茶多酚的含量测定

1、茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法目的 ：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。根据消耗1mL mL的高锰酸钾相当于茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。试剂：1、靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为的浓硫酸 50mL冷却后用蒸馏水定容至 1000mL, 如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红 1g,加浓硫酸50mL,在80C烘箱或水浴中加热磺化 46h,用蒸馏水定 容至100

2、0mL过滤后贮于棕色瓶中。2、 %草酸溶液：准确称取草酸，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。3、 高锰酸钾标准溶液：称取 AR的高锰酸钾，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。准 确吸取草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再 加入相对密度为的浓硫酸 10mL，摇匀，在7080C水浴中保温5分钟，取出后用 高锰酸钾进行滴定。开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边 滴边摇，待溶液出现淡红色保持 1 分钟不变即为终点。计算高锰酸钾溶液的百分 比浓度。测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品 1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸 馏水80mL，

3、在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。2、测定：取200ml蒸馏水放入白 瓷皿中，加入定红溶液5mL再加入供测试液 5mL,幵动磁力搅拌器，用已标定 的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以 1 滴 /s 为宜，接近终点时应慢滴。直 到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。同时做空白测 定。五、结果计算式中：X茶多酚的含量，%，B空白消耗的高锰酸钾毫升数， mL A样品消耗 的高锰酸钾毫升数，mL 3-高锰酸钾的浓度，%，n样品的质量g，V1测定用 供测试液的体积， mL ， V2-供测试液的体积， m

4、L酒石酸铁比色法原理：茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的 20%35%,由约30种以上的酚类物质所组成， 通称茶多酚。按其化学结构分为四类： （1）儿茶素类，属黄烷醇类； （2）黄酮及 黄酮醇类；（ 3）花白素及花青素，即羟基 -4-黄烷醇及其钾盐；（4）醋酸及缩 酚酸类。 其中以黄烷醇类化合物最重要 （占多酚的 80%左右）。纯儿茶素一般为白 色无定形粉末，在空气中极易氧化成棕色物，能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙 酸乙酯等有机溶剂中。茶多酚能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。对热、酸较稳定，2%勺溶液加热至120 C并保持 30min，无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。酒石酸铁能

5、与茶多酚生成紫褐色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多 酚的 含量成正比。因此可以用比色方法测定。该法可避免高锰酸钾滴定法所产生的人 为视觉误差。茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法，由于高锰酸钾直接 滴定法操作比较复杂，且靠肉眼观察颜色判断终点，如果样品溶液颜色较深时， 可能影响测定结果。本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。仪器与试剂仪器：分光光度计试剂：（1）酒石酸铁溶液：称取 FeSO4- 7H2O，含4个结晶水的酒石酸钾钠，加 蒸 馏 水 溶 解 后 ， 用 蒸 馏 水 稀 释 至 1000mL （ 2） 的 磷 酸 缓 冲 液 ： Na2HPO4 12H2O ,

6、 2H2O加蒸馏水溶解后.用蒸馏水稀释至 1000mL步骤（l ）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品1g于200mL三角烧瓶中，加入沸水80mL在沸水浴中浸提 30min,然后过滤、洗涤，滤液倒人 100mL容量瓶 中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。摇匀，再加入磷酸缓冲液稀释至刻度。以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白。选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度。计算式中：宀一茶多酚的含量， % A 样品溶液的吸光度值，T样品溶液的总体积， mLV测定用样品溶液的量，mL，m样品质量，g 用1cm比色杯，当吸光度为 时，试液中茶多酚的浓度为 mL说明及注意事项1、磷

7、酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌，放冰箱中保存或临用时现配 2、样品溶液制备中的注意事项：(1) 较透明的样液，如果味茶饮料，将样液充分摇匀后，直接取样测定(2) 较浑浊的样液，如果汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充分混匀的样液25mL于 50mL容量瓶中，加95%的乙醇15mL充分混匀，放置15min,用水定容至刻度，过 滤。(3) 含有碳酸气的样液，如农夫汽茶，量取充分混匀的样液 100mL于250mL的烧 杯中，称取其总量，于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热 10min，以将二氧化碳 排除，放冷，用水补足原来的质量，摇匀，备用。测定准确吸取试液1 ml，注人2 5 mL的容量瓶中，加水4 ml和酒石酸亚铁溶液5 ml， 充分混合，再加p H 7.5 磷酸盐缓冲液至刻度，用 10mmt匕色杯，在波长540nm 处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度 ( A)高效液相色谱采用高效液相色谱法测定绿茶中茶多酚