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文档简介

1、 实验目的：实验目的： 掌握细菌分离、移植培养技术； 学会细菌培养用器皿的准备。 实验材料：实验材料： （1）菌种：大肠杆菌琼脂平板。 （2）培养基：普通肉汤和普通琼脂斜面、普通 琼脂平板。 （3）其他材料：记号笔、酒精灯、接种环、试 管架。 （4）实验仪器：37度温箱 实验内容：实验内容： 分离培养、纯培养、移植培养 分离培养：把病料中的病原微生物或者把目的菌 从微生物的混合材料中分离培养出来的方法。用于分 离细菌、真菌、支原体等微生物。 移植培养：将某种细菌培养物接种到新的培养基 中，使其生长繁殖的方法。 纯培养：将只含一种细菌的培养物进行的 移植培养。 菌落：由一个细菌细胞在固体培养基上

2、生 长繁殖形成的细菌群体培养物。 细菌 分离培养 菌落 移植培养 纯培 养物。 2.2.需氧菌分离需氧菌分离 一般采用平板划线培养法。 (1)(1)平板划线接种法平板划线接种法 采取三区划线法，通过在平板上划线，将混杂 的细菌在平板表面充分地分散开，使单个细菌能固定 在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种 的目的。 Inoculation 3.3.厌氧菌的分离培养厌氧菌的分离培养 操作方法同需氧菌的划线法 采取化学吸氧法 生物学方法 物理学方法创造厌氧环境，使厌氧菌能够 生长繁殖。 4. 细菌的移植细菌的移植 （1)两试管斜面移植两试管斜面移植 左手持菌种管和待接种管，使管口互相并齐，

3、管底部放 在拇指和食指之间，松动两管棉塞，以便接种时容易拔出。右 手持接种棒，在火焰上灭菌后，用右手小指和无名指并齐同时 拔出两管棉塞，将管口进行火焰灭菌，使其靠近火焰。将接种 环伸入菌种管内，先接触管壁使之冷却，再挑取少许细菌后拉 出接种环立即伸入另一管培养基上，勿碰及斜面和管壁，直达 斜面底部。 从斜面底部开始划曲线，向上至斜面顶端为止，管口通过火 焰灭菌，将棉塞塞好。接种完毕，接种环通过火焰灭菌后插到试 管架上。最后在斜面管壁上注明菌名、日期和接种者，置37温 箱中培养。 (2)从平板移植到斜面从平板移植到斜面 从平板培养基上选取可疑菌落移植到琼脂斜 面上作纯培养时，用右手执接种环，将接

4、种环火 焰灭菌，左手打开平皿盖，挑取可疑菌落，左手 盖上平皿盖后立即取斜面管，按上述方法进行接 种、培养。 (3)从斜面移植到液体培养基从斜面移植到液体培养基 将已取有菌种的接种环伸入到液体培养基中， 并使环在液体与管壁接触的部位轻轻摩擦，使菌 体分散于液体中。接种后塞上棉塞，将液体培养 基轻轻晃动，使菌体均匀分布于液体中，以利生 长。 (4)从液体移植到液体培养基 需用无菌移液器、移液管或接种环等。本实验室 常用移液器。取移液器，套上已灭菌的枪头，在火焰 旁伸入菌种管内，吸取菌液，转接到待接种的液体培 养基内。烧灼管口，塞好棉塞，进行培养。 (5)从液体移植到斜面 方法同（1） (6)半固体移植半固体移植 采用穿刺法接种 方法基本上与纯培养接种相 同，不同的是用接种针挑取菌落，垂直刺人

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