环氧乙烷残留量的测定

1、环氧乙烷的综述 环氧乙烷（EO）为一种最简单的环醚。低温时为无色易流动液体，沸点10.4，在该温度以上为无色气体。EO液体在室温下易挥发，有醚味。 环氧乙烷的综述 环氧乙烷灭菌环氧乙烷灭菌 EO具有顽强的扩散和穿透能力，对细菌芽孢、真菌和病毒等各种微生物均有灭杀作用，属于广谱灭菌剂。环氧乙烷的综述 环氧乙烷对人体的危害（1）急、慢性毒性（2）三致作用（3）急性中毒与局部刺激（4）神经系统损害与慢性毒性（5）生殖毒性医疗器械环氧乙烷的接触量限度 前24小时（mg）前30天(mg) 一生(g)短期接触EO: 4 ECH: 9 长期接触EO: 4 60 ECH: 9 60 持久接触EO: 4 60

2、2.5ECH: 9 60 10 参照标准：参照标准：ISO10993-7:2008 环氧乙烷残留量分析方法一 、 比色分析法二 、 气相色谱法环氧乙烷残留量测定环氧乙烷残留量测定比色分析法比色分析法检测依据、原理检测依据、原理 一、检测依据一、检测依据 GB/T 14233.1-2008 医用输液、输血、注射器具检验方法 第1部分：化学分析方法二、原理二、原理 环氧乙烷在酸性条件下水解成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛与品红-亚硫酸试液反应产生紫红色化合物，通过比色分析可求得环氧乙烷含量。 溶液配制溶液配制 三、溶液配制三、溶液配制 0.1mol/L盐酸:取9mL盐酸稀释至1000mL

3、。 高碘酸溶液（5g/L）:称取高碘酸0.5g，溶于水，稀释至100mL。 硫代硫酸钠溶液（10g/L）：称取硫代硫酸钠1.0g，溶于水，稀释至100mL。 亚硫酸钠溶液（100g/L）：称取10.0g无水亚硫酸钠，溶于水，稀释至100mL。 品红-亚硫酸试液：称取0.1g碱性品红，加入120mL热水溶解，冷却后加入10%亚硫酸钠溶液20mL、盐酸2mL，置于暗处。试液应无色，若发现有微红色，应重新配置。 溶液配制溶液配制 三、溶液配制三、溶液配制乙二醇标准贮备液：取一个外部干燥、清洁的50mL容量瓶，加水约30mL，精确称重。精确量取0.5mL乙二醇，迅速加入瓶中，摇匀，精确称重。两次称重之

4、差即为溶液中所含乙二醇的重量，加水至刻度，混匀，按下式计算其浓度： C= m/50 1000式中： C - 乙二醇标准贮备液浓度，单位为克每升（g/L） m-溶液中乙二醇的质量，单位为克（g） 乙二醇标准溶液（浓度C1=C10-3）：精确量取标准贮备液1.0mL，用水稀释至1000mL。样品浸提方法样品浸提方法 四、四、样品浸提方法样品浸提方法取样品上有代表性的部分，截为5mm长碎片，称取2.0g置于容器中，加0.1mol/L盐酸10mL，室温放置1h，作为供试液。对于容器类样品，可加0.1mol/L盐酸至公称容量，在371下恒温1h，作为供试液。步骤步骤 五、五、步骤步骤取五只纳氏比色管，分

5、别精确加入0.1mol/L盐酸2mL，再精确加入0.5mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL乙二醇标准溶液。另取一只纳氏比色管，精确加入0.1mol/L盐酸2mL作为空白对照。于上述各管中分别加入高碘酸溶液（5g/L）0.4mL，摇匀，放置1h。然后分别滴加硫代硫酸钠溶液（10g/L）至出现的黄色恰好消失。再分别加入品红-亚硫酸试液0.2mL，用蒸馏水稀释至10mL，摇匀，3537条件下放置1h，于560nm波长处以空白液作为参比，测定吸光度。绘制吸光度-体积标准曲线。精确量取供试液2.0mL于纳氏比色管中，按上述步骤操作，以测得的吸光度从标准曲线上查得试液相应的体积。结

6、果计算结果计算绝对含量绝对含量 六、六、结果计算结果计算 环氧乙烷残留量用绝对含量或相对含量表示： WEO=1.775VC1m 式中：WEO -单位产品中环氧乙烷绝对含量，mg V -标准曲线上找出的供试液相应的体积，mL C1 -乙二醇标准溶液浓度，g/L m -单位产品的质量，g结果计算结果计算相对含量相对含量 六、六、结果计算结果计算 计算样品中环氧乙烷相对含量： CEO=1.775VC1103 式中：CEO -单位产品中环氧乙烷相对含量，g/L V -标准曲线上找出的供试液相应的体积，mL C1 -乙二醇标准溶液浓度，g/L结果计算结果计算（容器类）绝对含量（容器类）绝对含量 六、六、

7、结果计算结果计算 对于容器类样品，按下式计算容器中环氧乙烷绝对含量： WEO=0.335VC1V1 式中： WEO-单位产品中环氧乙烷绝对含量，mg V-标准曲线上找出的供试液相应的体积，mL C1-乙二醇标准溶液浓度，g/L V1-单位样品的公称容量，mL结果计算结果计算 （容器类）单位体积含量（容器类）单位体积含量六、六、结果计算结果计算 对于容器类样品，按下式计算单位体积中环氧乙烷含量： CEO=0.335VC1103 式中： CEO-样品中单位体积中环氧乙烷含量，mg/L V-标准曲线上找出的供试液相应的体积，mL C1-乙二醇标准溶液浓度，g/L环氧乙烷残留量检测环氧乙烷残留量检测

8、-色谱法 （GC-HS) 气相色谱法 1 气相色谱法简述 气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。 气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。气相色谱法 1.1 载气源载气源 气相色谱法的流动相为气体，称为载气，氦、氮和氢可用作载气，可由高压瓶或高纯度气体发生器提供，经过适当的减压装置，以一定的流速经过进样器和色谱柱；根据供试品的性质和检测器种类选择载气，除另有规定外

9、，常用载气为氮气。 气相色谱法 1.2 进样部分 进样方式一般可采用溶液直接进样、气体进样。 溶液直接进样采用微量注射器、微量进样阀或有分流装置的气化室进样。采用溶液直接进样时，进样口温度应高于柱温30 50 ；进样量一般不超过数微升；柱径越细，进样量应越少，采用毛细管柱时，一般应分流以免过载。 气相色谱法 顶空进样适用于固体和液体供试品中挥发性组分的分离和测定。将固态或液态的供试品制成供试液后，置于密闭小瓶中，在恒温控制的加热室中加热至供试品中挥发性组分在非气态和气态达至平衡后，由进样器自动吸取一定体积的顶空气注入色谱柱中。气相色谱法 1.3 色谱柱 色谱柱为填充柱或毛细管柱。 极性大小分：

10、强极性，弱极性，非极性 气相色谱法 新填充柱和毛细管柱在使用前需老化以除去残留溶剂及低分子量的聚合物， 色谱柱如长期未用，使用前应老化处理，使基线稳定。气相色谱法 1.4 柱温箱 由于柱温箱稳定的波动会影响色谱 分析结果的重现性，因此柱温箱精度应在1，且温度波动小于每小时0.1。温度控制系统分为恒温和程序升温两种。气相色谱法 1.5 检测器 适合气相色谱法的检测器 火焰离子化检测器（FID） 热导检测器（TCD） 氮磷检测器（NPD） 火焰光度检测器（FPD） 电子捕获检测器（ECD） 检测EO选择的检测器是？选择的毛细管柱？气相色谱法 1.6 数据处理系统 可分为记录仪、积分仪以及计算机工作

11、站等。 气相色谱法 2 原理 在一定温度下，用萃取剂水 萃取样品中所含环氧乙烷（EO），用顶空气相色谱法测定环氧乙烷含量。气相色谱法 3. 测定方法 3.1 取环氧乙烷标准品适量（怎么取法？），制成六个浓度的标准溶液，各取10ml，制备六个浓度的标准品试样。 3.2 当标准品试样达到气液平衡时，不同浓度的液体对应于不同浓度的气体，取平衡后的气体，注入进样器，记录环氧乙烷的峰高（或面积）。 气相色谱法 3.3 根据不同浓度的标准溶液对应的峰高（或面积） ，绘制峰高（或面积） 浓度标准曲线。 3.4 取样品适量，配制成样品试样，同法测定峰高（或面积） ，以测得的峰高（或面积）从标准曲线上查得相应的

12、标准溶液的浓度。 3.5 根据公式，计算出环氧乙烷残留量。气相色谱法 4 气相色谱仪条件 4.1 氢火焰离子检测器： 4.2 色谱柱：所用色谱柱应能使试样中杂质和环氧乙烷完全分开，并有一定的耐水性。（通常选用非极性柱，比如OV-1)气相色谱法 4.3 仪器各部位温度 a）气化室200 b）检测室250 4.4 气流量 a）N2 2.0ml/min b）H2 40 ml/min c）空气 400ml/min 气相色谱法 5 环氧乙烷标准贮备液的制备（称重法） 取外部干燥的50ml容量瓶，加水约30ml，加瓶塞，称重，精确到0.1mg。用注射器注入约0.6ml环氧乙烷，不加瓶塞，轻轻摇匀，盖好瓶塞

13、，称重，前后两次称重之差，即为溶液中所含环氧乙烷的重量。加水至刻度再将此溶液稀释成1 10-2g/L作为标准贮备液。 在移取标准液最好在冰水浴中进行气相色谱法 6 样品试样制备 6.1 将样品长碎块，取2.0g放入萃取容器中，加5.0ml水浸提，浸提时间（1h)与温度（37或25）根据样品的特性来定。气相色谱法 7 试验步骤 7.1 用储备液配制1 10-3g/L 1 10-2g/L六个系列浓度的标准溶液。各取10ml按6.2方法处理。 用玻璃注射器依次从平衡后的标准样和试样中迅速取1ml上部气体，注入进样器，记录环氧乙烷的峰高（或面积）。气相色谱法 注 1 在一个分析中尽量一人操作，并使用同一只1ml玻璃注射器； 2 注射器预先恒温到样品相同温度； 3 每次注意环氧乙烷保留时间的变化，以防进样气化垫漏气； 4 每个样品（包括标样）在尽可能短的时间内分析三次，三次分析中必须有两次结果相差不大于5%，否则此样品应重新进行分析。气相色谱法 7.2 用标准样所测数据，绘出标准曲线（X：E