全自动生化培训1

1、基础知识培训基础知识培训全自动生化分析仪全自动生化分析仪临床基础知识：临床基础知识： 1、生化项目的分类（临床性质）、生化项目的分类（临床性质） 肝功能肝功能 肾功能肾功能 心肌酶谱心肌酶谱 糖尿病糖尿病 胰腺炎胰腺炎 血脂血脂 痛风痛风 免疫性疾病免疫性疾病 2、生化项目的分类（化学性质）、生化项目的分类（化学性质） 酶类酶类 底物代谢类底物代谢类 无机离子类无机离子类 特种蛋白类特种蛋白类ALT谷丙转氨酶谷丙转氨酶 ：分布于人体脏器，肝：分布于人体脏器，肝肾肾心心肌肉肌肉 大部大部分分布于肝内，血液内，红细胞含分分布于肝内，血液内，红细胞含ALT较多，故若肝脏有问较多，故若肝脏有问题，或者

2、样本溶血，往往能导致题，或者样本溶血，往往能导致ALT偏高。偏高。ALT只有偏高至只有偏高至少少2倍以上时，才有临床指导意义。急性肝炎能造成几十倍倍以上时，才有临床指导意义。急性肝炎能造成几十倍的偏高。的偏高。溶血：表现为红细胞破裂，溶解在血清中，导致血清显示为溶血：表现为红细胞破裂，溶解在血清中，导致血清显示为淡淡的红色，往往能造成大多数项目的偏高。淡淡的红色，往往能造成大多数项目的偏高。AST天门氨酸氨基转移酶：肝脏损坏容易导致天门氨酸氨基转移酶：肝脏损坏容易导致AST偏高，肝偏高，肝炎发病早期，由于肝炎发病早期，由于肝AST含量高，往往血清含量高，往往血清AST/ALT1,但但由于由于A

3、LT清除较慢，所以不久清除较慢，所以不久ALTAST,恢复期一般也是恢复期一般也是ALT恢复较慢。恢复较慢。ALT和和AST持续升高，往往是慢性肝炎的指持续升高，往往是慢性肝炎的指标。标。TBIL血清总胆红素血清总胆红素DBIL血清直接胆红素：总胆和直胆多用血清直接胆红素：总胆和直胆多用于黄疸的诊断和黄疸性质的鉴别，明显溶血对血清总胆测定于黄疸的诊断和黄疸性质的鉴别，明显溶血对血清总胆测定有负干扰，脂浊对其有正干扰。一般我们凭肉眼可以观察血有负干扰，脂浊对其有正干扰。一般我们凭肉眼可以观察血清是否呈明显的金黄色，一般呈金黄色总胆和直胆都会明显清是否呈明显的金黄色，一般呈金黄色总胆和直胆都会明显

4、偏高。偏高。因为总胆和直胆试剂容易受光线影响，初始吸光度发生变化，因为总胆和直胆试剂容易受光线影响，初始吸光度发生变化，这样会直接导致总胆和直胆测值很低或者负数，因此建议每这样会直接导致总胆和直胆测值很低或者负数，因此建议每天做总胆和直胆的试剂空白，或者适当加大样本量，也可以天做总胆和直胆的试剂空白，或者适当加大样本量，也可以减少此现象的产生。减少此现象的产生。TP总蛋白：各种原因失水所致的血液浓缩，多发性骨髓瘤，总蛋白：各种原因失水所致的血液浓缩，多发性骨髓瘤，以及一些感染等会造成总蛋白的升高。而比如严重烧伤，营以及一些感染等会造成总蛋白的升高。而比如严重烧伤，营养不良，肝细胞病变和肝功能受

5、损造成的蛋白合成障碍会导养不良，肝细胞病变和肝功能受损造成的蛋白合成障碍会导致致TP偏低。黄疸，溶血，脂血都可使结果偏高。偏低。黄疸，溶血，脂血都可使结果偏高。在外曾经碰到过这样的情况，在吸完在外曾经碰到过这样的情况，在吸完TP试剂后，造成下一个试剂后，造成下一个项目误检液面，原因为项目误检液面，原因为TP的的R1浓度较高，而清洗不够，造浓度较高，而清洗不够，造成挂壁，此现象可以适当减小试剂量。成挂壁，此现象可以适当减小试剂量。ALB白蛋白：脱水所致的血液浓缩等会导致白蛋白白蛋白：脱水所致的血液浓缩等会导致白蛋白的升高，大量出血与严重烧伤，营养不良等则会导的升高，大量出血与严重烧伤，营养不良等

6、则会导致白蛋白的偏低。致白蛋白的偏低。TBA总胆汁酸：急性肝炎时能导致总胆汁酸：急性肝炎时能导致TBA显著偏高，显著偏高，可达正常人的十到百倍，酒精性肝病严重损伤肝时，可达正常人的十到百倍，酒精性肝病严重损伤肝时，也会导致也会导致TBA明显偏高。当胆管阻塞造成胆汁分泌明显偏高。当胆管阻塞造成胆汁分泌减少时，减少时，TBA明显偏高。明显偏高。Cr肌酐：当肾功能明显受损时，可导致肌酐的偏高，肌酐：当肾功能明显受损时，可导致肌酐的偏高，并且肌酐的浓度不易受外界因素的影响。并且肌酐的浓度不易受外界因素的影响。UA尿酸：白血病，红细胞增多症，溶血性贫血，肝尿酸：白血病，红细胞增多症，溶血性贫血，肝功能受

7、损等容易造成功能受损等容易造成UA偏高。尿酸受其它因素影响偏高。尿酸受其它因素影响较大，多数抗凝剂都对它的测值有影响，最好用肝较大，多数抗凝剂都对它的测值有影响，最好用肝素抗凝剂。素抗凝剂。GLU血糖：饭后血糖：饭后1-2小时，往往血糖浓度能迅速增高，小时，往往血糖浓度能迅速增高，病理性高血糖往往见于内分泌腺功能障碍，脱水，病理性高血糖往往见于内分泌腺功能障碍，脱水，麻醉，感染性疾病等。病理性的血糖偏低见于见于麻醉，感染性疾病等。病理性的血糖偏低见于见于抗胰岛素的激素分泌不足，严重肝病。长时间未进抗胰岛素的激素分泌不足，严重肝病。长时间未进食也可导致血糖偏低。食也可导致血糖偏低。血糖样本应该抽

8、血后及时测定，白细胞本身会分解血糖样本应该抽血后及时测定，白细胞本身会分解血清中的糖，以及血清中的一些酶也会缓慢的分解血清中的糖，以及血清中的一些酶也会缓慢的分解糖。糖。样本保存要求：样本保存要求：（1）Tbil、Dbil不稳定，光照易变性，应避光保存不稳定，光照易变性，应避光保存（2）Glu易被易被WBC等利用，应在采样后的半小时内等利用，应在采样后的半小时内分离出血清分离出血清（3）避免反复冻溶质控血清，否则酶的活性会下降）避免反复冻溶质控血清，否则酶的活性会下降（4）冻干质控血清复溶后，）冻干质控血清复溶后，ALP要半小时后才稳定要半小时后才稳定 试剂保存要求：试剂保存要求：（1）Ca、

9、Mg试剂易受污染，应每日调配试剂易受污染，应每日调配（2）Cr（苦味酸法）试剂只能稳定（苦味酸法）试剂只能稳定2天，应定期调天，应定期调配配（3）Tbil、Dbil试剂（试剂（J-G法）只能稳定法）只能稳定2天，应定天，应定期调配期调配双试剂的优点：扣除样本空白的影响（R1多为缓冲液，R2多为启动试剂）去除内源性干扰物质（R1含与内源性干扰物质反应的物质，R2为启动试剂）使用方便，不易造成浪费注意：基本所有的双试剂都可以配成工作液当成单试剂使用，但工作液往往稳定性不是特别好，一般只是试剂位不够，而又不想太麻烦的情况下使用。临床应用篇临床应用篇项目参数设置要点（1）反应液总体积：180ul250

10、ul之间最佳（2）两点法的项目：Cr（苦味酸法）、UREA（脲酶法）（3）反应方向为下降的项目：ALT、AST、UREA、LDH（PL）、Tbil （氧化法）、Dbil(氧化法)（4）动力学法项目，反应起止时间不要少于6个点（5）反应时间长的项目：TP、Glu、Chol、TG、UA，10分钟（6）CK和CK-MB：延迟时间要5分钟以上（反应起点相应地往后推）（7）Tbil、Dbil（J-G法）：加大样本量（8）正常浓度下，反应幅度超过10000的比浊法项目，减少样本量涉及生化的一些基本定义：涉及生化的一些基本定义： 吸光度定义吸光度定义IoItIoItLgA为透光率为透光率Lamber-Bee

11、r定律定律 溶液的吸光度等于该物质的吸光系数溶液的吸光度等于该物质的吸光系数、浓度浓度C和光径和光径L的乘积的乘积 A= CL 测定方法测定方法 终点法 两点法 动力学法终点法的定义终点法的定义 反应进行得很彻底，全部被测物都转变成被监控的产物，反应液的吸光度不再增加（或降低），且反应前后吸光度的增加（或降低）量与被测定物的初始浓度成正比。反应曲线反应度计算反应度计算 反应幅度=终点的吸光度（起点吸光度体积校正因子）动力学法定义动力学法定义 在特定的反应时间段内，反应速度达到最大（Vmax）且维持不变，反应物以最大速度、匀速地生成被监控的产物，表现为吸光度均匀地减小或增加，减小或增加的速度（A

12、/t）与被测物的活性或浓度成正比，主要用于酶活性的测定。动力学法的反应曲线反应度的计算反应度的计算 反应幅度=起点和终点间吸光度的变化率 两点法定义 在特定的反应段内，反应速度与被测物浓度的一次方成正比，由于被测物在不断的消耗，因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸光度的增加（或降低）速度（A/t）越来越小，且在该段时间内，吸光度的增加（或降低）量与被测定物的初始浓度成正比。两点法反应曲线反应度的计算 反应幅度反应幅度=终点的吸光度起点吸光度终点的吸光度起点吸光度 定标的定义和方法 定标，又称为校准，分为线性和非线性定标两大类。其中线性定标又包括单点、两点和多点线性定标，主要适用于反应液为溶液的项目；非线性定标主要包括Log it-4P、L