芹菜叶中黄酮类物质提取工艺的研究

1、安徽工程科技学院优秀毕业设计（论文）摘要样式（标题上方空一行）芹菜叶中黄酮类物质提取工艺的研究（加粗小2号黑体，居中）（空1行）食品科学与工程061班 陶然（5号仿宋体）（居中）指导教师: 黄晓东（5号仿宋体）（居中）（空1行）摘要（5号黑体加粗）:以芹菜叶为原料，,利用超声波辅助提取芹菜中的总黄酮类成分。在单因素试验的基础上,采用正交试验法,重点考察了乙醇浓度、超声功率、超声提取温度、超声提取时间和料液比五个单因素对总黄酮提取率的影响,并最终确定最佳工艺条件为:乙醇浓度为65%,超声功率为55W,超声提取温度为50,料液比为180,超声提取时间为10min,采用该最佳提取工艺,总黄酮的得率可

2、达0.221%。（5号宋体）关键词（5号黑体加粗）: 芹菜叶；超声波辅助提取；总黄酮 ；（5号宋体）（空1行）Abstract（5号Times New Roman，加粗）: The extraction of flavonoids from celery salt with ultrasonic wave was studied. On the basis of mono factor and orthogonal experimental design, the influence of several parameters on the extraction rate of total f

3、lavonoids were investigated importantly, including the ethanol concentration, ultrasonic power, ultrasonic extracted temperature, ultrasonic extracted time, and material/extraction solution ratio. And the optimum extraction conditions were as follows: ethanol concentration 65%, ultrasonic power 55W,

4、 ultrasonic extracted temperature 50, material/extraction solution ratio 180 and ultrasonic extracted time 15min. Under the above optimum conditions, the total flavonoids yielded 0.221%.Keywords: celery salt; ultrasonicwave assisted extraction; total flavonoids（5号）Keywords（5号Times New Roman，加粗）:；（5号

5、）（空2行）引 言芹菜(Apium graveolens L. )是一种二年生的伞形科芹菜属的草本植物，是一种丰富的自然资源。芹菜中含有以芹菜素为主的黄酮类化合物，具有降压安神、降血脂、镇静健胃、保护血管、增强免疫力，抗氧化、抗衰老，增强机体免疫力等功能，以及广泛的生物活性和重要的药用价值。作为天然抗氧化剂，黄酮类化合物一直受到人们的广泛关注，因此研究提取和测定芹菜内的黄酮类物质，具有一定的实用价值。黄酮类化合物传统的提取方法主要有煎煮法、回流提取法、索氏提取法、浸渍法、渗漉法、水蒸汽蒸馏法等。这些方法主要是基于天然产物的有效成分在一些极性或非极性溶剂中的溶解性来提取,存在着损失大、周期长、工

6、序多、提取率低等缺点。现已逐步被一些安全、操作方便、快捷、高效的现代提取方法所取代。考虑到经济、环境和安全等多方面的因素，超声波辅助提取黄酮类化合物的技术应运而生。此方法具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。在较低温度超声作用下，对乙醇浸提芹菜叶中黄酮类化合物的工艺研究表明，超声可以强化乙醇浸提法，达到省时、高效、节能的目的。用超声技术提取，可提高提取率并缩短提取时间，而且可以提高原料的利用率。本实验目的就是要找出用超声波辅助提取中芹菜叶中黄酮类物质的最佳提取条件，从而使的黄酮类化合物的提取效果最好，黄酮类化和物的得率达到最高。考察黄酮类化合物的活性和提取条件。实验中，从芹菜叶提取黄酮类化

7、化合物。将芹菜与乙醇以一定的比例混合后，经过超声波清洗仪进行超声，采用不同的加热温度，加热时间，料液比、超声波功率、乙醇浓度等条件等使黄酮从芹菜叶中分离，最终找出最佳的提取条件。本实验研究的结果不仅可用于芹菜叶中黄酮类化合物的提取，在其它植物中黄酮类化合物的提取中也具有参考作用。所以，本实验的研究有一定的实际意义。引言内容引言内容引言内容引言内容（用时请连此提示一起删除） “引言”用小3号宋体字加粗、居中；引言内容用小4号宋体。（用时请连此提示一起删除红色提示）第1章 绪论1.1 黄酮类化和物的特性1.1.1 物理特性 黄酮类化合物多为结晶性固体1，少数为无定型粉末。黄酮类化合物的颜色与分子中

8、存在的交叉共轭体系及助色团（-OH、-CH3）等的类型、数目及取代位置有关。黄酮一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性，故可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。1.1.2 化学特性生物类黄酮结构是两个苯环(A-与B-环)通过中央碳链相互联结而成的一系列C6-C3-C6化合物,主要指以2-苯基色原酮为母核的化合物,其基本结构2为: 1.1.3 光谱特性 以乙醇为提取溶剂提取黄酮类化合物，取提取液以溶剂定容测得在510.0nm处的吸光度值最大3，因此确定510.0nm为最大吸收波长。1.1.4 稳定性（1

9、）对光照的稳定性日光对黄酮稳定性有一定影响4,自然光对生姜黄酮的稳定性影响不大,避光条件下黄酮的稳定性较好,紫外光照射4 min以下对黄酮的稳定性几乎没有影响。总之,短时间里光照对生姜黄酮的稳定性影响不大。（2）对热的稳定性50以下,黄酮溶液的吸光度变化很小,当温度超过50时吸光度呈明显下降趋势,溶液颜色由黄色逐渐变为淡黄色,表明,在50以上的温度范围内黄酮的热稳定性较差,应尽量在50以下制备和保存。（3）对pH的稳定性pH为36时黄酮溶液的吸光度变化不大5，稳定性较好。当pH小于3或大于6时,吸光度明显下降,说明溶液过酸或过碱时,黄酮的稳定性较差,可见酸碱对其影响都比较大。（4）氧化剂对黄酮

10、的影响随着氧化剂质量分数的增加，黄酮溶液的吸光度略有增加，但上升幅度不大，说明氧化剂对黄酮的稳定性的影响不大，所以可认为黄酮具有抗氧化做用。1.2 黄酮类化合物的生理功能1.2.1 抗肿瘤、抗癌作用黄酮类化合物6是通过促进肿瘤坏死因子，抑制致癌剂及抗氧化等多途径发挥疗效的。如大豆异黄酮的A环5、7位及B环的4位的羟基是抑制乳腺癌和前列腺癌的主要基团，在前列腺细胞增殖阶段大豆蛋白对其有抑制作用，因此，可减少前列腺肿瘤的发生。Kenneth研究表明，大豆异黄酮能降低乳腺癌、前列腺癌。赵秀兰等的研究表明麦胚黄酮类粗提取物具有抑制乳腺肿瘤的作用。1.2.2 对心血管系统的作用对血压的影响：黄酮类化合物

11、7对高血压引起的头痛、项强、头晕、耳鸣等症状有明显的疗效，尤以缓解头痛、项强为显著。葛根素对正常和高血压动物都有一定的降压作用，静注葛根素能使正常麻醉犬的血压短暂而明显地降低，也能显著降低清醒自发性高血压大鼠血压。抑制血小板凝集作用：黄酮类化合物对凝血因子具有较强的抑制作用，故表现出较好的抗凝血作用。试验表明，不同浓度的黄酮类化合物可以不同程度地抑制二磷酸腺苷诱导的大鼠血小板凝集，对5羟色胺和ADP联合诱导的家兔和绵羊血小板凝集也有同样的抑制作用。黄酮类化合物还可降低血管内皮细胞羟脯酸代谢，使内壁的胶原或胶原纤维含量相对减少，利于防止血小板粘附凝集和血栓形成，有利于防治动脉粥样硬化。大豆异黄酮

12、能抑制凝血酶和血小板活化因子诱导的血小板聚集，高浓度抑制血管渗透性因子诱导的冠状动脉舒张。对外周血管8的影响：静注黄酮类化合物于麻醉犬后，全部动物的脑血流量增加且血管阻力相应降低，还能使乙酸胆碱引起的脑内动脉扩张和去甲肾上腺素引起的收缩减弱，使处于异常状态下的血管功能恢复正常水平。还可改善异丙肾上腺素引起的小鼠微循环障碍，使毛细血管前小动脉管径增加，流速加快。1.2.3抗氧化及抗自由基作用自由基性质活泼，有极强的氧化反应能力9，对人体有很大的危害性，在体内自由基和脂质过氧化作用导致细胞结构改变和功能破坏，而引起癌症、衰老及心血管等退变性疾病。在黄酮提取物的抗氧化性研究方面，国外曾有人利用DPP

13、H法研究羟基黄酮以及单宁和类黄酮的抗氧化能力。徐雅琴研究了黑穗栗叶片黄酮提取物的抗氧化性，结果表明，叶片黄酮提取物具有一定抗氧化效果，且其抗氧化性随天加量的增加而增强。于长青等研究表明，麦胚黄酮可显著增强大鼠血液中和活性，提示麦胚黄酮可能通过提高机体抗氧化酶类的生物合成而增强机体抗氧化能力。1.2.4抗炎、抗微生物及提高免疫功能的作用黄酮类化合物主要通过影响细胞的分泌过程，有丝分裂及细胞间的相互作用而起抗炎及提高免疫功能10。多数黄酮类化合物能抑制大鼠肥大细胞和嗜碱性细胞对多种刺激引起的组胺及慢反应物质的释放，抑制PGE2、白三烯的合成和释放，抑制透明质酸酶的活性，抑制大鼠中性粒细胞溶酶体酶的

14、释放及其脱颗粒。白凤梅等研究表明，天然黄酮对小鼠急性胃溃疡有明显的消退作用。甘草第2期王长远等：黄酮类化合物研究进展 黄酮化合物中抗菌成分较多，其黄酮单体化合物licochalconeA，licochalconeB，glabridin，glabrene等对金黄色葡萄球菌，枯草杆菌，大肠杆菌，绿脓杆菌，白色念珠菌等均有抑制作用。Neobavai isolavone亦能明显抑制烟曲霉菌和新型隐球菌的生长。翟爱华等采用二倍稀释法和管碟法对麦胚黄酮进行体外抑菌试验，结果表明，对灰葡萄孢、白色念珠菌、黑根霉、意大利青霉等真菌具有较好的抑菌效果。1.2.5类黄酮对脂质代谢的调节作用有关对类黄酮作用的大量研

15、究表明，类黄酮物质对动物的脂质代谢具有调节作用11。Lichtenstein认为，大豆产品预防动脉粥样硬化、冠心病的作用归因于大豆类黄酮的降血胆固醇、抗氧化和保护动脉完整的作用。Balmir等在大鼠试验中发现，大鼠日粮中添加大豆异黄酮可显著降低血清总胆固醇和LDL胆固醇浓度12。于长青等试验研究表明麦胚黄酮可明显地降低大鼠血清和肝脏中的胆固醇、甘油三酯的含量。1.3 黄酮类化合物的提取及影响因素黄酮类化合物分布范围广、种类多、生物活性广泛，而且毒性小，使其分离提纯技术得以快速发展。目前在黄酮类化合物的提取方法中13，溶剂提取法、热水提取法等传统方法仍占主导地位，但与一些新兴的提取分离技术相比，

16、逐渐暴露了许多问题，如能量消耗大，提取温度高，时间长，不利于黄酮类化合物母核活性的保护，产品中黄酮类化合物得率和含量低，尤其是存在溶剂残留。相反一些新兴技术如超声波辅助提取技术、微波技术等具有物耗能耗少，提取速度快，产率和纯度高，提取条件温和，有利于黄酮类化合物母核活性的保护等特点。今后的黄酮类化合物提取的发展方向应该是优化现有的传统提取工艺的同时，着手新兴技术的完善和普及。1.4 黄酮类化合物在食品业的应用1.4.1 天然甜味剂柚皮苷属二氢黄酮，经过氢化处理可以转变为二氢查尔酮,具有甜味14,甜度是蔗糖的100倍。柚皮苷与异香兰素作用得新橙皮苷,新橙皮苷经过氢化转变为新橙皮苷二氢查尔酮,其甜

17、度为蔗糖的950倍,而且此两种甜味剂回味均无苦味,可直接用于各种食品中,并具保健作用。1.4.2 天然抗氧化剂研究表明,生物类黄酮均具有较强的抗氧化能力。SatuS Pekkarinen等人发现在亚油酸甲脂体系中,杨梅酮(myricetin)与槲皮素(Quercetin)的抗氧化效果优于维生素E。Susana Nieto等人发现在鱼油体系中,槲皮素与5 ,3,4-三羟基-7-甲氧基黄烷酮( 5 ,3,4-trihydroxy-7-methoxyflavanone)的混合物的抗氧化能力15高于人工合成的抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)及丁基羟基甲苯(BHT)。1.4.3 天然色素生物类黄酮多呈黄

18、色，同时又具有很宽的溶解性16，既具有水溶性的生物类黄酮,又有脂溶性的生物类黄酮,所以完全可以根据食品加工的需要来选择合适的生物类黄酮作为着色剂。萧伟祥等人利用低档的绿茶或茶末制取了纯天然的茶黄色素和茶绿色素，并确定主要成分是黄酮类化合物。1.3.4 保健食品由于生物类黄酮所具有的保健功能,人们又开发出多种保健食品。以富含生物类黄酮的荞麦为例,就有苦荞米、苦荞营养粉、苦荞疗效粉、糖尿病食疗粉、胃病食疗粉、高血脂食疗粉、苦荞颗粒粉、苦荞饼干、苦荞挂面、苦荞通心粉、苦荞食疗酒、苦荞醋、苦荞茶等产品。1.5 超声波辅助萃取的基本原理1.5.1超声波辅助提取技术 超声波是指频率为20千赫50兆赫左右的

19、电磁波17，它是一种机械波，需要能量载体介质来进行传播。超声波在传递过程中存在着的正负压强交变周期，在正相位时，对介质分子产生挤压，增加介质原来的密度；负相位时，介质分子稀疏、离散，介质密度减小。也就是说，超声波并不能使样品内的分子产生极化，而是在溶剂和样品之间产生声波空化作用，导致溶液内气泡的形成、增长和爆破压缩，从而使固体样品分散，增大样品与萃取溶剂之间的接触面积，提高目标物从固相转移到液相的传质速率。利用超声波进行清洗、干燥、杀菌、提取及无损检测等，是一种非常成熟且有广泛应用的技术。1.5.2超声波辅助提取的原理超声波萃取中的优越性，是基于超声波的特殊物理性质。主要是主要通过压电换能器产

20、生的快速机械振动波19来减少目标萃取物与样品基体之间的作用力从而实现固-液萃取分离。 （1）加速介质质点运动。高于20 KHz声波频率的超声波的连续介质（例如水）中传播时，根据惠更斯波动原理，在其传播的波阵面上将引起介质质点的运动，使介质质点运动获行巨大的加速度和动能。质点的加速度经计算一般可达重力加速度的二千倍以上。由于介质质点将超声波能量作用于有效成分质点上而使之获得巨大的加速度和动能，迅速逸出基体而游离于水中。 （2）空化作用。超声波在液体介质中传播产生特殊的“空化效应”，“空化效应”不断产生无数内部压力达到上千个大气压的微气穴，并不断“爆破”产生微观上的强大冲击波作用在被提取物上，使其

21、中所需提取的成分物质被“轰击”逸出，并使得基体被不断剥蚀，其中不属于植物结构的所需提取的成分不断被分离出来。加速植物有效成份的浸出提取。 （3）超声波的振动匀化（Sanitation）使样品介质内各点受到的作用一致，使整个样品萃取更均匀。 综上所述，一般所需提取的物质在超声波场作用下不但作为介质质点获得自身的巨大加速度和动能，而且通过“空化效应”获得强大的外力冲击，所以能高效率并充分分离出来。1.5.3超声波萃取的特点 相比较传统的提取方法20，超声波萃取具有如下突出特点：（1）无需高温。在4050水中超声波强化萃取，无水煮高温，不破坏物质的某些具有热不稳定，易水解或氧化特性的有效成份。超声波

22、能促使植物细胞地破壁，提高提取效率。（2）常压萃取，安全性好，操作简单易行，维护保养方便。（3）萃取效率高。超声波强化萃取2040分钟即可获最佳提取率，萃取时间仅为水煮、醇沉法的三分之一或更少。萃取充分，萃取量是传统方法的二倍以上。据统计，超声波在6570时工作效率非常高。而温度在65C度内各种植物的有效成份基本没有受到破坏。加入超声波后（在65条件下），植物有效成份提取时间约40分钟。而蒸煮法的蒸煮时间往往需要两到三小时，是超声波提取时间的3倍以上时间。（4）具有广谱性。适用性广，绝大多数的植物各类成份均可超声萃取。（5）超声波萃取对溶剂和目标萃取物的性质（如极性）关系不大。因此，可供选择的

23、萃取溶剂种类多、目标萃取物范围广泛。（6）减少能耗。由于超声萃取无需加热或加热温度低，萃取时间短，因此大大降低能耗。（7）药材原料处理量大，成倍或数倍提高，且杂质少，有效成分易于分离、净化。（8）萃取工艺成本低，综合经济效益显著。1.6 本课题的目的意义和研究内容本课题所介绍的超声波提取黄酮类化合物的方法与常规提取方法比：(1)超声波提取具有提取温度低等特点，可以避免高温对有效成分的破坏，适合于热敏性物料的提取。(2)提取物的有效成分含量高，有利于进一步的精制。(3)溶媒用量少，可有效降低成本。(4)有效成分的提取率高，原料利用充分，提高经济效益。(5)对大多数有效成分的生理活性基本无影响。黄

24、酮类化和物用传统的有机溶剂加热浸提，时间较长，能源消耗大。采用超声波辅助提取可以加速提取成分的扩散释放，充分与溶剂混合，提高提取效率，且与超临界CO2萃取相比，成本低、投资少、提取效率高。所以研究此种方法对寻求更加有效的黄酮类化和物提取法有较大的帮助。第2章 材料与方法2.1 试验原料、药品及器材2.1.1 试验原料 芹菜叶：购买与安徽省芜湖市鸠江区农贸市场2.1.2 试验药品 芦丁：中国医药(集团)上海化学试剂公司(生化试剂)；无水乙醚，乙醇，NaOH, NaNO2， Al(NO3)3等均为国产分析纯;蒸馏水。2.1.3 试验器材 FC104型电子分析天平；101A-2E型数显电热鼓风干燥箱

25、；FW-100型高速万能粉碎机；KQ-250E超声波清洗器；L-550型台式大容量离心机；分光光度计。2.2 实验步骤2.2.1 芹菜叶的预处理 芹菜叶粉碎按120料液比加无水乙醚40冷凝回流2小时脱脂过滤滤渣干燥后备用。2.2.2 标准曲线的制备及回归方程的建立准确称取芦丁20mg(120烘至恒重),加95%乙醇水溶液50 mL。准确吸取0、1、2、4、6、8、10、12mL于50mL容量瓶中,加12mL 95%的乙醇,加含5% NaNO2水溶液2mL,摇匀静置6min,再加含10% Al(NO3)3水溶液2mL,摇匀静置6min,再加含5% NaOH水溶液20mL,用95%乙醇水溶液稀释至

26、刻度,摇匀,在490510 nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长;在最大吸收波长(510nm)处测定吸光值。以吸收度Y为纵坐标,浓度x为横坐标,进行回归分析,绘制回归曲线。浓度与吸光度有良好的线性关系。得出回归方程:Y=6.363x-0.0119（R2=0.9980）（1）2.2.3 样品总黄酮得率的确定以芹菜叶为原料,经乙醇浸提总黄酮,提取液过滤离心后定容至50mL,每次准确量取1.0mL。代入回归方程(1)中计算,得出提取液中总黄酮含量。总黄酮的得率=C*50/(w*1000)*100 （2）式中：w为样品的质量，单位g；C为提取液中总黄酮的含量，单位mg/mL。2.2.4 单因素试验 选

27、择提取乙醇浓度、超声功率、超声提取温度、料液比、超声提取时间进行单因素试验,考察其对提取率的影响。2.2.5 正交试验根据单因素试验结果,选择超声功率、超声提取温度、料液比、超声提取做4因素3水平正交试验,确定最佳提取条件。正交试验因素和水平见表1。表1正交试验因素和水平表水平A超声波功率/WB提取温度/C料液比/g：mLD超声波时间/min150501:705255601:8010360701:90152.3 稳定性试验 分别取少量芹菜叶黄酮的提取液进行日光、自然光、避光、加热时间、加热温度、pH、Vc的稳定性实验,在510 nm处测其吸光度,根据芦丁标准曲线的回归方程计算总黄酮含量,由此判

28、断芹菜叶黄酮的光及热稳定性。芹菜叶总黄酮保存率(%)(处理后溶液中总黄酮含量/处理前溶液中总黄酮含量)1002.4 提取物中黄酮类物质的鉴定2.4.1 红外光谱扫描 取少量芦丁粉末与少量在最佳提取条件下干燥后的粉末进行压片，进行红外扫描。2.4.2 紫外可见光谱扫描第3章 结果与讨论3.1 单因素试验3.1.1 乙醇浓度对得率的影响准确称取脱脂后的芹菜叶粉末0.5 g,分别加入50mL的水以及不同浓度的乙醇在60下浸提2h过滤,滤液按方程(2)测定总黄酮提取率。实验结果如图所示。结果表明,在较低浓度条件下,随着乙醇浓度的增加,芹菜叶总黄酮的提取率逐渐提升,到65%的乙醇为溶剂时,总黄酮的提取率

29、达到峰值,之后,总黄酮的得率随着乙醇浓度的增加而降低。因此,选择65%乙醇为最佳溶剂浓度。3.1.2 超声波功率对得率的影响准确称取脱脂后的芹菜叶粉末0. 5g，加入40mL65%乙醇,在60下超声功率分别为0、50W、60W、70W、80W、90W和100W时超声提取10min，过滤，滤液按方程(2)测定总黄酮提取率。实验结果如图所示。结果表明随着使用超声波辅助提取,总黄酮的提取率在增加，而到50W之后，总黄酮提取率随着超声功率的增大而降低。因此50W为最佳提取功率。由于试验仪器的影响，最低的超声波提取功率只能设定在50W。3.1.3 超声波时间对得率的影响准确称取脱脂后的芹菜叶粉末0. 5

30、g，加入40mL 65%乙醇,在60、超声功率为60W时分别超声提取5min、10min、20min、30min和40min，过滤，滤液按方程(2)测定总黄酮得率。实验结果如图所示。结果表明，随着时间的增加,总黄酮提取率增加,但在10min时候达到峰值，之后随着时间的增加,总黄酮提取率降低。所以选择10min为最佳的提取时间。3.1.4 提取温度对得率的影响准确称取脱脂后的芹菜叶粉末0. 5 g，加入40mL 65%乙醇,分别在20、40、50、60、70和78下，超声功率为60W时超声提取10min,过滤,滤液按方程(2)测定总黄酮得率。实验结果如图所示。结果表明,超声提取温度为20至60时

31、,总黄酮得率随着温度的升高而增加,而60之后随着温度的升高,总黄酮提取率降低。因此,选择60为最佳的超声提取温度。3.1.5 料液比对得率的影响准确称取脱脂后的芹菜叶粉末0. 5g，分别加入65%乙醇10mL、20mL、30mL、40mL和50mL，在60、超声功率为60W时超声提取10min,过滤,滤液按方程(2)测定总黄酮得率。实验结果如图所示。结果表明,总黄酮提取率随料液比增大而增大,在料液比为180时为最大值,随后减小。3.2 正交试验为了全面考察超声波辅助提取的最佳工艺参数，在单因素实验的基础上,选择65%乙醇为最佳提取溶剂,以超声功率,超声提取温度,料液比和超声提取时间这4种因素进

32、行L9(34)正交试验，确定最优方案，结果见表。从表中极差数据可知,超声功率,超声提取温度,料液比和超声提取时间这4种因素对总黄酮提取率影响的主次顺序为：料液比超声波提取温度超声提取时间超声提取功率，最佳的提取条件为65%乙醇浓度，超声功率为55W，超声提取温度为50，料液比为180，超声提取时间为10min，最佳提取条件下所得的黄酮类化合物的得率为0.221%。试验号ABCD黄酮得率111110.212220.31 3330.421230.522310.623120.731320.832130.933210.K10.0.0.0.K20.0.0.0.K30.0.0.0.k10.0.0.0.k2

33、0.0.0.0.k30.0.0.0.极差R0.0.0.0.因素主 次料液比提取温度超声波提取时间超声波功率最优方案55W50度8010min来源: 虚构数据，仅用作图表示例3.3 稳定性的研究3.3.1 光照对芹菜叶黄酮稳定性的影响分别准确称取3份芹菜叶粉末0.5g，于正交试验最佳提取条件下进行提取，定容后按标准方程测其初始吸光度，并将装有提取液的3支容量瓶，1支置于日光下照射，另2支分别在室内自然光下和暗箱药品柜中放置,每隔1d测其吸光度，共测定4次，并将每天测得的吸光度值与初始吸光度对比分别计算，得出黄酮的保存率含量。由图可知，黄酮提取液在日光、自然光、避光下放置2d，其黄酮提取液保存率分

34、别为93.6%，94.3%，94.3%，放置4d，其黄酮保存率分别为81.5%，87.2%，91.5%。可见，日光对芹菜黄酮稳定性有一定影响,自然光对芹菜黄酮的稳定性影响不大,避光条件下芹菜黄酮的稳定性较好。3.3.2 加热时间对芹菜叶黄酮稳定性的影响准确称取芹菜叶粉末0.5g，于正交试验最佳提取条件下进行提取，定容后按标准方程测其初始吸光度，并将装有提取液容量瓶放在水浴锅中进行加热，分别在20、30、40、50、60、70、80、90测量其吸光度，与初始吸光度对比分别计算，得出黄酮的保存率含量。 由图可知，在2060下，热对芹菜黄酮的稳定性几乎没有影响，在70是保存率为78.3%，在70以上

35、时分解加速，90时保存率为58.9%。说明高温对芹菜黄酮稳定性具有影响。3.3.3 pH对芹菜叶黄酮稳定性的影响以柠檬酸-柠檬酸钠为缓冲体系，研究了不同pH值对芹菜总黄酮热稳定性的影响。实验结果见图。由图可见，芹菜总黄酮的热稳定性随pH值增大而减弱。因此，在利用芹菜总黄酮加工保藏食品时，在食品感官品质允许的情况下，应尽量采用较低的pH值。3.4 黄酮类化合物的鉴定3.4.1 红外扫描光谱芦丁的结构中含有各种具有红外吸收的官能团，其中-OH基团在36503500cm-1处峰形尖，吸收强。当-OH基团浓度大时，波峰移至35003200处，峰形较宽。其中的芳环在16201480cm-1处具有4个波峰

36、，15001480 cm-1最强，16201590 cm-1其次，1580 cm-1较弱，450 cm-1常观测不到。-C=O基团在16001850 cm-1具有吸收峰。-CH基团在27003000 cm-1具有吸收峰。由图像可知，在32003500 cm-1处，具有较强的吸收值且波形较宽，说明有大量-OH基团存在。在14711519 cm-1处具有一个明显的吸收峰，说明物质中含有芳环。在18562956 cm-1处有一个较小的吸收峰，说明有-CH键的存在。在1647 cm-1处具有一个吸收峰，说明有-C=O基团存在。图中粗品的曲线的吸收峰在32003500 cm-1处、14711519 cm

37、-1处、18562956 cm-1处、1647 cm-1处同样出现，但峰形并没有芦丁曲线尖，说明次样品中含有黄酮类物质。由图像可知，图中正交后的曲线在32003500 cm-1处、14711519 cm-1处、18562956 cm-1处、1647 cm-1处仍然出现波峰，说明正交后样品中含有黄酮类物质，并且在正交干燥后的样品中的黄酮已经被提取走，较原先的含量已明显减少，证明超声波辅助提取技术有效的增加的黄酮类物质的提取含量。1、标题层次毕业设计（论文）的全部标题层次应有条不紊，整齐清晰。相同的层次应采用统一的表示体例。章节编号方法应采用分级阿拉伯数字编号方法，第一级为“第1章”、“第2章”、

38、“第3章”等，第二级为“2.1”、“2.2”、“2.3”等，第三级为“2.2.1”、“2.2.2”、“2.2.3”等，两级之间用下角圆点隔开，每一级的末尾不加标点，后空一格书写标题。分级以少为宜，根据实际需要选择。层次要求统一，但若节下内容无需列条的，可直列款、项。层次用到哪一层次视需要而定。标题书写：各层标题均单独占行书写。第一级标题（章）用小3号宋体字加粗、居中；第二级标题（节）用小4号黑体字、居左顶格书写；第三级标题用小4号宋体字、居左顶格书写。正文与参考文献正文用小4号宋体字；图表字号采用5号宋体字。2、标点符号毕业设计（论文）中的标点符号应按新闻出版署公布的“标点符号用法”使用。3、

39、引用文献引用文献标示方式应全文统一，并采用所在学科领域内通用的方式，置于所引内容最末句的右上角，用小5号宋体字。所引文献编号用阿拉伯数字置于方括号中，如：“成果1”。当提及的参考文献为文中直接说明时，其序号应该用小4号字与正文排齐，如“由文献2,68可知”。不得将引用文献标示置于各级标题处。4、名词、名称科技名词术语及设备、元件的名称，应采用国家标准或部颁标准中规定的术语或名称。标准中未规定的术语要采用行业通用术语或名称。全文名词术语必须统一。一些特殊名词或新名词应在适当位置加以说明或注解。采用英语缩写词时，除本行业广泛应用的通用缩写词外，文中第一次出现的缩写词应该用括号注明英文全文。外国人名

40、一般采用英文原名，按名前姓后的原则书写。一般很熟知的外国人名（如牛顿、达尔文、马克思等）可按通常标准译法写译名。5、量和单位量和单位必须采用中华人民共和国的国家标准GB3100GB3102-93。非物理量的单位，如件、台、人、元等，可用汉字与符号构成组合形式的单位，例如：件/台、万元/km、万tkm等。6、外文字母的正、斜体用法按照GB3100GB3102-86及GB7159-87的规定，即物理量符号、物理常量、变量符号用斜体。计量单位等符号均用正体。7、数字毕业设计（论文）中的测量统计数据一律用阿拉伯数字，但在叙述不很大的数目时，一般不用阿拉伯数字，如“八颗小行星”、“三力作用于一点”，不宜

41、写成“8颗小行星”、“3力作用于1点”。大约的数字可以用中文数字，也可以用阿拉伯数字，如“约一百二十人”，也可写成“约120人”。8、注解毕业设计（论文）中有个别名词或情况需要解释时，可加注说明，注解可用页末注（将注文放在加注页的下端）或篇末注（将全部注文集中在文章末尾），而不可行中注（夹在正文中的注）。9、公式公式应居中书写，公式的编号按章编排，用圆括号括起放在公式右边行末，公式和编号之间不加虚线。10、插表插表的表序一般按章编排，如第一章第一个插表的序号为“表1-1”等。表序与表名之间空一格，表名中不允许使用标点符号，表名后不加标点。表序与表名置于表上，表序、表名、表格内容均用5号宋体字居

42、中书写。表头设计应简单明了，尽量不用斜线。全表如用同一单位，将单位符号移至表头右上角，加圆括号。表中数据应正确无误，书写清楚。数字空缺的格内加“”字线（占2个数字），不允许用“”、“同上”之类的写法。表内文字说明，起行空一格、转行顶格、句末不加标点。表格位于正文中引用该表格字段的后面。11、插图插图应与文字紧密配合，文图相符，内容正确。选图要力求精练。每个图均应有图题（由图号和图名组成）。图号按章编排，如第一章第一图的图号为“图1-1”等。图号和图题应放在图位下方居中处。图题和图内均用5号宋体字书写。图名在图号之后空一格排写。引用图应说明出处，在图题右上角加引用文献号。图中若有分图时，分图号用

43、a)、b)等置于分图之下。插图与其图题为个整体，不得拆开排写于两页。插图处的该页空白不够排写该图整体时，可将其后文字部分提前排写，将图移至次页最前面。有数字标注的坐标图，必须注明坐标单位。照片图均应是原版照片粘贴，不得采用复印方式。照片可为黑白或彩色，应主题突出、层次分明。清晰整洁。反差适中。照片采用光面相纸，不宜用布纹相纸。插图不得采用复印件，不得徒手画。对于复杂的引用图，可采用数字化仪输入计算机打印出来的图稿。12、页眉页脚设置页眉：奇数页书写“安徽工程科技学院毕业设计（论文）”，用宋体小五号书写；偶数页书写“学生姓名：课题题目”，用宋体小五号书写。页脚：页码居中，形式为“-1-”，用Ti

44、mes New Roman字体小五号书写。（用时请连此提示一起删除红色提示）结论与展望结论本实验获得了超声波法提取芹菜叶中黄酮类化合物的最优预处理及提取条件。回顾近两个月的实验工作，从把新鲜的芹菜叶制成粉末，再经进一步提取得到黄酮类物质，从单因素实验一直到正交实验，这其中的每一步都是至关重要的，来不得半点虚假。现在实验已经结束了，实验结果是最能证明实验效果的。在本次研究中，综合上述实验结果及图表分析可知，超声波辅助提取芹菜叶中黄酮类化合物的最优工艺条件并最终确定最佳工艺条件为:乙醇浓度为65%,超声功率为55W,超声提取温度为50,料液比为180,超声提取时间为10min,采用该最佳提取工艺,

45、总黄酮的得率可达0.221%。各种因素对提取效果影响的主要顺序依次为：料液比提取温度超声波时间超声波功率。通过方差分析检验可知，料液比对黄酮类化合物的提取影响最为显著。采用超声波辅助提取芹菜叶中黄酮类化合物，可大大缩短提取时间，避免因提取时间过长而造成的黄酮氧化损失，提取率较高、成本低、投资少、适宜大规模工业化生产。展望目前，人们越来越重视保健食品，注重天然植物的活性成分对疾病的预防作用，更注重饮食对健康的重要性。鉴于黄酮类化合物对人体具有重要的生理功能，黄酮的提取就显得日益重要。黄酮类化合物作为非常有前途的功能性天然抗氧化剂，加上其具有资源丰富，安全无毒等优点，对人体保健有十分重要的意义，其

46、价值也在不断受到人们的关注，无论是作为医药产品还是食品添加剂，都具有很大的市场潜力。但是如将其作为人体食用的物质，提取出的黄酮类化合物的安全性必须引起人们的注意。目前，有机溶剂提取难免会在成品黄酮类化合物中有残留，大多有机溶剂都是对人体有害的。因此，在成品的最后精致过程中要制定标准的测定方法，保证它的安全性。要求作者根据设计实验过程中所获得全部材料，经过分析、判断、归纳等逻辑处理，得出正确的学术观点、总的见解，结论必须准确、完整、扼要地表明以下内容：1）通过本课题找到了什么规律，解决了什么理论和实际工程上技术问题；2）对前人相关的看法和做法作了何修正、补充、创新、证实与否定；3）本课题存在的不足及其完善的可能方向；4）本课题继续开展工作的价值。论文的结论与展望应单独作为一章排写，但不加章号。内容一般在2000字以内。（用时请连此提示一起删除红色提示）致 谢本实验是在黄晓东导师的悉心指导下完成的。在此论文完成之际，首先致以最诚挚的谢意！大学四年来，黄老师渊博的专业知识、严谨的治学态度、开朗的性格以及和蔼友善的待人深深的影响着我，这将是一笔精神财富让我终身受益。在论文的选题、试验方案的设计、试验结果的分析讨论、论文的撰写、审阅和定稿都倾注了导师的大量心血和时间，并指出很多错误之处，提出了具体的改进意见。特别是在论文审