致突变试验PPT学习教案

1、会计学1致突变试验致突变试验教学目的与要求教学目的与要求 2. 2. 怎样进行化学致突变物检测？怎样进行化学致突变物检测？1. 1. 如何进行致突变试验的选择？如何进行致突变试验的选择？第1页/共17页一、遗传学终点和试验配套一、遗传学终点和试验配套1. 遗传学终点遗传学终点 （Genetic end point） 试验观察到的现象所反映的事件。试验观察到的现象所反映的事件。第2页/共17页突变发生过程中的事件及突变发生过程中的事件及遗传学终点的关系遗传学终点的关系化学物接触细胞屏障DNA损伤无误修复未修复修复错误DNA完整性改变DNA交换重排基因突变染色体结构异常染色体数目异常遗传学终点遗传

2、学终点正常细胞第3页/共17页1* 表示主要反映的终点，表示主要反映的终点，2* 表示次要反映的终点表示次要反映的终点常见致突变试验反映的遗传学终点常见致突变试验反映的遗传学终点 试试 验验DNA完整完整性改变性改变DNA交换交换或重排或重排基因基因突变突变染色体染色体结构结构异常异常染色体染色体数目数目异常异常微核微核1*2*细菌回复突变细菌回复突变1*姐妹染色单体交姐妹染色单体交换换2*1*细菌细菌DNA修复修复1*第4页/共17页2. 试验配套试验配套 细菌细菌DNADNA修复试验修复试验（DNADNA完整性改变）完整性改变）配套原则：配套原则： 遗传学终点齐全遗传学终点齐全 配套方案配

3、套方案: 微核试验微核试验 （染色体结构异常和数目异常）（染色体结构异常和数目异常） 姐妹染色单体交换试验姐妹染色单体交换试验 （DNADNA交换或重排）交换或重排） 细菌回复突变试验细菌回复突变试验 （基因突变）（基因突变）第5页/共17页二、重要的致突变试验二、重要的致突变试验（四）细菌（四）细菌DNA修复试验修复试验（一）微核试验（一）微核试验（二）姐妹染色单体交换试验（二）姐妹染色单体交换试验（三）细菌回复突变试验（三）细菌回复突变试验第6页/共17页（一）（一） 微核试验微核试验 （Micronuclei test） 试验原理试验原理 试验设计试验设计 以染色体结构异常和数目异常为遗

4、传学终点，考以染色体结构异常和数目异常为遗传学终点，考察化学物对遗传物质的损伤效应。察化学物对遗传物质的损伤效应。第7页/共17页微核试验原理图微核试验原理图第8页/共17页小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 实际案例分析实际案例分析 利用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验检测大气污染物利用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验检测大气污染物SOSO2 2的致突变性。的致突变性。 试验方法的确立试验方法的确立第9页/共17页嗜多染红细胞及其微核实例嗜多染红细胞及其微核实例第10页/共17页断颈处死取股骨断颈处死取股骨取骨髓细胞制涂片取骨髓细胞制涂片涂片固定染色涂片固定染色镜检：镜检：嗜多

5、染红细胞，计数微核率嗜多染红细胞，计数微核率试验流程图试验流程图吸入吸入SO2染毒染毒吸入洁净空气吸入洁净空气第11页/共17页试验结果分析试验结果分析结论结论结果结果1 染毒组微核率染毒组微核率高于高于对照组：对照组：SO2具有致突变性。具有致突变性。 结果结果2 染毒组微核率与对照组染毒组微核率与对照组无差别无差别：用其他试验进一步验证。：用其他试验进一步验证。024681012对照组二氧化硫染毒组微核率（）024681012对照组二氧化硫染毒组微核率（）结果2结果1第12页/共17页（二）（二） 姐妹染色单体交换试验姐妹染色单体交换试验(Sister chromatid exchange

6、 test) 以以DNADNA交换或重排为检测终点，考察化学物对遗传物质的损伤效应。交换或重排为检测终点，考察化学物对遗传物质的损伤效应。 试验原理试验原理 试验设计试验设计第13页/共17页5-5-溴脱氧尿嘧啶（溴脱氧尿嘧啶（Brdu）参入）参入DNADNA互补链互补链造成的姐妹染色单体差示染色原理造成的姐妹染色单体差示染色原理正常细胞污染物作用后第14页/共17页小鼠骨髓细胞姐妹染色单体交换试验小鼠骨髓细胞姐妹染色单体交换试验试验设计与微核试验类似，不同点主要在于：试验设计与微核试验类似，不同点主要在于：1. 1. 小鼠染毒处理后要接触小鼠染毒处理后要接触5-5-溴脱氧尿嘧啶溴脱氧尿嘧啶(Brdu);(Brdu);2.试验结果中，比较染毒前后染色单体交换位点发生的试验结果中，比较染毒前后染色单体交换位点发生的比率来进行致突变性的评价。比率来进行致突变性的评价。第15页/共17页 主要知识点：主要知识点： 1. 1. 遗传学终点遗传学终点及以此为基础的及以此为基础的试验配套试验配套； 2. 2.