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1、课题2 2 月季的花药培养 一、基础知识（一）被子植物的花粉发育（一）被子植物的花粉发育花瓣雄蕊雌蕊花萼花托花柄柱头花柱子房花药花丝雄蕊雌蕊 花粉是由花粉母细胞经过减数分裂减数分裂形成的，是单倍体的生殖细胞。 被子植物花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段。（花粉母细胞）（花粉母细胞）减数减数分裂分裂有丝有丝分裂分裂营养细胞营养细胞（控制花粉萌发，提供营养）（控制花粉萌发，提供营养）生殖细胞生殖细胞有丝分裂有丝分裂2个精子个精子（小孢子（小孢子四分体时期）四分体时期）彼此彼此分离分离（一）被子植物的花粉发育（一）被子植物的花粉发育（双核期）（双核期）（二）产生花粉植株的两种途径

2、（二）产生花粉植株的两种途径花药中的花粉花药中的花粉胚状体愈伤组织丛芽丛芽脱分化脱分化分化再分化生根移栽诱导幼小植株形成之后才需要光照 两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。（三）影响花药培养的因素（三）影响花药培养的因素1、材料的选择、材料的选择 采集花药：月季的初花期初花期花粉发育时期：一般选单核期单核期， 细胞核由中央移向细胞一侧的时期；花蕾：完全未开放的花蕾 （易选到单核期的花药） 主要是材料的选择和培养基的组成2、培养基的组成、培养基的组成3、其他因素：、其他因素： 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等MS培养基相应的激素二、实验操作二、

3、实验操作（一）材料的选取（一）材料的选取1. 选择花药时，一般通过镜检来确定花粉是否处于适宜的发育期。2. 最常用的方法有醋酸洋红法，将花粉细胞核染成红色。3. 某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。（二）材料的消毒（二）材料的消毒1、花蕾用体积分数70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）5、无菌水冲洗35次 (用于培养的花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。)（三）接种和培养（三）接种和培养1. 1. 剥离花药剥离花药（尽量不损伤花药）（尽量不损伤花药）2. 2. 接种接种（每瓶（每瓶710710个）个）4. 4. 分化培养基培养分化培养基培养5. 5. 鉴定和筛选鉴定和筛选

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