2465 60.53 58.67 21.0015 700.3011 70.29 68.13 31.0016 600.2576 6

21、2.51 60.59 40.9998 500.2331 58.23 56.44 51.0000 400.2150 54.97 53.29 60.9996 300.1953 51.47 49.89 71.0001 200.1843 49.47 47.95 81.0011 100.1610 45.25 43.86 91.0014 00.1361 40.78 39.53 图2乙醇体积分数对人参总皂苷转移率转移率的影响实验结果显示，当乙醇浓度为70%时，人参总皂苷的转移率最佳。2.3.2.2 药材粒径对人参总皂苷转移率的影响精密称取人参须粗粉，中粉，1号超微粉，2号超微粉，3号超微粉各0.1g，用50

22、ml70%乙醇密塞称定重量，回流提取30min，加热回流0.5h，按“2.2.3”项下方法制备供试品，并测定人参总皂苷的含量，计算转移率，实验结果见表2，图3。表2 药材粒径对人参总皂苷转移率的影响编号取样量（g）药材粒径吸光度样品含量（mg/g）人参总皂苷转移率(%)11.0009粗粉0.225156.7354.9921.0011中粗0.266564.1362.1631.0018超微粉碎5min0.347378.5376.1241.0001超微粉碎10min0.362481.3778.8751.0014超微粉碎15min0.364681.6679.15图3 药材粒径对人参总皂苷转移率的影响实

23、验结果表明，人参须超微粉总皂苷的转移率明显高于普通粉碎粉末,随着超微粉碎时间的增加, 总皂苷的转移率呈现上升趋势。2.3.2.3 溶剂流速对人参总皂苷转移率的影响称取人参须2号超微粉100g，置于提取罐中，加入一定体积分数的乙醇溶液1000ml，热水循环加热40min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，调节浓缩温度为60，补充提取罐内溶剂至1000ml，分别调节提取管溶剂流速为10ml/min，15ml/min，20ml/min，25ml/min，30ml/min，按“2.2.3”项下方法制备供试品，并测定人参总皂苷的含量，计算转移率，实验结果见表3，图4。表3 溶剂流速对人参总皂苷转移率

24、的影响样品编号样品称重（g）溶剂流速（ml/min）吸光度样品含量（mg/g）人参总皂苷转移率（%）110010 0.320573.87 71.60 210015 0.406789.31 86.57 310020 0.422292.09 89.26 410025 0.408289.58 86.83 510030 0.404188.85 86.12 图4 溶剂流速对人参总皂苷转移率的影响实验结果表明，当溶剂流速为20ml/min时，人参总皂苷的转移率最高，当溶剂流速大于20ml/min时，人参总皂苷转移率呈下降趋势。2.3.2.4 浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响称取参须药材粉末100g，置于提

25、取罐中，加入一定体积分数的乙醇溶液1000ml，热水循环加热40min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，分别调节浓缩温度至55，60，65，70，75，80,补充提取管内溶剂至1000ml，分别调节提取管溶剂流速为20ml/min，3h后停止回流，浓缩液定容至500ml，精密吸取0.5ml，按“2.2.3”项下方法制备供试品，并测定人参总皂苷的含量，计算转移率，实验结果见表4，图5。表4 浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响样品编号样品称重（g）浓缩温度（）吸光度样品含量（mg/g）人参总皂苷转移率（%）110055 0.403488.72 86.00 210060 0.408189.56

26、86.81 310065 0.409289.76 87.00 410070 0.410289.94 87.18 510075 0.411490.16 87.39 610080 0.411990.25 87.47 图5 浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响实验结果显示，浓缩温度对人参总皂苷的转移率影响不明显。2.3.3 响应曲面分析实验2.3.3.1 响应曲面分析实验设计单因素实验表明，人参须超微粉总皂苷的转移率明显高于普通粉，故工艺优化实验中均采用人参须超微粉进行，且药材粒径大小用超微粉碎时间表示。采用分析软件Design Expert 8.0建立四因素三水平Box-Behken模型进行优化设计，

27、确定人参总皂苷的最佳动态连续循环提取条件。以人参总皂苷转移率(Y)为响应值，溶剂流速（A）、乙醇体积分数(B) 、浓缩温度(C)、超微粉碎时间(D)为自变量,试验因素水平编码见表6。表6 试验因素与水平因素编码水平+10-1溶剂流速(ml/min)A102030乙醇体积分数(%)B607080浓缩温度()C556065超微粉碎时间(min)D510152.3.3.2 模型的建立与显著性检验响应曲面法优化人参总皂苷动态连续循环提取工艺实验结果见表7。利用Design Expert 8.0进行回归分析，回归模型方差分析结果见表8，模型回归方程系数及其显著性检验结果见表9。表7响应曲面分析实验结果A

28、:溶剂流速（ml/min）B:乙醇体积分数（%）C:浓缩温度()D:超微粉碎时间(min)总皂苷转移率(%)12070601082.121070551075.332080651087.94307060584.35107060575.763070601580.472060551081.38208060582.892070601082.4101070601569.7113080601084.8122070651587.3133070651084.8142060651081.3152060601581.316206060578.4173070551085.0181080601072.81930606

29、01074.5202070601082.221207055587.3222070601087.3232070551583.8242080551087.625207065583.5262080601584.4272070601087.2281070651075.6291060601069.6表8 回归模方差分析方差来源平方和SS自由度df均方和MSFp模型732.011452.2911.16< 0.0001残差65.57144.68失拟项35.32103.530.470.8501纯误差30.2547.56总值797.5828表9 模型回归方程系数显著性检验系数项平方和SS自由度df均方和M

30、SFpA732.011452.2911.16< 0.0001B253.001253.0054.02< 0.0001C95.77195.7720.450.0005D8.333×10-418.333×10-41.779×10-40.9895AB2.1712.170.460.5074AC12.60112.602.690.1232AD0.06310.0630.0130.9097BC1.1011.100.240.6351BD0.02310.0234.804×10-30.9457CD0.4210.420.0900.7683A213.32113.322.8

31、40.1138B2262.861262.8656.12< 0.0001C228.36128.366.050.0275D230.24130.246.460.0235 R2=0.9178，调正R2=0.8356，C.V.%=2.66%，P<0.05，显著，P<0.01，极显著。实验结果显示，对人参总皂苷转移率所建立的模型具有高度显著性(P< 0.0001)，失拟项p=0.8501，不显著，该模型的调正确定系数R2=0.8356，变异系数C.V.%= 2.66%，说明该模型能解释83.56%的响应值变化，模型模拟度好，实验误差小，可用预测与分析不同工艺条件对人参总皂苷转移率的

32、影响。模型一次项中A、B、C极显著，D不显著；二次项B2极显著，C2、D2显著，AB、AC、BC、BD、CD、A2不显著。2.3.3.3 拟合模型的建立Y=306.27+1.81A+2.83B-11.15C-3.77D+1.77×10-2AB-2.50×10-3AC+1.05×10-2AD+1.50×10-3BC-6.50×10-3BD+7.3×10-2CD-6.37×10-2A2-2.09×10-2B2+8.64×10-2C2-2.26×10-2D22.3.3.4 响应面分析通过模型建立响应曲

33、面，结果见图6、图7、图8、图9、图10、图11。图6 乙醇体积分数与溶剂流速对人参总皂苷转移率的影响图7 溶剂流速与浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响图8 溶剂流速与超微粉碎时间对人参总皂苷转移率的影响图9 乙醇体积分数与浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响图10 乙醇体积分数与超微粉碎时间对人参总皂苷转移率的影响图11 浓缩温度与超微粉碎时间对人参总皂苷转移率的影响实验结果显示，各因素对人参总三萜皂苷转移率的影响顺序为：流速(A)>乙醇体积分数(B)>浓缩温度(C)>超微粉碎时间(D)。乙醇体积分数和溶剂流速的交互作用对皂苷转移率影响如图6，可以看出，等高线呈椭圆形，说明在其他

34、条件不变的情况下，两者交互作用显著，对皂苷转移率影响最大，但从等高线密度变化的变化可以看出，沿流速轴的等高线密度变化大于沿乙醇体积分数轴的等高线密度变化，说明流速对转移率的影响比乙醇体积分数显著，浓缩温度与超微粉碎时间对人参总皂苷的提取影响较小。浓缩温度和溶剂流速及其交互作用对皂苷转移率影响如图7，浓缩温度考察区间下，等高线与坐标轴无交点，表示在乙醇体积分数与超微粉碎时间不变时，浓缩温度对总三萜皂苷转移率影响较少。溶剂流速与超微粉碎时间及其交互作用对皂苷转移率影响如图8，与浓缩温度比较，交互作用较小，也就说明药材粒径对皂苷转移率影响要比浓缩温度小，而溶剂流速对其具有显著的影响。乙醇体积分数与浓

35、缩温度及其交互作用对皂苷含量影响如图9，乙醇体积分数比浓缩温度对皂苷转移率的影响较大，等高线较密，而温度对皂苷的转移率影响不明显。乙醇体积分数与超微粉碎时间及其交互作用对皂苷转移率影响如图10，其交互作用较温度要小，呈一平缓的坡面。浓缩温度与超微粉碎时间及其交互作用对皂苷转移率的影响如图11，两者交互作用较小，同时由二维图可以看出浓缩温度对皂苷转移率的影响比超微粉碎时间稍微大一点，但较其它因素影响较小。通过Design Expert 8.0分析，人参总皂苷动态连续循环提取的最佳工艺条件为：溶剂流速为23.31ml/min,乙醇体积分数为78.06%，浓缩温度为64.74，超微粉碎时间9.38m

36、in。此工艺条件下，人参总三萜皂苷的转移率达到88.26%。乙醇体积分数和溶剂流速的交互作用对动态连续循环提取工艺影响最大，浓缩温度与超微粉碎时间对人参总皂苷的提取影响较小，实际生产工艺中，可把浓缩温度设为动态连续回流提取装置的设备参数，当其处于最优值时，可保证提取过程处于动态循环状态，同时，经超微粉碎后，药材粒径均远小于普通粉碎，均可获得较好的溶出效果，故超微粉碎时间对提取工艺影响较少。2.3.3.5 响应曲面法验证实验为验证该响应曲面法实验的可靠性，采用上述最佳溶出条件进行人参总皂苷的连续回流提取实验，根据实际操作条件，将最佳溶出条件修正为溶剂流速为23ml/min，乙醇体积分数为80%，

37、浓缩温度为60，超微粉碎时间10min。按“2.3.1.1”项下提取测定方法操作，实验结果见表10。表10 紫外分光光度法测定人参总皂苷含量样品编号样品称重（g）吸光度样品含量（mg/g）人参总皂苷转移率（%）平均转移率（%）RSD（%）11000.450586.47 83.82 85.64±1.772.0621000.473390.11 87.34 31000.463288.50 85.78 实验结果显示，人参总皂苷的转移率为85.64%，与理论预测值比较，误差为3%。采用响应曲面法得到的工艺条件参数准确可靠，对于人参总皂苷动态连续循环提取工艺有实际参考意义。3 结论为保证提取工艺

38、的科学性，本文建立了人参总皂苷的含量测定方法。应用曲面响应曲面模型对动态连续循环提取工艺进行优化分析，得到人参总皂苷动态连续循环提取的最佳工艺条件为：溶剂流速为23.31ml/min,乙醇体积分数为78.06%，浓缩温度为64.74，超微粉碎时间9.38min。此工艺条件下，人参总皂苷的理论转移率达到88.26%。验证实验表明，经响应曲面法优化后的人参须动态连续循环提取工艺是可行的，为该工艺的工业化提供参考意义。4 讨论4.1 采用动态连续循环提取的特点采用动态连续循环提取可减少提取溶剂用量，降低生产成本，与现有工业生产中的浸渍法、煎煮法相比，减少了提取、浓缩程序，缩短生产周期，提高生产效率，

39、同时在曲面优化后的工艺基础上，利用该方法可显著提高人生皂苷转移率，节省中药资源。4.2 本工艺与其他文献报道工艺的优势结合曲面优化实验设计考查出动态连续提取装置提取人参皂苷的最佳提取工艺为溶剂流速为24ml/min，乙醇体积分数为78%，浓缩温度65，超微粉碎时间10min，其中乙醇体积分数与文献中通过正交设计实验得出的70%结果较相似4，其提取的皂苷转移率达到80%以上，与一些试验中通过繁琐的处理的得到的结果相差无几甚至要比一些文献所得出的提取转移率稍高5。4.3 响应曲面实验中药材粒径水平的设计及其指标单因素考察实验结果表明人参须超微粉体的总皂苷转移率高于普通粉碎粉体，故响应曲面实验中只考察超微粉体对其转移率的影响，超微粉体粒径以超微粉碎时间为指标。4.4 验证实验的工艺条件最佳工艺条件验证实验，根据实际实验条件，以修正后的工艺条件进行。【参考文献】1 国家药典委员会. 中华人民共和国药典M.一部.北京：中国医药科技出版社,2010：351.2 施嫣嫣，张丽，丁安伟. 墨旱莲化学成分及药理作用研究J.吉林中医药，2011,31(1)：68-70.3 周玲生. 墨旱莲对D-半乳糖所致衰老模型小鼠体内自由基和免疫功能影响的实验研究J.医学信息,2009,22(8)：1520-1522.4 刘翔， 陈晓风.不同产地