动物细胞工程的应用

1、-I物胞程用术 动细工常技动物细胞培养核移植 B物细胞融合单克隆抗体技术3皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只要 保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果下层 真皮受损面积较大，常常需要植皮。植皮需要的健 康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自烧伤病人 自身未烧伤的部位（自体植皮），也可取自其他活 人或尸体（异体植皮）等。自体植皮是永久性的， 取自其他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈 合过程中为保护创面而采取的措施，1014天后就 要被身体排斥。如果一个大面积烧伤的病人来说，自体 皮肤有限，其他渠道的皮肤来源不足。如何 才能获得大量的自体健康皮肤？、动物细胞培养L发展历史:20世纪初，人们

2、不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维 的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后， 在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。2、动物细胞培养的应用和概念:7动物细胞培 养就是从动物有机体中取出相关出2-15 再培算的人细杷跑建的人选皮肤的组织，将它分散 成单个细胞,然

3、后, 放在适宜的培养 基中，让这些细胞 生长和增殖.动物细胞的培养过程过上取动物器官和组织幼龄动4剪碎组织的目虻胰蛋白酶处络|剪碎组织理的目的?胰蛋白酶处理删蛋白单个细胞细胞培养动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础3建行枷纲馍块用肺罩内的处理“"底限个噩总林入培养沿中进行传代培粹嗝涵恒整 的细胞 用麟贵 白 帕姓再 分触电单个细11制成阳EE麻液葬人培养裱中进柠传代培器193、动物细胞培养过程:动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官单个细胞。加培养液纤维）动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞遗传物质 未改变细胞株网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。

4、细胞悬浮液4原代培养10代细胞、50代细胞，传代培养遗传物质 已改变细胞系 J . I无戚传代有关概念原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。（分装前的细胞培养）传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。有关概念细胞株J传代培养的细胞一般传至10代左 右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数 细胞存活到405。代，这种传代细胞为细胞株。细胞系二细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变，具有癌

5、细胞的特点，失去接触抑制, 容易传代培养。#动物组织细胞培养要求一体外培养特点：大多数动物细胞要附在物体上表面生长, 动物细胞培养对营养要求更严格，除氨基 酸、维生素、盐类、葡萄糖外，还需要血 清。对环境适应性差，对环境敏感，包括： PH、溶解氧、温度、剪切力等比微生物要 求更高。培养瓶、培养皿、培养管、多孔培养板等。黜胞培餐液细胞培养以玻璃器器皿应选择透明度好、650 160培养工具:中性硬度玻璃制品。根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形 态各异，用于细胞传代培养的细胞要求瓶 壁厚簿均匀，便于细胞贴壁生长和观察，瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位。三、培养条件细胞在

6、底卬培养中所需的条件与体内细胞基本相同。【讨论】多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，讨论 以下问题：1 ,体外培养细胞时需要提供哪些物质?提示：充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。2 .体外培养的细胞需要什么样的环境条件?提示：无菌.无毒的环境。1)恒定的温度：37,维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定适宜的温度。人 性细胞培养的标灌温度为36.5七±0.5。，偏离这一温度 斯围，细胞的正甯代谢会受到影响，甚至死亡。培养细胞 对低温的耐受力较对高温强，温度上升不超过39c时，细 胞代谢与温度成正比； 人体细胞在39-4(TCl小时，即能受到一定损伤，但仍有可 能恢复； 在40-41C1小时，细胞会普遍受到损伤，仅小半数有可能 irjfr 塞, 41-421小时，细胞受到严重损伤，大部分细胞死亡，个 别细胞仍有恢复可能；当温度在43c以上1小时，细胞全部死亡。低温下会使细 胞代谢速率降