维生素类药物含量测定

1、药品检验技术课程单元教学设计情境：维生素类药物的分析（09） 任务：维生素类药物含量测定(04) 教学目标设计序号5上课地点理实一体化教室授课形式讲授、学生操作练习教 学 目 标技能目标知识目标能够依据药典，对维生素B1进行检验、对维生素C进行检验、对维生素E进行检验。维生素类药物含量测定及方法教 学 重 点维生素B1的含量测定、维生素C的含量测定、维生素E的含量测定教 学 难 点同学们能过根据药典对维生素类药物含量进行测定能力训练任务及案例同学们根据药典对维生素类药物进行检验，通过实验研究同学们更好的掌握了维生素类药物测定原理和操作技能教学进程设计（下面各格均可合并）步骤教学内容教学方法教学

2、手段学生活动时间分配基础知识讲解维生素类药物的检查方法及原理教师举例、点评、归纳概括引出知识点。任务引导同学们做好课堂笔记，掌握课堂重点20分钟案例分析维生素E的含量测定同学们分组实验研究25分钟维生素B1含量测定中国药典中，用非水滴定法测定原料药，用紫外分光光度法测定片剂及注射液。1非水滴定法（1）原理 维生素B1分子中含有两个碱性的已成盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中（在醋酸汞存在下），均可与高氯酸作用。根据滴定过程中所消耗高氯酸的量即可计算维生素B1的含量。（2）方法 取本品约0.12g，精密称定，加冰醋酸20mL微热使溶解，放冷至室温，加醋酐30mL，照电位滴定法（附录 A），用高氯酸

3、滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于16.86mg的 C12H17ClN4OSHCl。（3）计算含量（%）= （10-1）式中，V样品测定所消耗滴定液的体积，mL；V0空白试验所消耗滴定液的体积，mL；T滴定度，其值为16.86mg/mL；F浓度换算因数；W取样量，g。2紫外分光光度法（1）原理 维生素B1结构中含有共轭体系，具有紫外吸收，其盐酸溶液的最大吸收波长为246nm，可用于含量测定。中国药典中收载的维生素B1片剂及注射液，均采用本法测定含量。（2）维生素B1片的测定方法。取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量

4、（约相当于维生素B125mg），置100mL量瓶中，加盐酸溶液（91000）约7mL，振摇15分钟使维生素B1溶解，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5mL，置另一100mL量瓶中，再加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录 A），在 246nm的波长处测定吸光度，按C12H17ClN4OSHCl的吸收系数（）为421计算，即得。计算。含量占标示量百分率(%)= （10-2）式中，A供试品溶液的吸光度；吸收系数；W称取样品量，g；平均片重，g；式中，标示量的单位为mg/片。（3）维生素B1注射液的测定方法。精密量取本品适量（约

5、相当于维生素B150mg），置200mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置100mL量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度。照紫外-可见分光光度法（附录 A），在246nm的波长处测定吸光度，按C12H17ClN4OSHCl的吸收系数（）为421计算，即得。计算。含量占标示量百分率(%)= （10-3）式中，A供试品溶液的吸光度；吸收系数；V取样量，mL； 式中，标示量的单位为mg/mL。维生素C含量测定维生素C的含量测定大多是基于其具有较强的还原性，可被不同氧化剂定量氧化。因容量分析法（滴定分析法）简便、快速，结果准确，被各国药典所采用，如碘量法、2,6-二氯靛酚法等。此外

6、，维生素C的含量测定方法还包括荧光分析法、分光光度法、电位滴定法、高效液相色谱法等。1碘量法（1）原理 维生素C在醋酸酸性条件下，可被碘定量氧化。反应式如下： 当用碘滴定液滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C被完全氧化，过量的碘可使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。根据所消耗碘滴定液的体积，即可计算维生素C的含量。（2）方法 取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100mL与稀醋酸10mL使溶解，加淀粉指示液1mL，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30秒钟内不褪。每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806

7、mg的C6H8O6。（3）注意事项滴定须在醋酸酸性溶液中进行。因在酸性溶液中，可延缓空气中的氧气氧化维生素C的速度。但样品溶于稀酸后仍需立即进行滴定。加新沸过的冷水目的是减少水中溶解的氧气对测定的影响。中国药典中，维生素C原料药、片剂、颗粒剂、沸腾片及注射液的含量测定，均采用本法。为消除制剂中辅料对测定的干扰，滴定前须进行必要的处理。如，片剂溶解后应滤过，取续滤液进行测定；注射液测定时，需加入2mL丙酮，以消除抗氧剂NaHSO3的干扰。22,6-二氯靛酚法（1）原理 维生素C可在酸性溶液中，用2,6-二氯靛酚标准液滴定，至溶液显玫瑰红色时即为终点。根据所消耗2,6-二氯靛酚标准液的体积，即可计

8、算维生素C的含量。（2）方法（以维生素C注射液为例） 精密量取本品适量（约相当于维生素C 50mg），置100mL量瓶中，加偏磷酸-醋酸试液20mL，用水稀释至刻度，摇匀；精密量取稀释液适量（约相当于维生素C 2mg）置50mL锥形瓶中，加偏磷酸-醋酸试液5mL，用2,6-二氯靛酚滴定液滴定至溶液显玫瑰红色，并持续5s不褪色；另取偏磷酸-醋酸试液5.5mL，加水15mL，用2,6-二氯靛酚滴定液滴定，作空白试验校正。以2,6-二氯靛酚滴定液对维生素C滴定度计算，即可。（3）注意事项 快速滴定可减少干扰组分的影响。该方法非维生素C的专属反应，其它还原性物质的存在对测定有干扰。但相比较而言，维生素

9、C的氧化速度要快于其它组分，故宜快速滴定。2,6-二氯靛酚滴定液不宜长时间保存。由于2,6-二氯靛酚滴定液不够稳定，贮存时易缓慢分解，故2,6-二氯靛酚滴定液不宜长时间保存，其浓度最好在用前标定。本法的专属性优于碘量法，常用于含维生素C的制剂及食品的分析。维生素E含量测定气相色谱法维生素E的含量测定方法很多，包括气相色谱法、高效液相色谱法、荧光分光光度法、铈量法、比色法等。中国药典采用气相色谱法测定维生素E的含量，该法简便、快速、专属性强，特别适合于维生素E制剂的分析。维生素E的沸点为350，虽然很高，但仍可不经衍生化直接用气相色谱法测定其含量。该法具有高选择性，可分离维生素E及其异构体，故可选择性测定维生素E的含量。测定时采用内标法，使测定更简便，定量结果与进样量无关，操作条件变化时对测定结果影响很小。1色谱条件载气为氮气；以硅酮（OV-17）为固定相，涂布于经酸洗并硅烷化处理的硅藻土或高分子多孔微球（80100目）上，涂布密度为2%，或以HP-1毛细管柱（100二甲基聚硅氧烷）为分析柱；柱温为265；进样口温度应高于柱温3050；检测器采用氢火焰离子化检测器。2系统适用性试验理论塔板数（n）按维生素E峰计算应不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱）；维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。3校正因子的测定取正三十二烷适量，加正己烷溶解并稀释成每1mL中含1.