两种方法检测降钙素原的比较异同分析

1、两种方法检测降钙素原的比较异同分析【摘要】 目的：比较分析电化学发光法和免疫荧光层析法检测降钙素原（PCT）结果。方法：采用Roche Cobas E601电化学发光仪及广州万孚对120例不同浓度的PCT进行同时检测并对所有数据进行统计学分析。结果：两种方法的阴性组、低风险组、轻度升高组浓度值比较差异无统计学意义（P0.05）；中度及高度升高组浓度值比较差异有统计学意义（P0.05）。结论：免疫荧光层析法操作简便，实时性优于电化学发光法。【关键词】 降钙素原； 电化学发光法； 免疫层析法； Roche Cobas E601发光仪中图分类号 R446 文献标识码 B 文章编号 1674-6805

2、（2014）30-0044-02降钙素原（PCT）即降钙素前体，由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，生理情况下，血液中检测不到。它是一种脓毒诱导蛋白，作为新的炎症指标，广泛地应用于感染性疾病的诊断、鉴别诊断、病情监测及抗生素应用指导等【1】。随科学技术发展，检测降钙素原的方法有许多，如电化学发光免疫法、胶体金免疫荧光层析定量法、酶联免疫法等。本文就前两种方法的降钙素原结果进行比较，旨在分析这两种方法的相关性。1 材料与方法1.1 仪器与试剂Roche Cobas E601发光仪及配套试剂；广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪及配套试剂。1.2 标本来源收集笔者

3、所在医院ICU病房、新生儿科、儿科、呼吸内科、心内科、外科等相关临床科室120例不同浓度的PCT进行同时检测。1.3 方法利用笔者所在医院现有两种仪器，一种是广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪（免疫层析法原理），一种是Roche Cobas E601发光仪（电化学发光原理）；将120例标本离心沉淀，每份标本分成两份，一份用广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪做PCT测定；一份用Roche Cobas E601发光仪做PCT测定；两种仪器各测得120份数据进行统计学处理。1.4 统计学处理采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标

4、准差（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料比较采用字2检验。P0.05），D、E两组在高浓度时比较差异有统计学意义（P0.05），见表1。2.3 两种方法总阳性率比较以PCT0.1 ng/ml为阳性，免疫荧光层析法组阳性率为46.66%，电化学发光法组阳性率为44.16%，两者比较差异无统计学意义（字2=0.151，P=0.6970.05），见表2。表2 两种方法总阳性率比较 %方法0.1 g/ml免疫荧光层析法（n=120）53.34（64/120）46.66（56/120）电化学发光法（n=120）55.84（67/120）44.16（53/120）字2值 0.151P值

5、0.6973 讨论Roche Cobas E601电化学发光法检测PCT是采用双抗体夹心二步法。其原理利用待检样本与生物素化的单克隆PCT抗体以及钌复合物标记单克隆PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。加入包被链霉亲和素的磁珠微粒，复合物与磁珠通过生物素和链霉亲和素的作用结合，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面，给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增测量发光强度【4】。这种方法线性范围为0.03963.25 ng/ml，且具有快速、所受干扰因素少、与国外最先进的仪器具有良好的相关性【4】等优点。免疫层析法原理是利用高度特异性的抗原抗体反应，标本中的降钙素原与预先包被在聚酯膜

6、上的金标记的降钙素原单克隆抗体结合，结合物在毛细效应下向上层析，随后会被固定在膜上的降钙素原单克隆抗体结合捕获，标本中的降钙素原的含量与被捕获的结合物含量呈正相关，通过免疫定量分析仪扫描检测区，获得相应的光学信号，然后通过内置的标准曲线将信号转换为降钙素原的浓度。免疫定量分析仪是融合了胶体金免疫层析技术的定量检测方法，具有操作简便、精密度高、线性范围宽、重复性好等优点广泛应用于各种实验室【7】。但由于方法学的局限性，会出现假阳性及假阴性结果【3】，同时免疫荧光层析法与国外先进仪器的相关性未见文献报道。本次实验研究两种方法检测降钙素原相关性良好，与文献报道一致【2】。但PCT检测目前尚无公认的参

7、考方法，各检测方法的溯源性也不一样。在本文研究中发现中、高浓度值（PCT≥2.0 ng/ml）两种检测方法存在一定的差异，是否与此有关，有待进一步研究。PCT作为急诊项目，临床医生往往根据结果来诊断脓毒血症和指导临床及时用药。出于成本和工作人员安排，多数医院检验科电化学分析仪不可能24 h待机状态；相比较而言免疫荧光层析法操作简便、实时性强受到检验医生及临床医生的青睐。综上所述，两种方法检测降钙素原各有其特点，笔者认为急诊检测PCT采用免疫荧光层析法，能及时提供检测结果，于临床诊断疾病及指导抗生素的应用具有重要意义；对于PCT高浓度的的监测，建议使用电化学发光法或者经电化学发光法校正后的

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