专题2微生物的培

1、专题2 微生物的培养与应用亲，你能够说亲，你能够说出几种微生物？出几种微生物？特点：特点：结构都相当简单结构都相当简单, ,个体多数十分微小个体多数十分微小. .通常要用光学显微通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构. .且体内一般且体内一般不含有叶绿素不含有叶绿素. .不能进行光合作用不能进行光合作用. .微生物包括哪五类：微生物包括哪五类：真菌真菌原生动物原生动物 原核生物界原核生物界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界 微生物的定义：是一切肉眼看不见或看不清：是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称楚的微小生物

2、的总称与微生物有关的知识与微生物有关的知识1.芽孢：芽孢：有些有些细菌细菌在一定的条件下，细胞里面形成在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形一个椭圆形的休眠体的休眠体。芽孢的壁很厚，对干旱、。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，。例如，有的细菌的芽孢，煮沸有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。小时以后才死亡。2.菌落：菌落：单个或少数细菌单个或少数细菌在固体培养基在固体培养基上大量繁殖上大量繁殖时，就会形成一个时，就会形成一个肉眼可见肉眼可见的，具的，具有一定形态结有一定形态结构构的的子细胞群体子细胞群体，叫做，叫做。 菌落是鉴

3、定菌种的重要依据。菌落是鉴定菌种的重要依据。身边的微生物SARS冠状病毒冠状病毒禽流感病毒禽流感病毒真菌真菌灵芝灵芝真菌真菌酵母菌酵母菌专题2 微生物的培养与应用一、微生物的营养方式及培养一、微生物的营养方式及培养自养型：硝化细菌等自养型：硝化细菌等 水、无机盐水、无机盐腐生型：枯草杆菌等腐生型：枯草杆菌等 培养基培养基寄生型：肺炎双球菌等寄生型：肺炎双球菌等 活细胞活细胞专题专题2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用二、培养基的营养构成及类型二、培养基的营养构成及类型1.培养基的概念培养基的概念2.营养构成营养构成一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等还需要满

4、足不同微生物对还需要满足不同微生物对PH、特殊营养物质及、特殊营养物质及O2的要求。的要求。3.类型类型（1）按物理状态分）按物理状态分 特点特点 用途用途固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基加凝固剂（如琼脂）加凝固剂（如琼脂）微生物的分离、微生物的分离、鉴定等鉴定等不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产专题专题2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用3.类型类型（2）按功能分：）按功能分： 特点特点 用途用途选择培养基选择培养基鉴别培养基鉴别培养基培养基中加入某培养基中加入某种化学种化学物质物质，用来，用来抑制抑制不需要不需要的微生物生长，的微生物生长，促进促进所所需要的微生物生长。需要的

5、微生物生长。培养和分离出培养和分离出特定微生物。特定微生物。根据微生物的根据微生物的代谢特点代谢特点，在培养基中在培养基中加入某种指加入某种指示剂或化学药品示剂或化学药品鉴别不同种类鉴别不同种类的微生物的微生物思考：思考：下列属于哪种类型的培养基：下列属于哪种类型的培养基：1.在分离酵母菌和霉菌的培养基上加入青霉素。在分离酵母菌和霉菌的培养基上加入青霉素。2.用伊红用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌，若有，则菌落呈深紫色并带有否含有大肠杆菌，若有，则菌落呈深紫色并带有金属光泽。金属光泽。三、无菌技术三、无菌技术1.概念概念： 泛指在培养微生物的

6、操作中，所有防止杂菌污染的方泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。法。 成功地培养微生物的关键。成功地培养微生物的关键。2. 概念概念 消毒消毒 常用方法：煮沸消毒、巴式消毒、常用方法：煮沸消毒、巴式消毒、 化学药剂消毒、紫外线消毒化学药剂消毒、紫外线消毒 包括包括 概念：概念： 灭菌灭菌 常用方法：烧灼灭菌常用方法：烧灼灭菌 干热灭菌干热灭菌 高压蒸汽高压蒸汽 专题专题2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用例：微生物的接种工具例：微生物的接种工具例：玻璃器皿、吸管等例：玻璃器皿、吸管等例：培养基及容器等例：培养基及容器等1.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他无菌技术除

7、了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？外来微生物污染外，还有什么目的？2.2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。如果需要，请选择合适的方法。（1 1） 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿（2 2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管（3 3） 实验操作者的双手实验操作者的双手答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（答：（1）、（）、（2）需要灭菌；（）需要灭菌；（3）需要消毒。）需要消毒。四、基本操作技术

8、四、基本操作技术1.配制培养基配制培养基 计算计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板倒平板2. 工具：工具：接种接种 方法：方法：3.培养：接种后的培养皿放入恒温箱中培养培养：接种后的培养皿放入恒温箱中培养专题专题2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用接种环、涂布器等接种环、涂布器等平板画线法：平板画线法：稀释涂布平板法：稀释涂布平板法： 平板划线的操作方法平板划线的操作方法交叉划线法交叉划线法连续划线法连续划线法 1. 1.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？再进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 2.

9、2.在作第二次以及其后的划线操作时，为在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：答：划线后，线条末端细菌的数目比线条划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。【典例解析【典例解析】 例例1 1关微生物营养物质的叙述中，正确的关微生物营养物质的叙述中，正确的A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的

10、物质不可能同时是氮源 B.B.凡碳源都提供凡碳源都提供能量能量C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.D.无机氮源也能无机氮源也能提供能量提供能量 解析：解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于针对微生物的具体情况分析。对于A A、B B选项，它的表达是选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如同时是氮源，如NH4HCO3NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳

11、源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；碳，可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3NaHCO3，可作为自养，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而型微生物的碳源和无机盐；而NaClNaCl则只能提供无机盐。对则只能提供无机盐。对于于D D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3NH3可可为硝化细菌提供能量和氮源。为硝化细菌提供能量和氮源。答案：答案：D例例2 2

12、下面对发酵工程中灭菌的理解下面对发酵工程中灭菌的理解的是的是A.A.防止杂菌污染防止杂菌污染 B.B.消灭杂菌消灭杂菌C.C.培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D.D.灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前答案：答案：B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；所以是正确的；B B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂是错误的，因为灭菌的

13、目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。全部微生物。C C是正确的，因为与发酵有关的所有设备是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。所接菌种也杀死。五、分离与计数五、分离与计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选方法：筛选方法：以尿素为唯一氮源的选择培养基以尿素为唯一氮源的选择培养基原原 理理

14、：在上述培养基中加入酚红指示剂，若酚红指示剂：在上述培养基中加入酚红指示剂，若酚红指示剂 变红，可初步鉴定细菌能够分解尿素。变红，可初步鉴定细菌能够分解尿素。计数方法：计数方法：显微镜直接计数、稀释涂布平板法显微镜直接计数、稀释涂布平板法2.分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离原原 理：（理：（1）纤维素）纤维素葡萄糖；葡萄糖； （纤维素酶是一种复合酶）（纤维素酶是一种复合酶） （2）纤维素可与刚果红形成红色复合物，纤维素）纤维素可与刚果红形成红色复合物，纤维素被分解后红色消失，出现透明圈。被分解后红色消失，出现透明圈。筛选方法筛选方法：（：（1）选择培养基）选择培养基 (2)鉴别

15、培养基鉴别培养基 专题专题2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用：用以纤维素为唯一碳源的：用以纤维素为唯一碳源的：刚果红染色法：刚果红染色法1.在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物学观点？菌，符合下列哪一生物学观点？A.生物结构与功能相适应的观点生物结构与功能相适应的观点B.生物结构与功能整体性观点生物结构与功能整体性观点C.生物与环境相适应的观点生物与环境相适应的观点D.生物发展进化的观点生物发展进化的观点练一练：练一练：2.从土壤中分离获得某种微生物的步骤是从土壤中分离获得某种微生物的步骤是土壤取样土壤取样梯度稀释梯度稀释选择培养选择培

16、养 菌悬液涂布平板菌悬液涂布平板挑选出单个菌落挑选出单个菌落A. B.C. D.3. 有关选择培养正确的叙述是有关选择培养正确的叙述是A. 可以增加纤维素分解菌的浓度可以增加纤维素分解菌的浓度B. 可以减少纤维素分解菌的浓度可以减少纤维素分解菌的浓度C. 所用培养基是固体培养基所用培养基是固体培养基D. 所用培养基是平板培养基所用培养基是平板培养基练一练：练一练：4.4.下列关于纤维素酶的说法，错误的是下列关于纤维素酶的说法，错误的是A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖5分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是要求是()加尿素加尿素不加尿素不