常见荧光定量PCR仪汇总PPT学习教案

1、会计学1常见荧光定量常见荧光定量PCR仪汇总仪汇总概述概述技术发明史1992年由日本科学家Higuchi在报告中提出1996年由美国Applied Biosystems公司推出技术发展趋势从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法从最初的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长光源第1页/共57页进口定量进口定量PCR仪器厂商仪器厂商ABIROChe （罗氏）Bio-Rad （伯乐）市场占有率市场价格ABIROCheBio-Rad第2页/共57页第3页/共57页第4页/共57页第5页/共57页如何选择荧光定量如何选择荧光定量 PCR PCR 仪器？仪器？ 1 、仪器使用的广泛程度 2 、仪器

2、的检测通量（反应孔数） 3、仪器的通道数量 4、耗材的开放性 5、硬件设计特点 6、运行速度 7、灵活性 第6页/共57页热模块系统第7页/共57页第8页/共57页荧光定量PCR的光学系统第9页/共57页第10页/共57页决定其通道数决定其通道数第11页/共57页荧光定量PCR技术的优点第12页/共57页第13页/共57页第14页/共57页ABI荧光定量荧光定量PCR仪仪厂家介绍： 美国应用生物系统公司，经营生产生命科学设备仪器和试剂，其荧光PCR仪成系列，市场占有率高。 荧光PCR仪型号：ABI 7500ABI 7300ABI 7900ABI steponeABI ViiA7 市场占有率代理

3、公司：达安基因，上海创萌，创博环球，北京博凌科为，北京优尼康，北京鼎盛伟业等 第15页/共57页第16页/共57页第17页/共57页第18页/共57页第19页/共57页第20页/共57页ABI 7900优缺点：优缺点：7900是ABI第二代PCR产品，目前最强PCR仪。价格70-80万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul1.检测孔数：支持8联管，96孔板，384孔板，Taqman 低密度表达谱芯片2.激发光源：氩离子激光，全波长检测3.进样时可以采用ABI自动机械臂，方便快捷4.加热模块：半导体加热模块，升温3/S缺点：体积大，价格贵，性能比上不如7500。 第21页/共57页第22页/

4、共57页96孔板384孔芯片板8联管各孔板基座第23页/共57页ABI 7500优缺点：优缺点：7500是ABI第三代PCR产品，目前ABI市场占有率最高，最成功PCR仪。价格40万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul检测孔数：兼容96孔和8联管。检测通道：5通道，除去ROX后4通道。加热模块：半导体加热模块，升温3/S激发光源：齿钨灯。第24页/共57页ABI 7500 fast7500 fast是7500快速反应模式仪器，理论支持本公司PCR体系：20ul检测孔数：兼容96孔和8联管。检测通道：5通道，除去ROX后4通道。反应时间：3040min激发光源：齿钨灯。第25页/共57页A

5、BI 7300优缺点：优缺点：ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改变，只是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。价格20-30万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul检测孔数：兼容96孔和8联管。检测通道：4通道，除去ROX后3通道。激发光源：齿钨灯。加热模块：半导体加热模块，升温3/S第26页/共57页光源系统：LED激发+PMT扫描机制检测孔数：48孔检测通道：3通道理论支持本公司PCR体系：30ulABI Step One / Step one plus ABI Step one systemABI Step one plus system检测孔数：96

6、孔检测通道：4通道加热模块：半导体加热模块，升温3/S具有独特的Veriflex TM 加块，控温效果大大提高理论支持本公司PCR体系：30ul第27页/共57页ABI ViiA7 优缺点：优缺点：ABI第7代产品，优点比7900有所提升，理论支持本公司PCR体系：40ul1.检测孔数：96孔板，384孔板，Taqman 低密度表达谱芯片2.激发光源：齿钨灯3.加热模块：半导体加热模块，升温3/S，温控准确性好。4.运行时间：35min完成40个循环。5.检测通道：6通道，除去ROX后5通道缺点：价格昂贵，体积大第28页/共57页综上所述，以上几款为ABI常见的荧光定量PCR仪器，像ABI77

7、00,7000已被市面所淘汰。ABI系列是市场占有率最大的荧光PCR仪器厂商，但由于硬件设计上的缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，且ABI维修费用相当高。第29页/共57页进口定量进口定量PCR仪器厂商仪器厂商ABIROChe （罗氏）Bio-Rad （伯乐）市场占有率市场价格ABIROCheBio-Rad第30页/共57页ROChe厂家介绍：罗氏公司始创于1896年，总部位于瑞士巴塞尔，主要涉及药品、医疗诊断、维生素和精细化工、香精香料等四个领域。LightCycler以运行速度快而著称，在国内市场占有率单款最高 荧光PCR仪型号：LightCycler 2.0 LightCycler L

8、ightCycler 480 LightCycler Nano 市场占有率代理公司：上海浩然，达安基因，上海博尼，山东艾克韦，济南朋远，北京博凌，上海众华，北京普生瑞等 第31页/共57页检测通道：3通道加热模式：离心式空气加热/冷却升温：20/S 孔数：32孔材料：玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格实验成本：体系小，成本低理论支持本公司PCR体系：20ulLightCycler优缺点：优缺点：第32页/共57页检测通道：6通道加热模式：空气加热/冷却升温：20/S 孔数：32孔材料：玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格实验成本：体系小，成本低，一般是ABI的一半理论支持本公司P

9、CR体系：20ulLightCycler 2.0优缺点：优缺点：第33页/共57页检测通道：6通道加热模式：半导体加热制冷模块升温：5/S 孔数：96孔（10-100ul）检测1小时,384孔（5-20ul）检 测40min材料：专用板，理论支持本公司PCR体系：40ul集多个优点于一身，目前市面上最强悍的PCR仪LightCycler 480优缺点：优缺点：第34页/共57页第35页/共57页LightCycler Nano 优缺点优缺点：检测通道：12个以上加热模式：空气加热/冷却升温：20/S 孔数： 32孔（48联管）理论支持本公司PCR体系：40ul,价格为LC480的一半第36页/

10、共57页 综上所述：LightCycler系列检测速度快，稳定性非常好，灵敏度明显比其它仪器高。但操作过程是以毛细管进行，操作时应特别小心。Roche使用的耗材的通用性差，成本高(毛细管)，且每次的检测数量低。 第37页/共57页进口定量进口定量PCR仪器厂商仪器厂商ABIROChe （罗氏）Bio-Rad （伯乐）市场占有率市场价格ABIROCheBio-Rad第38页/共57页Bio-Rad厂家介绍：伯乐自1952年在美国成立，在50多年中为临床诊断和生命科学研究市场提供了广泛的新型产品和服务，始终居于科学发现的中心地位。荧光PCR仪型号：Chromo 4 Opticon 2 CFX96

11、IQ 5 代理公司：上海劢瑞，上海甄明，创博环球，北京赛伯乐，黑龙江万联顺等 第39页/共57页CFX96 优缺点优缺点：1.检测孔数：96孔板2.激发光源：6色LED 3.加热模块：其基座为半导体加热模块，反应模块为专利蜂巢设计，升温5/S，温控准确性好。4.运行时间：55min完成40个循环。5.检测通道：5通道，PMT扫描机制，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能第40页/共57页IQ 5 优缺点优缺点：1.检测孔数：96孔板 或 8联管2.激发光源：卤素灯光源激发 3.加热模块：iCycler4.运行时间：2h完成40个循环。5.检测通道：冷CCD检测 ,5

12、通道，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能，1-25第41页/共57页Bio-rad DNA Engine Opticon 2 优缺点：由优缺点：由DNA Engine和光学和光学模块组成模块组成 1.检测孔数：96孔板 或 8联管2.激发光源：LED单激发光源，双通道检测3.加热模块：DNA Engine 升温3/S4.运行时间：2h完成40个循环。5.检测通道：2通道，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能，最高可达248.具有mini Opticon 产品 48孔第42页/共57页Chromo 4 优缺点：优缺点：由由DNA Engi

13、ne和光和光学模块组成学模块组成 1.检测孔数：96孔板 或 8联管2.激发光源：4个LED3.加热模块：DNA Engine的Alpha 升温3/S4.运行时间：2h完成40个循环。5.检测通道：4通道，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能，最高可达24第43页/共57页国产各厂家仪器展示国产各厂家仪器展示 达安基因 DA杭州 博日FQD厦门安普利 GeneLight 上海宏石 SLAN 第44页/共57页达安基因达安基因 DA 7600性能描述性能描述 样本容量 ：支持48孔，480.2ml离心管或68连管 检测通道：两个检测通道，F1.F2升温速率： 4.0/

14、s 加热基座：半导体加热模块光路系统：LED激发+PMT检测支持本公司体系：40ul第45页/共57页性能描述性能描述 linegene-3310/3320具体的型号为FQD -33a 。最多检测33个样本，支持0.2mlPCR管和8联管，支持本公司体系：40ul升温速率：6/秒，通过Peltier技术控温 光路：LED激发+PMT检测其中3310为单通道检测（FAM），支持两种荧光染料（FAM/SYBR）而3320为双通道检测（FAM，HEX），支持三种荧光染料杭州杭州 博日博日 linegene-3310/3320 第46页/共57页杭州杭州 博日博日FQD-48a 性能描述性能描述 FQ

15、D-48a具有单通道和4通道两种规格，通过硬件转换可升级至4通道，支持0.2mlPCR管，支持本公司体系：40ul梯度温度范围：124升温速率：4.0/S光路：LED激发+PMT检测第47页/共57页杭州杭州 博日博日FQD-66A 性能描述性能描述 FQD-66A具有4通道规格，为博日公司最新产品，支持0.2mlPCR管检测通道：4通道，同时具有4波长激发光梯度温度范围：124升温速率：4.0/S光路：LED激发+PMT检测支持本公司体系：40ul第48页/共57页厦门安普利厦门安普利 9800GeneLight 2400 性能描述性能描述 激发光源：固态激光检测光源：光电倍增管，灵敏度是C

16、CD、光电二极管的10000倍以上 加热系统：采用电阻薄膜加热 ，速率为1.5/S，弥补了空气加热造成的受热不均，温差较大的缺陷，又克服了半导体加热所致的热效应较低，元器件易损 检测通量：可达96，适用于高通量分析第49页/共57页上海宏石上海宏石 SLAN 性能描述性能描述 采用LED+PMT检测模式，升温3/S半导体加热模块具有单通道，双通道，三通道三种检测模式支持48孔模式，耗材为0.2mlPCR管在病原体的临床检测，食品卫生检测方面应用比较不错。第50页/共57页北京博奥北京博奥 RT-CyclerTM 136 性能描述性能描述 检测通道：4通道光源系统：LED激发+PMT旋转检测一次

17、可同时进行36个反应，样品管为0.2ml薄壁PCR管离心式空气加热原理升温20/S第51页/共57页上海枫岭上海枫岭FTC-3000 性能描述性能描述 10寸，触摸屏适用耗材：0.2ml单管，8x0.2ml排管， 96孔反应板高配支持5通道检测齿钨灯激发，冷CCD检测支持96孔板，机身小巧，可进行温度梯度反应 支持本公司体系：40ul第52页/共57页上海枫岭上海枫岭FTC-2000 枫岭生物ftc-2000一共具有a/b/c三种型号，共具有96、64、32检测孔，支持：0.2ml单管，8x0.2ml排管，96孔反应板（国产管适用），检测通道分别达到了4、3、1检测光源模式：卤钨灯激发+CCD检测具有温度梯度功能支持本公司体系：40ul2004年全线产品技术升级，6点温控、免维护激发光源、梯度