生物安全管理培训

1、 中国北京实验人员感染非典病毒事故中国北京实验人员感染非典病毒事故 2004年4月中国疾病控制中心病毒所腹泻 病毒室两名进修生在做病毒实验时感染 sars 病毒 事故调查： 事故起因系该所实验人员多次违规将未完 全灭活的sars病毒从P3实验室带出至普通 实验室操作而引起（时间与患者发病相吻 合）。 病原微物分类 病原微生物实验室生物安全管理条例 第七条 根据病原微生物的传染性、感染后对个体 或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类： 第一类病原微生物 第二类病原微生物 第三类病原微生物 第四类病原微生物 第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原 微生物。 生物安全实验室分类 第十八条 国家

2、根据实验室对病原微生物的生物安全防护水 平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将 实验室分为一级、二级、三级、四级。 一级防护级别最低，四级防护级别最高。 人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录 其中病毒有多少种危害程度分类是属于第其中病毒有多少种危害程度分类是属于第 一类的？一类的？ 种种 种种 病毒中危害程度为第一类的，其中有多少种病毒中危害程度为第一类的，其中有多少种 灭活材料的操作可以在实验室内灭活材料的操作可以在实验室内 操作？操作？ n第二类种第二类种 n种未经培养的感染材料的操作都可以种未经培养的感染材料的操作都可以 在实验室内开展在实验室内开展。 n种灭活材料的操作

3、可以在种灭活材料的操作可以在 实验室内操作。实验室内操作。 n（除了哪一种？）（除了哪一种？） n n新加坡实验人员感染非典病毒事故原因？新加坡实验人员感染非典病毒事故原因？ 2003年年7月新加坡国立大学一位研究生月新加坡国立大学一位研究生 在做病毒实验时因安全程序处理不当而感在做病毒实验时因安全程序处理不当而感 染。（该实验室曾保存染。（该实验室曾保存SARS 病毒）病毒） nDR AI Ee Ling n事故调查：事故调查： 1 硬件条件不具备硬件条件不具备 在仅有二级生物安全设备的实验室设立更具危在仅有二级生物安全设备的实验室设立更具危 险性的病毒实验。险性的病毒实验。 2实验安全程序

4、不合理在同一时间处理多种不实验安全程序不合理在同一时间处理多种不 同活性病毒研究，增加了生物安全方面的复同活性病毒研究，增加了生物安全方面的复 杂程度。杂程度。 3 实验人员安全意识不高实验人员安全意识不高 多个单位共用该设备，人员素质差异。多个单位共用该设备，人员素质差异。 2003年年12月台湾一位实验人员在月台湾一位实验人员在 P3 实验室实验室 做病毒实验时，因清理废弃物操作疏忽，安全做病毒实验时，因清理废弃物操作疏忽，安全 程序处理不当而感染病毒。程序处理不当而感染病毒。 台湾实验人员感染非典病毒事故原因台湾实验人员感染非典病毒事故原因 浙江省疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心

5、顾华顾华 TelelMail:Mail: 二级生物安全示范实验室建设二级生物安全示范实验室建设 介绍主要内容 n一、二级生物安全示范实验室建设说明 n二、二级生物安全示范实验室建设基本要求 n一、二级生物安全示范实验室建设说明 nBSL-2实验室适用于一些对个体危害中等、群体危害有 限的病原微生物或生物感染因子的实验操作。 n所操作的这些病原微生物或生物感染因子是对人体、 动物或环境具有中等危害或具有潜在危险的，但对健 康成人、动植物和环境不会造成严重危害，而且对这 些病原微生物具有有效预防措施和治疗措施的。 n我国卫生部颁发的人间传

6、染的病原微生物名录中 的规定部分高致病性病原微生物的某些低风险实验检 测工作也可以在二级生物安全实验室内操作。 n病原微生物实验室生物安全管理条例（国务院令 第424号） n生物安全实验室建筑技术规范（GB50346-2004） n实验室生物安全通用要求（GB 194892004） n卫生部人间传染的病原微生物名录 n浙江省二级生物安全实验室技术规范（试行） n等有关技术规范和文件 n参考WHO及国外实验室建设标准 二级生物安全实验室规范建设与管理工作依据 基本BSL-2实验室 建设有生物安全实验室的单位共有826家 医疗机构医疗机构 701701 疾病预防控制机构疾病预防控制机构 10110

7、1 大专院校大专院校 1 1 科研院所科研院所 4 4 独立检验机构独立检验机构 5 5 企业企业 4 4 出入境检验检疗机构出入境检验检疗机构 2 2 其他其他 8 8 截止2008年9月全省实验室网上备案系统 显示: 共有1171家实验室在网上进行了备案， 其中： BSL-1实验室366家 BSL-2实验室805家 BSL-3实验室1家 2007年全省现场调查二级生物安全实验室情况 n调查浙江A、B、C三个市，每个市调查1 家市级和县级疾病预防控制中心，1家市 级和县级医院，每个单位调查一个二级 生物安全实验室，共调查12个生物安全 二级实验室。 1、基本建设情况 表1 实验室建设情况汇总

8、表 实验室建设情况实验室建设情况 有（数量）有（数量）所占比例（）所占比例（）无（数量）无（数量）所占比例（）所占比例（） 定向气流定向气流2 216.6716.67101083.3383.33 门禁装置门禁装置1 18.338.33111191.6791.67 可自行关闭门可自行关闭门0 00 01212100100 可视窗可视窗6 650506 65050 防节肢、啮齿动物设施防节肢、啮齿动物设施4 433.3333.338 866.6766.67 窗户是否可开闭窗户是否可开闭111191.6791.671 18.338.33 窗户是否有纱窗户是否有纱4 436.3636.367 763.

9、6463.64 生物安全标识生物安全标识101083.3383.332 216.6716.67 工作状态显示灯工作状态显示灯1 18.338.33111191.6791.67 暗中可辨逃生标识暗中可辨逃生标识2 216.6716.67101083.3383.33 墙面耐化学和消毒剂腐蚀墙面耐化学和消毒剂腐蚀8 866.6766.674 433.3333.33 台面耐化学和消毒剂腐蚀台面耐化学和消毒剂腐蚀111191.6791.671 18.338.33 2、装备情况 表2 实验室装置情况汇总表 实验室装置实验室装置 有有 （数量）（数量） 所占比例所占比例 （）（） 无无 （数量）（数量） 所

10、占比例所占比例 （）（） 空白空白 （数量）（数量） 所占比例所占比例 （）（） 高压消毒锅高压消毒锅5 541.6741.674 433.3333.333 32525 内循环式内循环式4 433.3333.334 433.3333.334 433.3333.33 20062006年是否进年是否进 行过测试验证行过测试验证 2 216.6716.675 541.6741.675 541.6741.67 培养箱培养箱111191.6791.671 18.338.330 00 0 洗眼器洗眼器2 216.6716.67101083.3383.330 00 0 洗手池洗手池101083.3383.3

11、32 216.6716.670 00 0 消毒喷雾装置消毒喷雾装置3 325259 975750 00 0 3、管理情况 表3 实验室管理情况汇总表 表3 实验室管理情况汇总表 实验室管理情况 有（数量） 所占比例 （） 无（数量） 所占比例 （） 空白 （数量） 所占比例 （） 生物安全委员会758.33541.6700 生物安全手册433.33866.6700 标准操作程序SOP1083.33216.6700 应急预案758.33541.6700 内部人员培训866.67433.3300 定点医院650433.33216.67 工作人员健康档案758.33541.6700 存在主要问题 基

12、本设施设备未全部落实 n实验室管理体系还没有建立完善 n管理制度不规范 n部分实验室存在一定的安全隐患（结核病实验 室问题相对比较严重） 总体上与浙江省二级生物安全实验室技术规 范（试行）的要求还有较大的差距。 如何加强实验室的规范化建设？ n备案？ n资格评审？ n监督检查？ n示范实验室建设 建设示范实验室目的 n为进一步加快我省二级生物安全实验室 的规范化建设工作，减少和避免实验室 生物安全事故，提高实验室管理水平 建设目标 n通过示范实验室的建设和运行，不断总 结经验，完善二级生物安全实验室技术 规范，分期分批建设一批覆盖各个系统 和各个专业领域的示范实验室。 建设思路 n选择条件基础

13、好实验室 n专家指导下建设 n边建设边规范 n建设后推广示范 建设方式和要求 n（一）建设方式 n采用公开自主申报的形式，分期分批建 设一批示范实验室。优先考虑具有较好 的硬件和管理基础，建设后对全省各行 业以及艾滋病、结核病、PCR等各类专业 实验室具有示范作用的二级生物安全实 验室。 n（二）建设周期和主要任务 n示范实验室建设周期一般为1年，在建期 间实验室严格按照国家和浙江省生物安 全实验室建设和管理的有关规定。 n建设结束后完成建设总结报告，提供相 关的技术资料。 管理 n省级专家组或专门的机构，负责对全省 示范实验室建设工作进行技术指导、评 价和管理等工作。 n示范实验室建设经费主

14、要由实验室所在 单位自行解决，当地卫生行政部门应给 予大力支持。省卫生厅将根据情况给予 一定的建设经费。 评估 n建设结束后由省卫生厅组织专家组进行 现场评估（评估标准另行下发）。 n评估的主要方式： n、听取建设单位汇报 n、现场实地查看实验室 n、查看实验室档案，各类记录材料 n、对实验室工作人员和管理人员进行 理论测试。 评估 n对于评估合格的由省级卫生行政部门授予浙江 省二级生物安全示范实验室的称号。 n授牌后省卫生厅可以不定期组织专家进行检查， 一旦发现有不符合要求的可以撤销示范实验室 称号。 n对全省二级生物安全实验室建设和管理作出特 别贡献的实验室或个人给予一定的奖励。 n示范实

15、验室建设后将积极组织通过图片或视频 等多种途径进行推广，实验室有义务向全省各 级各类二级生物安全实验室单位开放。 申报时间和要求 n08年示范实验室申报时间以卫生厅通知为准， n有关材料将放在省卫生厅网站。 二、二级生物安全示范实验室建设基本要求 （一）实验室建筑与设施设备 1、实验室选址和布局 n实验室应设在耐火等级不低于二级的建筑 物内，抗震等级应不低于乙类建筑。 n无须特殊选址，可与其它实验区共用建筑， 但要求形成相对独立区域。 n实验室整体布局应有利于形成合理的人流 和物流分布，应遵循污染区远离人群活动 频繁区域的原则。 n与办公用房和其它公共用房隔离，尽量自成一区或设 在建筑物的一端

16、，远离公共活动场所。 n功能接近的实验室最好集中布局，尽可能减少对其它 区域的影响。 n污染程度高的区域（如结核病、HIV、肝炎等实验室） 不要和污染比较低的实验室（卫生产品检测实验室） 交叉布局，应尽量将相对危害程度高，容易扩散的病 原微生物检测实验区要设置在实验室末端。 n内部平面布局一般应分成清洁区和污染区，根据涉及 的病原微生物危害程度，必要时可增加半污染区。 n若为负压BSL2实验室，在实验区（污染区）和清洁 区之间还应考虑设置缓冲区。 注意：注意： 2、开间大小 n开间模数以满足工作需要、方便操作、减少浪费为原 则。 n大多采用3.24.0M之间，但以3.6M较为理想。开间模 数过

17、大则会增加控制难度，面积要求上并不追求大开 间。 n污染区（检测区）以15 M2 左右为宜。 n缓冲区以23 M2为宜，准备区（半污染区）不宜过大。 n不能在此区域进行任何可能造成污染的实验操作。 3、地面与墙面要求 n实验室地面选材要求采用耐腐蚀、耐磨损、易 清洁的防滑建筑材料，满足整体无缝隙要求， 较多采用环氧树脂自流坪或PVC卷材，有条件 的也可采用橡胶地板或橡塑地板。 n墙体选用表面吸附性小、易清洗、光滑平整的 材料。可优先选用厚度薄、保温性好、施工方 便、牢度有保障的新型轻质板材，有利于今后 实验室的改、扩、建，但应能满足实验室的气 密性要求。 4、主要设施 实验室应设可自动关闭的带

18、锁的门，实验时 门应呈关闭状态。 在实验结束后实验室应呈锁 闭状态。 实验室的门或墙上应有可视窗。 BSL-2实验室可采用窗户进行自然通风，但应设防虫 纱窗、有防节肢动物设施 n 自动关门装置自动关门装置 n实验室应设洗手池， 宜设置在靠近出口 处，洗手龙头应为 自动感应式、长手 柄式或脚踏式，备 有洗手皂液，必要 时配备快速消毒洗 手液。 n 在室内应安装洗眼装 置 n如果需要洗眼器，则应 安装在BSL2实验室 内靠近出口的地方。 有特殊要求的可设紧急喷淋装置有特殊要求的可设紧急喷淋装置 n实验室应有可靠的电力供应和应急照明。 n实验室入口处，应有明显的安全标识和工作 状态显示灯。 n在实验

19、室内，应有在黑暗中可明确辨认方向 的标识和紧急发光疏散指示标志。 5.设备 n必须配备生物安全柜 n主要使用级生物安全柜（A1型、A2型、B1型、 B2型） n常用的是A2型或B2型。 n根据所需保护的实验对象的类型，个体防护要求， 是否暴露于放射性核素和挥发性有毒化学品，或其 他特殊性的工作要求来选择生物安全柜的类型。 级A2型生物安全柜用于进行以微量挥发性有毒化学品 和痕量放射性核素为辅助剂的微生物实验时，必须连接 功能合适的排风罩。气流70%循环使用，30%外排。 n级B2型生物安全柜经高效过滤器过滤后通过排气管 道排到实验室外的大气中，不再循环使用。可以用于 以挥发性有毒化学品和放射性

20、核素为辅助剂的微生物 实验。 生物安全柜的放置 n有定向气流的实验室：应处于空气气流方向 的下游。 n无定向气流的实验室：放置在人员走动较少， 离入口处较远的位置，生物安全柜后壁应留 出30cm左右的维护与保养距离。 n不应放置在容易形成穿堂风的位置。 高压灭菌器 n高压灭菌器一般应放置在实验室内。 n要按期检查和验证，做好记录，确保消毒效 果和使用安全。 n高压蒸汽灭菌器的安全、计量鉴（检）定和 管理应符合国家压力容器管理的有关规定， n使用人员应经专业岗位培训并取得上岗证， 使用后应作好使用记录。 n生物安全柜每年检 测一次，高压灭菌 器每半年检测一次。 生物安全防护设备和检 测设备应定期

21、进行运行 状态的检定和校准。 六、给排水要求 n给水没有特别的要求。 n实验室的废水排放必须符合环境保护要求，要 求生物安全实验室设立独立的污水处理系统。 n实验废水必须事先进行无害化处理，符合相关 要求后才能向外排放。 n实验废水属于含有致病微生物的实验废水，其 废水排放应通过设置专用的排水管道及污水消 毒池收集，经按国家有关规定处理方法处理后 安全排放。 （二） 管理体系与制度 n成立实验室生物安全委员会 n指定专门的生物安全管理部门或负责人 n实验室负责人 n实验室生物安全管理人员 n生物安全委员会 生物安全委员会成员可以由单位负责人、生物安全 管理人员、医学专家、顾问组成。 （一）负责

22、建立本单位生物安全管理体系，明确职 责，指定本单位生物安全管理责任部门和负责人 ； （二）每年定期召开生物安全管理会议，对实验室 生物安全相关的重大事项作出决定； （三）批准和发布单位实验室生物安全手册、生物 危害评估等重要文件； （四）对本单位上报的二级生物安全实验室备案材 料进行审核； （五）对本单位在二级生物安全实验室开展的第一 、第二类病原微生物的实验活动进行审查。 单位生物安全管理责任部门和负责人 （一）负责组织制（修）订和实施本单位实验室生物安全手册； n（二）负责组织专家对涉及的生物因子、使用动物、重组DNA以及基因 修饰物质的研究方案进行审查和风险评估； n（三）负责对本单位实

23、验室生物安全防护，微生物菌（毒）种和生物 样本保存和使用，实验室安全操作，实验室废气、废水、废弃物处置 和消毒灭菌等规章制度实施情况进行监督、检查，并定期评估实施效 果； n（四）负责组织学习国内和省内实验室生物安全管理最新动态； n（五）负责定期调查、了解实验室工作的健康状况和健康监护情况； n（六）组织本单位生物安全知识培训并对培训效果进行评价。 n、全面负责本实验室的生物安全工作； n、批准进修、后勤、检查、参观等非实验室人员在符合要求 n的情况下暂时进入本实验室； n、确保在本实验室内，生物安全的有关法律法规和规范程序 n得到执行，对违规行为有权作出停止实验的决定； n、任命本实验室的

24、生物安全管理员； n、负责组织制定和实施本实验室的应急处置预案； n、负责组织本实验室安全事故的现场处置和调查，并将调查 n结果以及处理意见向所在单位的生物安全管理责任部门报告； n、负责对涉及感染性物质的研究计划、方案以及操作程序等 n进行实施前的生物安全审查。 实验室负责人 重点考虑因素之一 n生物安全管理员 n具体负责本实验室的生物安全工作。 n开展实验室生物安全法律法规以及规范程序等方面的咨 n询工作； n就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定 n期的内部安全检查； n纠正违反生物安全操作规程的行为； n在出现潜在感染性物质溢出或其他事故时，协助事故调查； n检查和监督实验

25、室废弃物的有效管理与安全处置； n检查和监督实验室各项消毒灭菌措施的落实情况。 n生物因子生物危害评估报告 n标准操作程序 n设施设备的建设与配置 n菌（毒）种和生物样本管理制度 n实验废弃物处置制度 n消毒灭菌制度 n人员培训制度 n个人安全防护制度 n意外事故应对制度 n实验室生物危险标识使用规定 n其他重要规章制度 生物安全管理制度 标准操作程序 n实验室应在危害评估的基础上建立标准操作程序和 使用操作规程，这些程序应包括以下内容： n第一、第二类病原微生物实验活动及对安全性有较 大影响 的特定实验活动的标准操作程序； n移液管和移液辅助器使用规程； n生物安全柜使用规程； n离心机使用

26、规程； n匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器使用规程； n尖锐利器使用规程； n样本分离操作规程； n洗手操作规程； n其他有必要制定的操作规程。 （三）菌（毒）种和生物样本管理 n、生物样本采集 n生物样本采集应符合国家有关规定和技术标准的 要求。 n样本采集人员应掌握相关专业知识和操作技能， 并具有与采集病原微生物样本危害等级相适应的 生物安全防护装备和防止扩散污染的措施。 n样本采集人员应对样本的来源、采集时间、采集 人员等做好记录。 n、运输 n高致病性（或疑似）的病原微生物菌（毒） 种和生物样本的运送应按卫生部可感染人 类的高致病原微生物菌（毒）种或生物样本 运输管理规定执行。 n非高

27、致病性的病原微生物菌（毒）种和生物 样本的运送应由专人负责，专车运送，运送 人员应经过培训取得相关资质，不得通过公 共交通工具运送，运送过程应采取相应的防 护措施。 n单位内部运送病原微生物菌（毒）种和生物 样本的容器或包装材料应满足生物安全防护 的要求，应密封，防水、防破损、防外泄。 n外送病原微生物菌（毒）种和生物样本的容 器或包装材料应满足国际民航组织危险品 航空安全运输技术细则（Doc9284包装说 明PI650）规定的包装要求，具体使用的包 装要按照卫生部人间传染的病原微生物名 录中规定的运输包装要求执行。 n最外层的容器或包装材料上应按规定做好生 物安全警示标识。 nA 类感染性物

28、质 n是指在运输过程中如发生暴露情况能对人或动 物造成永久性失残，危及生命或患上致命疾病 的感染性物质。 n符合此标准的感染性物质中，使人感染或使人 和动物都染病的必须划入UN2814 （运输名称：危害人的感染性物质） n仅使动物染病的必须划入UN2900（运输名称： 危害动物的感染性物质）。 nB 类感染性物质 n不符合列入A类标准的感染性物质。B类感染性 物质应划入UN3373 n运输名称：诊断样品或临床样品 标准包装 n三层包装标准 n主容器：玻璃、金属或塑料，防漏密封 n辅助包装：在-40至+55温度范围内必须能 承受不低于95kPa压差内压而无渗漏 n外包装：强度满足其容积、重量及使

29、用要求。 外尺寸，最小边长不小于100mm 包装要求 n除固体感染性物质，必须在主容器和辅助包装 之间填充足量的吸附材料，能够吸收所有内装 物 n多个主容器装入一个辅助包装时，应将它们分 别包裹或隔离，以防彼此接触 n在冷藏或冷冻条件下运输物质：冰、干冰或其 它冷冻剂必须放在辅助包装周围，内部有支撑 物固定辅助包装。 类包装 类包装 n、藏菌（毒）种保藏 n实验室保藏菌（毒）种和生物样本应符合国家相关规定。 实验室应指定专人负责菌（毒）种和生物样本的保藏，双 人双锁，并建立所保藏的菌（毒）种和生物样本名录清单。 n保藏的菌（毒）种和生物样本应设立专册（卡），详细记 录编号、名称、来源、鉴定的日

30、期和结果、鉴定者、所用 的培养基、保藏的方法、传代次数等。 n实验室应建立菌（毒）种和生物样本的销毁制度，销毁保 存的菌（毒）种和生物样本应经实验室负责人批准，并在 专册（卡）上注消并注明原因、时间、方法、数量、经办 人等。 、建立实验废弃物无害化处置工作程序。废弃物处置 应由专人负责处理。 、实验室所有污染的实验器材和废弃物应经灭菌消毒 后才能拿出实验室，实验室污水须经无害化处理后排放。 、实验用一次性个人防护用品和实验器材、弃置的菌 （毒）种、生物样本、培养物和被污染的废弃物应在实 验室同一建筑内消毒灭菌，达到生物安全后再按感染性 质废弃物收集处理。 、实验用非一次性个人防护用品和实验器材

31、，应放置 在有生物安全标记的防漏袋中送到指定地点消毒灭菌后 方可清洗，运送过程中应防止有害生物因子的扩散。 （四）废弃物处置 、实验废弃物中可能含有的高危险废弃物，应在实验 室内进行高压灭菌消毒，用带有安全标识的包装容器或 包装物，密闭包装后才能带出实验室，外包装必须保持 清洁，并有是否消毒的明晰标识。 、实验室应对相关医疗废弃物进行登记，登记内容包 括废弃物的来源、种类、重量或者数量、交接时间、处 置方法、最终去向以及经办人签名等项目。登记资料至 少保存5年。并采取有效措施，防止废弃物流失、泄漏、 扩散。 、实验室所在单位应及时收集相关废弃物，并按照类 别分置于防渗漏、防锐器穿透的专用包装物

32、或者密闭的 包装容器内。严禁使用破损的包装容器，严禁包装容器 超量盛装。 、相关废弃物专用包装物、包装容器，应当有明显的 警示标识和警示说明，不得露天存放。废弃物暂时贮存 的时间最长不得超过天。应当根据就近集中处置的原 则，及时将相关废弃物交由符合资质条件的医疗废物处 置中心集中处置。 （五）消毒灭菌 n实验室应编写针对各种设施、设备、工作环境、 污染状态的消毒操作规程。 n实验室必须对消毒、灭菌效果定期进行监测。 灭菌合格率必须达到100%，消毒不合格的物品 不得离开实验室 （六）人员培训与健康监测 n实验室人员应该具备相应的专业知识和专业技 能，参加省级或市级卫生行政部门组织的生物 安全培训，并取得省卫生厅颁发的实验室生物 安全培训合格证书。 n实验室所在单位每年应对实验室人员、辅助人 员和其他有关人员开展生物安全培训。培训应 该有相应的记录。 n实验室工作人员均应建立健康监护 档案。 n每年应对实验室人员进行常规体检。 n设立定点就诊医院。 （七） 生物危害标识使用 n二级生物安全实验室门口、可能存在危 害的设备等显著位置张贴生物危害标识 n门口的生物危害标识下方注明“二级生 物安