新课动物细胞融合与单克隆抗体PPT学习教案

1、会计学1新课动物细胞融合与单克隆抗体新课动物细胞融合与单克隆抗体植物细胞A植物细胞B去除细胞壁去除细胞壁原生质体A原生质体B诱导融合融合的原生质体再生出细胞壁杂种细胞细胞分裂（脱分化）分化发育（再分化）愈伤组织杂种植株原生质体的制备原生质体的融合筛选组织培养第1页/共28页1、如果让动物细胞进行融合/杂交，应注意动、植物之间的哪些区别？无细胞壁全能性受限制，不能发育成杂种动物动物细胞融合与植物细胞杂交的不同： 无需去除细胞壁 不能培养成新的动物个体第2页/共28页 细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合 受精作用第3页/共28页A细胞B细胞人工诱导1.1动物细胞融合的概念杂交细胞 动物细胞融

2、合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。一、动物细胞融合第4页/共28页细胞膜的流动性灭活病毒、PEG、电激等融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞诱导的手段？融合后细胞的类型？AB杂种细胞遗传物质有什么特点？三种AA、AB、BB（A、B）含两种生物的遗传物质1.2动物细胞融合过程原理？第5页/共28页 第6页/共28页1.2动物细胞融合过程 为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性保留融合活性第7页/共28页但并不破坏这些病原体的抗原但并不破坏这些病原体的抗原结构。结构。第8页/共28页意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之

3、间）成为可能。 这一项技术成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。应用：最重要的用途是：制备单克隆抗体第9页/共28页比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理细胞膜的流动性、植细胞膜的流动性、植物细胞全能性物细胞全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合细胞融合的方法的方法去处细胞壁后诱导原去处细胞壁后诱导原生质体融合生质体融合使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合诱导方法诱导方法 物理（离心、振荡、物理（离心、振荡、电刺激）电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒（灭活的

4、病毒（P52）用途用途获得杂种植株获得杂种植株制备单克隆抗体制备单克隆抗体第10页/共28页小结：一、动物细胞融合（细胞杂交）1.概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2.结果：形成含有2或多个细胞遗传物质的单核杂交细胞3.融合原理：细胞膜的流动性4.诱导方式物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒5.意义：突破有性杂交局限，使远缘杂交成为可能广泛应用多个领域重要用途：第11页/共28页抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。二、单克隆抗体第12页/共28页抗体的传统生产方法：从血清中分离抗体该法制备抗体的特

5、点（缺陷）： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。多种效应B细胞动物体内多种抗体抗原 抗原 动物体刺激浆细胞 抗体抗体不纯抗原不纯反复注射第13页/共28页读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。2.1单克隆抗体的概念 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体第14页/共28页 科学家的设想：克隆（无性繁殖）单一的B淋巴细胞，形成细胞群，产生大量高纯度抗体。存在的困难：

6、体外培养的B淋巴细胞不可无限增殖问题1：哪种细胞可以无限增殖呢？ 骨髓瘤细胞问题2：怎样让细胞既能大量繁殖，又能产生专一抗体呢？ B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,制备单克隆抗体怎样获得大量高纯度抗体呢？第15页/共28页一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞第16页/共28页为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ 会有几种融合方式？ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？第17页/共28页BB

7、 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞(多孔培养板)第18页/共28页 用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。） 细胞融合技术、动物细胞培养技术第19页/共28页单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体

8、制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 第20页/共28页诊断试剂最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。第21页/共28页主要用于癌症治疗瞄准癌细胞的生物导弹优势：既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。第22页/共28页两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势第23页/共28页BBA第24页/共28页C C骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞D D杂交瘤细杂交瘤细胞胞AD第25页/共28页D D筛选杂交细胞，并从中选出能产筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体单克隆抗体B第26页/共28页B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC 7.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案制备单克隆抗体 不能，没有注射抗原，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。(1)该