Dendriticcells

1、树突状细胞树突状细胞Dendritic cells -APCAPC王国的国王王国的国王我们的国王我们的国王-DC 树突状细胞（Dendritic cells, DC）是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells, APC)，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。病原体病原体真菌寄生虫树突状细胞的研究内容树突状细胞的研究内容 一、树突状细胞的分类和发育一、树突状细胞的分类和发育 二、树突状细胞的特性及体外诱二、树突状细胞的特性及体外诱生生 三、树突状细胞与免

2、疫调控三、树突状细胞与免疫调控 四、树突状细胞疫苗的几种策略四、树突状细胞疫苗的几种策略 五、展望五、展望 Where is he come from(来源)?树突状细胞分类树突状细胞分类根据形态分类根据形态分类 并指状DC细胞：来自朗格罕细胞 滤泡DC细胞根据来源分类 髓系树突状细胞（DC1）Myeloid DC 淋巴系树突状细胞（DC2）Lymphoid DC Also known as MDC and LDC.MDC function as thisLDC function as this骨髓DC前体血流非淋巴组织分化非成熟DC定居上皮组织、胃肠道、生殖道和泌尿管道、气道以及实质脏器的间

3、质具有很强的摄取、处理和加工抗原的能力，但提呈抗原能力弱细胞因子和抗原刺激下DC细胞成熟并迁移进入局部淋巴结摄取、处理和加工抗原的能力变弱，但提呈抗原能力逐渐增强髓系髓系DC的分化发育过程的分化发育过程 解释:DCDC的发育与其由非淋巴器官经血液的发育与其由非淋巴器官经血液或淋巴间液向淋巴组织内流入过程紧密相关。或淋巴间液向淋巴组织内流入过程紧密相关。骨髓及血液中的前体骨髓及血液中的前体DCDC随血流分布于皮肤、随血流分布于皮肤、胃肠道、心、肝、肺等非淋巴器官发育为未胃肠道、心、肝、肺等非淋巴器官发育为未成熟成熟DCDC，此时有较强的抗原加工摄取能力，此时有较强的抗原加工摄取能力，MHC-MH

4、C-肽复合物合成最强，然后未成熟的肽复合物合成最强，然后未成熟的DCDC在在微环境介质的作用下经血液及淋巴液这一移微环境介质的作用下经血液及淋巴液这一移行阶段，以隐蔽细胞的形式到达次级淋巴组行阶段，以隐蔽细胞的形式到达次级淋巴组织成为成熟织成为成熟DCDC，这时这时DCDC获得了致敏静止状态获得了致敏静止状态的的T T细胞、启动初级细胞、启动初级T T细胞免疫应答及细胞免疫应答及T T细胞依细胞依赖性应答的能力。赖性应答的能力。 二二 树突状细胞的特性及体外诱生树突状细胞的特性及体外诱生1、在不同的情况下DC形态不同2、DC与功能相关的几大特性3、DC的体外诱生皮肤和淋巴结中的皮肤和淋巴结中的

5、DC是星形的；是星形的；分离后负载于玻片上的分离后负载于玻片上的DC有许多树刺状突有许多树刺状突起；起；电镜下的电镜下的DC多呈棘状；多呈棘状；相差显微镜下相差显微镜下DC的胞体向外延伸成幔状。的胞体向外延伸成幔状。 不同的情况下不同的情况下DC形态不同形态不同例如例如 1.1.DCDC捕获加工处理抗原的能力与其表面受体捕获加工处理抗原的能力与其表面受体有关。有关。 2. 2.DCDC高表达高表达MHC IIMHC II类产物类产物( (10106 6/ /细胞细胞) )，DCDC含含有许多液泡有许多液泡( (Vacuoles)Vacuoles)结构，如结构，如M/CM/C或或C/VSC/VS

6、，这这是是MHC IIMHC II类分子高集区，也是肽与类分子高集区，也是肽与MHC IIMHC II分子结合分子结合之处。之处。MHC-MHC-肽复合物经此到达肽复合物经此到达DCDC表面然后向表面然后向T T细胞细胞递呈。递呈。 DC与功能相关的几大特性与功能相关的几大特性3. .DCDC表达丰富的粘附分子及表达丰富的粘附分子及共刺激因子，如共刺激因子，如ICAMsICAMs、LFA-LFA-3 3、-整合素、整合素、B7sB7s、CD40CD40、IL-12IL-12等，这涉及到等，这涉及到DCDC与与T T细细胞的结合及归巢倾向胞的结合及归巢倾向( (但这些但这些表面标志随表面标志随D

7、CDC的不同分化阶的不同分化阶段而有变化段而有变化) )。DC与功能相关的几大特性与功能相关的几大特性4.DC的限制性标志的限制性标志CD83、P55、S100b。前前两者为新的两者为新的Ig超家族成员，源于超家族成员，源于EBV和和B细细胞系，主要在血液及胞系，主要在血液及T细胞区细胞区DC上表达。上表达。S100b是一胞浆蛋白，其单抗可选择性使是一胞浆蛋白，其单抗可选择性使DC着色以区别于其它淋巴细胞。着色以区别于其它淋巴细胞。 5.DC5.DC上的上的CD40CD40和新近发现的和新近发现的TRANCE/RACKTRANCE/RACK受受体，与体，与T T细胞上细胞上TNFTNF家庭成员

8、相配将激化家庭成员相配将激化DCDC，从而上调从而上调CD80CD80、CD86CD86的表达，使其分泌的表达，使其分泌IL-IL-1212，释放释放IL-8IL-8及及MIP-1MIP-1、等化学因子。等化学因子。DC与功能相关的几大特性与功能相关的几大特性由于由于DC在体内含量较少，所以体外大在体内含量较少，所以体外大量扩增纯化量扩增纯化DC是下一步研究的关键。是下一步研究的关键。骨髓或脐血骨髓或脐血CD34+细胞及外周血单个细胞及外周血单个核细胞均可做为核细胞均可做为DC的来源。的来源。GM-CSF是髓系细胞发育的必需细胞是髓系细胞发育的必需细胞因子；因子；TNF-，CD40L可阻止粒系

9、的分可阻止粒系的分化而刺激化而刺激DC的成熟；的成熟；IL-4的加入则抑制的加入则抑制了单核细胞向巨噬细胞分化的潜能并维了单核细胞向巨噬细胞分化的潜能并维持持DC成熟。成熟。DC的体外诱生的体外诱生 目前，关于目前，关于DCDC定向诱导分化的方案定向诱导分化的方案很多，细胞因子的剂量、组合不尽相同，很多，细胞因子的剂量、组合不尽相同，除了除了GM-CSFGM-CSF、TNF-TNF-和和IL-4IL-4外，外，SCFSCF、FLFL、IL-13IL-13等均显示出提高等均显示出提高DCDC数量的协同作用，数量的协同作用，总之，总之，完善的完善的DCDC诱导和培养体系诱导和培养体系将是将是DCD

10、C研研究和应用的基础。究和应用的基础。B、T细胞是免疫的介导者，但其细胞是免疫的介导者，但其功能却受功能却受DC的控制。的控制。 1.DC与B细胞 2.DC与T细胞三三 树突状细胞（树突状细胞（DC）与免疫调控）与免疫调控 DCDC对对B B细胞的生长和免疫球蛋白的细胞的生长和免疫球蛋白的分泌有重要作用。分泌有重要作用。 两者虽同为两者虽同为APCAPC，但但DCDC有较高有较高MHCMHC及共及共刺激因子的表达能力并能大量产生刺激因子的表达能力并能大量产生IL-12IL-12；DCDC通过通过FcFc及多聚凝集素及多聚凝集素( (multilectinmultilectin) )受受体中和抗

11、原，体中和抗原，B B细胞则有抗原特异性免疫细胞则有抗原特异性免疫球蛋白受体。球蛋白受体。1.DC与与B细胞细胞 原始原始B B细胞仅与间质内非细胞仅与间质内非LCLC型型DCDC反应，在反应，在DCDC分泌的分泌的IL-12IL-12作用下产作用下产生抗体；生抗体；DCDC同时调控着同时调控着B B细胞所产生细胞所产生的免疫球蛋白的种类，的免疫球蛋白的种类，IL-10IL-10与与TGF-TGF-诱导诱导IgA1IgA1的生成，的生成，IgA2IgA2的表达则的表达则严格依赖于严格依赖于B B与与DCDC的直接相互作用，的直接相互作用，这说明这说明DCDC控制着粘膜的免疫。控制着粘膜的免疫。

12、 滤泡型滤泡型DC直接维持激活直接维持激活B细胞的活细胞的活力、生长与分化，生发中心含有力、生长与分化，生发中心含有CD11c + DC ，它可携带免疫复合物，有较强的刺激它可携带免疫复合物，有较强的刺激B细胞的能力。细胞的能力。 DC与与B细胞间作用方式遵循细胞间作用方式遵循双信号双信号原则原则，即，即DC上的特异性抗原被上的特异性抗原被BCR接受产接受产生第一信号，生第一信号，B细胞吞噬细胞吞噬iccosomal以诱导以诱导Th；DC上上CR2L与与B细胞上细胞上CR结合，这对结合，这对共刺激因子提供第二信号调控体液免疫。共刺激因子提供第二信号调控体液免疫。T T细胞库有自身抗原的耐受性。

13、胸腺细胞库有自身抗原的耐受性。胸腺中消除发育中中消除发育中T T细胞的细胞的中枢性免疫耐受中枢性免疫耐受，淋巴器官中消除成熟淋巴器官中消除成熟T T细胞或诱导无反应细胞或诱导无反应性的性的外周性免疫耐受外周性免疫耐受都需要都需要DCDC的参与。的参与。胸腺髓质中的胸腺髓质中的DCDC参与胸腺中的参与胸腺中的阴性选择阴性选择，它递呈自身抗原与它递呈自身抗原与MHCMHC复合物给复合物给T T细胞，细胞，然后使能够识别自身抗原并与之有较高然后使能够识别自身抗原并与之有较高亲合力的亲合力的T T细胞克隆流产。细胞克隆流产。2.DC与与T细胞细胞例如：源自胰腺例如：源自胰腺细胞的相关肽，在细胞的相关肽

14、，在draining淋巴结中由淋巴结中由BM-APC递呈给递呈给T细胞，结果是产细胞，结果是产生耐受，生耐受，T细胞无反应性或被消除。新近发现，细胞无反应性或被消除。新近发现，DC可递呈源自凋亡细胞的肽片段可递呈源自凋亡细胞的肽片段11，据，据此，此，DC可通过递呈来自体细胞的自身抗原给可通过递呈来自体细胞的自身抗原给T细胞而诱导对自身蛋白的耐受。细胞而诱导对自身蛋白的耐受。DC在外周性免疫耐受中起重要作用。在外周性免疫耐受中起重要作用。随着随着T T细胞活化机理的阐细胞活化机理的阐明，明，DCDC在诱导在诱导CTLCTL中的作用中的作用日日受瞩目，受瞩目，CD1a+DCCD1a+DC可分泌可

15、分泌IL-IL-1212，后者可调节后者可调节T T细胞和细胞和NKNK细细胞功能，促进胞功能，促进Th0Th0朝朝Th1Th1方向方向分化，显著影响分化，显著影响Th1Th1和和Th2的的平衡。这也是平衡。这也是DC应用的理论应用的理论基础。基础。那么，什么因素决定那么，什么因素决定DCDC是触发还是是触发还是关闭免疫系统关闭免疫系统? ? 有学者认为，不同的有学者认为，不同的DCDC担负着不同担负着不同的使命。淋巴结的使命。淋巴结DCDC诱导自身耐受；迁移诱导自身耐受；迁移中的髓系中的髓系DCDC，包括包括LCLC，在遭遇外源抗原在遭遇外源抗原后产生活性移向淋巴器官启动免疫反应。后产生活性

16、移向淋巴器官启动免疫反应。树突状细胞和树突状细胞和T辅助细胞的相互关系辅助细胞的相互关系四四 树突状细胞疫苗的几种策略树突状细胞疫苗的几种策略 纵观纵观DC对免疫系统的调控，它涉对免疫系统的调控，它涉及了与及了与T细胞有关的一些临床疾病：细胞有关的一些临床疾病：移植，过敏反应，自身免疫病，移植，过敏反应，自身免疫病，感染，肿瘤及免疫缺陷病等。目感染，肿瘤及免疫缺陷病等。目前研究较多的是前研究较多的是DC的的抗肿瘤作用抗肿瘤作用。DCDC在诱导强有力的抗肿瘤免疫反应中是在诱导强有力的抗肿瘤免疫反应中是关键因素，肿瘤患者常常是局部关键因素，肿瘤患者常常是局部DCDC功能功能受损，数目下降，因此有关

17、受损，数目下降，因此有关DCDC的免疫治的免疫治疗即是从它的佐剂作用来设计肿瘤疫苗疗即是从它的佐剂作用来设计肿瘤疫苗的，其中包括肿瘤抗原肽负载于的，其中包括肿瘤抗原肽负载于DCDC，肿肿瘤粗提物刺激瘤粗提物刺激DCDC及及DCDC的基因工程疫苗。的基因工程疫苗。 1. 1. 以自体以自体DC ex vivoDC ex vivo负载肿瘤抗原是一种负载肿瘤抗原是一种合理的构想。合理的构想。 这方面的工作主要是以鼠为模型的实验。这方面的工作主要是以鼠为模型的实验。DCDC加肿瘤相关抗原肽疫苗对同种肿瘤细胞再加肿瘤相关抗原肽疫苗对同种肿瘤细胞再攻击有很好的保护作用，这说明致敏攻击有很好的保护作用，这说

18、明致敏DCDC在体在体内聚集效应细胞，诱导了抗肿瘤攻击的特异内聚集效应细胞，诱导了抗肿瘤攻击的特异性免疫保护。抗原肽刺激的性免疫保护。抗原肽刺激的DCDC用于人的实验用于人的实验研究还较少。研究还较少。 2. 2. 人们的第二个设想是以肿瘤细胞的人们的第二个设想是以肿瘤细胞的酸提抗原刺激酸提抗原刺激DCDC。 多种混杂的多肽可被多种混杂的多肽可被DCDC有效提呈且有效提呈且比人工合成多肽更优越，这种直接与自比人工合成多肽更优越，这种直接与自体体APCAPC的的MHCMHC分子结合的多肽较少含有其分子结合的多肽较少含有其它杂蛋白，因而有较强的免疫激发能力。它杂蛋白，因而有较强的免疫激发能力。 3

19、. 3. DCDC的基因工程疫苗是人们的又一设想的基因工程疫苗是人们的又一设想，这一设想使这一设想使DCDC有效并长效地将肿瘤抗原递有效并长效地将肿瘤抗原递呈给特异性呈给特异性CTLCTL。 将肿瘤抗原的编码基因导入将肿瘤抗原的编码基因导入DCDC，既克既克服了肽与服了肽与DCDC负载后复合物的解离问题，也负载后复合物的解离问题，也能使表达的抗原有效地与能使表达的抗原有效地与MHCMHC分子结合从而分子结合从而递呈给递呈给CTLCTL。动物实验的证据已给临床前研动物实验的证据已给临床前研究带来了希望究带来了希望. . 树突细胞（树突细胞（DCDC）疫苗技）疫苗技术术 目前，在肿瘤免疫治疗领域内，目前，在肿瘤免疫治疗领域内，人类肿瘤人类肿瘤抗原的与抗原递呈细胞抗原的与抗原递呈细胞( (主要是主要是DC)DC)的结合的结合是是热点课题之一。围绕热点课题之一。围绕DCDC为基础的免疫治疗着为基础的免疫治疗着重从前体细胞中诱导扩增重从前体细胞中诱导扩增DCDC，探讨探讨DCDC在免疫在免疫治疗中的佐剂作用，治疗中的佐剂作用，DCDC体内的靶向分子及体内的靶向分子及DCDC与与HIVHIV的复制等几大方面，尤其前两方面工作的复制等几大方面，尤其前两方面工作做得较多。鉴于微小变化即可导致做得较多。