白细胞计数和分类ppt课件

1、1诊断学诊断学-实验一实验一 白细胞计数白细胞计数 2实验一、实验一、 白细胞计数白细胞计数 n1.原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞，在血细胞计数池内原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞，在血细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数，换算成每升血液中白细胞数。计数规定区域内的白细胞总数，换算成每升血液中白细胞数。n2.试剂器材试剂器材 白细胞稀释液：冰乙酸白细胞稀释液：冰乙酸 2.0ml 10g/L亚甲蓝亚甲蓝 3滴滴 加蒸馏水加蒸馏水 至至100ml3器材器材 改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片、改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片、微量吸管、带孔吸头、微量吸管、带孔吸头、1ML刻度移液

2、管、小试管、洁净刻度移液管、小试管、洁净软纱布、干棉球、光学显微软纱布、干棉球、光学显微镜。镜。456毛细血管采血标准操作程序毛细血管采血标准操作程序 操作步骤：操作步骤：n1 采血部位成人以左手无名指内侧为宜，半岁以下婴幼儿通常自拇指内采血部位成人以左手无名指内侧为宜，半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟两侧采血。侧或足跟两侧采血。n2 轻轻按摩采血部位。轻轻按摩采血部位。n3 用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。74 紧捏刺血部位，使其自然充血。紧捏刺血部位，使其自然充血。5 用无菌刺针穿刺取血，动作应迅速，深度用无菌刺针穿刺取血，动作应迅速，深度 23mm，

3、稍加挤压以血液流，稍加挤压以血液流出为宜。出为宜。6 用干棉球擦去第一滴血。用干棉球擦去第一滴血。7 按需要依次采血。按需要依次采血。8 采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片刻。采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片刻。8 微量吸管的使用微量吸管的使用n1将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气；将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气；n2拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、中指轻微挤压排出适拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、中指轻微挤压排出适量空气；量空气；n3将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲（松动快血液会吸入吸头），吸将微量吸管插入抗凝血，拇、中

4、指缓慢松劲（松动快血液会吸入吸头），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有气泡），吸管呈水平略下垂，松开示指；取抗凝血至所需刻度略上方（不能有气泡），吸管呈水平略下垂，松开示指；n4用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血（保证血量准确），轻触吸管下口吸去多用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血（保证血量准确），轻触吸管下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度；余血量，使管内抗凝血正处所需刻度；n5将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血液，用上清液冲洗管将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血液，用上清液冲洗管内余血内余血2-3次，轻摇试管混匀；次，轻摇试管混匀；n6拔出微量吸管弃入污物桶。拔出

5、微量吸管弃入污物桶。9 3.操作步骤操作步骤（1）加稀释液加稀释液 用移液管用移液管向小试管内加入向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。白细胞稀释液。（2）采血、稀释用微量吸管采血）采血、稀释用微量吸管采血20ul，拭去管外余血，释放于小试，拭去管外余血，释放于小试 管管底部，底部，用上部用上部稀释液洗净吸管内余血，稀释液洗净吸管内余血，轻摇试管轻摇试管混匀，静置等其溶血。混匀，静置等其溶血。（3）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上。上。（4）充计数池将小试管轻微振荡）充计数池将小试管轻微振荡2

6、min，立即以一次性微量吸管吸取混匀后的，立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白白细胞悬液，充入计数池内。细胞悬液，充入计数池内。静置静置2-3min，使细胞沉于，使细胞沉于计数池底面计数池底面。（5）调试显微镜）调试显微镜 将计数板放置载物台上，将计数板放置载物台上，选择（选择（4 ）低倍镜，调节聚光器低倍镜，调节聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，转至低倍镜（使光线较暗，调节旋钮找到方格线，转至低倍镜（10），调节光亮），调节光亮 。（6）计数计数 低倍镜下计数四角低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数，压线细胞个大方格内白细胞总数，压线细胞数上不数下，数上不数下，数左不数右数左不数右。10

7、结果计算结果计算白细胞总数白细胞总数 =4大格白细胞数（大格白细胞数（N） /410 20 106 = N 20 109/L用用. 109/L（小数点后一位）表示（小数点后一位）表示115细胞计数原则细胞计数原则n大方格四边压线细胞数左大方格四边压线细胞数左不数右，数上不数下，不数右，数上不数下，n弓形移动弓形移动12实验报告内容n原理n试剂器材n操作步骤n实验结果n讨论13诊断学 实验二 白细胞分类白细胞分类14n1.1.分类原理：白细胞分类计数是将血液制备成涂片，瑞氏染分类原理：白细胞分类计数是将血液制备成涂片，瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形态特征进行分类计数。通常分色后显微镜下根据白细

8、胞的形态特征进行分类计数。通常分类类100100个白细胞，计算得出各种白细胞所占百分比个白细胞，计算得出各种白细胞所占百分比15 2.瑞氏染色原理：瑞氏染料溶于甲醇，离解为带正电的碱性美兰（瑞氏染色原理：瑞氏染料溶于甲醇，离解为带正电的碱性美兰（M+）和带负电的酸性伊红（和带负电的酸性伊红（E-）离子。细胞的染色既有物理的吸附作用，又）离子。细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力也有化学的亲和作用。各种细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力也不一样，故可呈不同的着色特点。不一样，故可呈不同的着色特点。16 3.器材器材n光学显微镜光学显微镜

9、n推片，载玻片推片，载玻片试剂试剂nWright染液染液 Wright 1.0g 甲醇甲醇 600mln磷酸盐缓冲液（磷酸盐缓冲液（PH6.46.8）n香柏油香柏油标本来源标本来源nEDTA-K2抗凝全血抗凝全血 17183 3白细胞分类：白细胞分类： 细胞分布均匀的体尾交界处，滴细胞分布均匀的体尾交界处，滴加香柏油一滴，加香柏油一滴，油镜油镜下分类计数。下分类计数。分类时要有秩序的连续进行，避分类时要有秩序的连续进行，避免主观选择视野。通常分类计数免主观选择视野。通常分类计数100100个白细胞，计算并报告各种白个白细胞，计算并报告各种白细胞所占比例。细胞所占比例。 19q中性粒细胞（中性粒

10、细胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圆形，胞浆染粉红色，核形一叶）：在瑞氏染色血涂片上呈圆形，胞浆染粉红色，核形一叶（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见，染成深紫红色，胞浆中有许多细小（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见，染成深紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。均匀紫红色颗粒。各类成熟白细胞的形态学：各类成熟白细胞的形态学： 20q嗜酸性粒细胞（嗜酸性粒细胞（Eo）：）：较中性粒细胞稍大，胞核多为两叶，较中性粒细胞稍大，胞核多为两叶，呈眼镜、呈眼镜、八字形，核染色质粗糙染深紫红色，八字形，核染色质粗糙染深紫红色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒，瑞氏染色时呈桔红色，有折

11、光性。颗粒，瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。 21q嗜碱性粒细胞（嗜碱性粒细胞（Ba）：胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈）：胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或兰黑色。于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。 22q淋巴细胞（淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，在成人血涂片中以小淋巴细胞为多见，核）：胞体呈圆形，在成人血涂片中以小淋巴细胞为多见，核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的大呈深紫色致密而浓染，胞浆量极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒，胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒，胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。较深。 23 单核细胞（单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为）：在瑞氏染色涂片上为1220m，胞体圆形、椭，胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形多种多样，最重要的特点是染色质较细致疏圆形或不规则形；核形多种多样，最