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文档简介
1、 2010 Mindray Confidential n 1n 2021-6-17 2010 Mindray Confidential BriCyteBriCyte E6 E6流式细胞仪流式细胞仪 2010 Mindray Confidential n 2n 2021-6-17 流式细胞仪基础知识流式细胞仪基础知识 目录目录 竞争产品介绍竞争产品介绍 流式细胞术应用流式细胞术应用 迈瑞流式细胞仪迈瑞流式细胞仪BriCyteBriCyte E6 E6介绍介绍 2010 Mindray Confidential n 3n 2021-6-17 2010 Mindray Confidential 流式
2、细胞仪基础知识流式细胞仪基础知识 2010 Mindray Confidential n 4n 2021-6-17 流式细胞仪的定义流式细胞仪的定义 流式细胞仪流式细胞仪( (flow cytometer) ): 是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计 算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的 高科技仪器。可对单个生物颗粒在流动状态进行分子功能水 平上的定量定性分析。 研究对象:生物颗粒; 检测信号:光信号(散射光,荧光); 分析特点:快速,特异,准确,客观,多参数; 2010 Mindray Confidential n 5n 2021-6-17 流式细胞仪基本构造流式
3、细胞仪基本构造 液流系统 光学系统 电子系统 数据分析系统 2010 Mindray Confidential n 6n 2021-6-17 流式细胞仪分析流程流式细胞仪分析流程 流式细胞仪检测 单个细胞悬液制备 样本细胞荧光标记 数据分析处理 1 2 3 4 2010 Mindray Confidential n 7n 2021-6-17 FL4 FL6 FL5 (PE-cy7) FL3 (PerCP) FL2 (PE) FL1 (FITC) SS 488/10 530/30 FS 488/10 585/40 785/60 670LP 491/LP 550LP 645LP 660/20 78
4、5/60 740LP 488/10 反光镜 t v FL6 (APC-cy7) FL4 (APC) 反光镜 t v t v t v t v t v t v t v FSC SSC FL1 FL2 FL3 FL5 流式细胞仪工作原理 2010 Mindray Confidential n 8n 2021-6-17 常用常用的激光器和的激光器和 标记标记单克隆抗体的荧光素单克隆抗体的荧光素 488nm激光激发: FITC(异硫氰酸荧光素): 荧光强度可受pH的影响,当pH降低 时其荧光强度也随之减弱 PE(藻红蛋白) PerCP(多甲藻叶绿素蛋白):光量子产量并不太高,最好应用在 检测表达较高的抗
5、原上 PerCP-Cy5.5(叶绿素蛋白偶联物) PE-Cy7(藻红蛋白偶联物) PE-Cy5(藻红蛋白偶联物) PE-Texas Red(藻红蛋白-德州红偶联物) 638nm激光激发: APC(别藻青蛋白) APC-Cy7(别藻青蛋白偶联物) 2010 Mindray Confidential n 9n 2021-6-17 荧光素的选择荧光素的选择 2010 Mindray Confidential n 10n 2021-6-17 FITC 530/30 PE 585/40 荧光补偿 + +FITC通道信号=PE通道信号= 实测实测真实真实 由于每一种荧光素分子都发射某一特定波长范围内的光,
6、然而这些荧光的 发射光谱会发生部分重叠,有时这种重叠现象非常显著。 为了能够在存在荧光泄露的情况下,得到真实的多色荧光发射信号,在流 式细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法,通过测得信号经修正得到真实信号 加以使用。 2010 Mindray Confidential n 11n 2021-6-17 数据分析-图形类型 直方图直方图 数据显示数据显示 散点图散点图 等高线图等高线图 密度图密度图 三维图三维图 2010 Mindray Confidential n 12n 2021-6-17 散射光双参数散点图 2010 Mindray Confidential n 13n 2021-6-17
7、荧光双参数散点图荧光双参数散点图 2010 Mindray Confidential n 14n 2021-6-17 流式细胞仪与几种检验仪器的比较流式细胞仪与几种检验仪器的比较 项目项目流式细胞仪流式细胞仪血球仪血球仪生化分析仪生化分析仪免疫分析仪免疫分析仪 测试对象细胞细胞(测量设置全部固定化)血清血清 测试目标物理或化学性质(如细胞大 小、内部复杂程度、DNA含 量); 小分子物质(如抗原,抗体) 物理或化学性质(如细胞大小、 内部复杂程度、DNA含量) 化学成分和一些小分子物 质(如钾、钠、钙、酶) 小分子物质(如抗原、 抗体、激素) 测试原理流式细胞术+抗原抗体反应流式细胞术化学比色
8、法抗原抗体反应 计量百分比或绝对计数 (如 %、*个/uL); 物质的量或定性判定 (L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性) 百分比和绝对计数 (如 %、*个/L) 物质的量 (mol/L) 物质的量或定性判定 (L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性) 宏观和微观测量宏观对象(细胞)上的 微观物质(抗原、看不见、 摸不到) 测定宏观对象(细胞)上的宏 观物质(物理、复杂度、含量, 看得见、摸得到) 测量微观物质(可溶性成 分和一些小分子物质,看 不见、摸不到) 测量微观物质(小分子 物质,看不见、摸不到) 输出 2010 Mindray Confidential n 15n 2021-
9、6-17 2010 Mindray Confidential 流式细胞术应用流式细胞术应用 2010 Mindray Confidential n 16n 2021-6-17 临床研究临床研究 血液,肿瘤,血液,肿瘤, 药理,免疫药理,免疫 生物学研究生物学研究 遗传,生殖,遗传,生殖, 微生物,细胞微生物,细胞 生物,毒理,生物,毒理, 分子生物分子生物 农业畜牧业 选种,育种 环境研究环境研究 湖泊,海洋湖泊,海洋 生态研究生态研究 食品制药工业食品制药工业 食品检测、药物筛食品检测、药物筛 选,疫苗研究选,疫苗研究 流式细胞仪的应用 2010 Mindray Confidential n
10、 17n 2021-6-17 主要科室主要科室: 检验科、中心实验室、血液科、肿瘤科、病理科、肾病研究、免疫中心、 国内三甲医院中流式细胞仪分布图(2012年) 112, 41% 64, 24% 26, 10% 3, 1% 11, 4% 9, 3% 4, 1% 4, 1% 3, 1% 2, 1% 2, 1% 3, 1% 3, 1% 2, 1% 3, 1% 2, 1% 2, 1% 15, 6% 检验科 中心实验室 血液科 血液病研究所 肿瘤科 分子生物中心 病理科 感染科 肾病实验室 肝病研究所 肺病研究所 肾病研究所 免疫中心 内科 外科 放射科 皮肤科 其他 流式细胞仪的临床应用 2010
11、Mindray Confidential n 18n 2021-6-17 主要项目:主要项目: 淋巴细胞亚群分析 HLA-B27检测 白血病免疫分型 急性白血病、慢性淋巴增生性疾病(CLD)/淋巴瘤 造血干细胞分析 造血干细胞相对计数; 造血干细胞绝对计数; 阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断 CD55/CD59检测 血小板相关分析 血小板计数、血小板免疫表型分析 细胞周期与DNA倍体分析 流式细胞仪的临床应用 2010 Mindray Confidential n 19n 2021-6-17 淋巴细胞根据功能分类淋巴细胞根据功能分类 淋巴细胞种类特异性分子标记 T淋巴细胞淋巴细胞CD3+
12、 B淋巴细胞淋巴细胞CD3-CD19+ NK淋巴细胞淋巴细胞CD3-CD16+CD56+ T淋巴细胞根据表面分子分类淋巴细胞根据表面分子分类 淋巴细胞种类特异性分子标记 T辅助辅助/诱导淋巴细胞诱导淋巴细胞CD3 + CD4 + T抑制抑制/细胞毒淋巴细胞细胞毒淋巴细胞 CD3 + CD8 + 淋巴细胞亚群分析 2010 Mindray Confidential n 20n 2021-6-17 淋巴细胞亚群分析的临床应用 淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的免疫免疫 功能状态功能状态,主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能。在临床,主要包括细胞免疫功
13、能和体液免疫功能。在临床 上,主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关上,主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关疾病的疾病的辅助诊辅助诊 断,分析疾病的发病机理,断,分析疾病的发病机理,监控监控疾病的疾病的病程病程进展,进展,观测疗效观测疗效 及及监测预后监测预后等等。等等。 2010 Mindray Confidential n 21n 2021-6-17 淋巴细胞亚群分析在肿瘤内科中的应用 临床意义临床意义CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8+ B细胞细胞NK细胞细胞 肿瘤进展 预后不良 复发转移 有效手术 有效化疗 2010 Mindray Confidentia
14、l n 22n 2021-6-17 临床意义临床意义CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8+ B细胞细胞NK细胞细胞 SLE 类风湿性 关节炎 自身免疫 性溶血性 贫血 重症肌无 力 免疫缺陷 病 淋巴细胞亚群分析在风湿免疫科中的应用 2010 Mindray Confidential n 23n 2021-6-17 急性排斥反应是器官移植的第一大障碍;急性排斥反应是器官移植的第一大障碍; 动态观测受者淋巴细胞亚群变化特点,对判断急性排斥 反应和估计移植后感染等预后具有重要意义; 当CD4+ / CD8+比值持续升高且大于1.2时应当考虑排斥 发生;当CD4+ /
15、CD8+比值持续降低表明移植后出现感 染;若CD4+ / CD8+比值小于0.2时,应立即停用免疫抑 制剂; 淋巴细胞亚群分析在器官移植中的应用 2010 Mindray Confidential n 24n 2021-6-17 常见疾病的淋巴细胞亚群变化 细胞亚群细胞亚群变化变化常见疾病常见疾病 CD3+T细胞 增高 T系淋巴细胞白血病、SLE、重症肌无力、慢性活动性肝炎; 降低 恶性肿瘤晚期、B系细胞白血病、多发性骨髓瘤,传染性单核细胞 增多症、免疫缺陷病; CD3+ CD4+ T细胞 增高 类风湿(活动期)、自身溶血性贫血; 降低 AIDS、肿瘤晚期、巨细胞病毒感染、麻风、血小板减少;
16、CD3+ CD8+ T 细胞 增高 病毒感染(HBV、EB)、肿瘤、传染性单核细胞增多症; 降低 类风湿、重症肌无力、免疫缺陷病、肿瘤放射治疗; (CD3+ CD4+ ) / ( CD3+ CD8+ )比 值 增高 类风湿、重症肌无力、SLE、自身溶血性贫血; 降低 AIDS、传染性单核细胞增多症、病毒感染、肿瘤; B细胞 增高 MM、巨球蛋白血症、淋巴瘤、AIDS; 降低 先天性免疫缺陷病、恶性肿瘤; NK细胞 增高 病毒感染早期、骨髓移植术后、习惯性流产; 降低 恶性肿瘤、部分病毒细菌和真菌感染; 2010 Mindray Confidential n 25n 2021-6-17 HLA-
17、B27检测与强直性脊柱炎诊断 强直性脊柱炎(强直性脊柱炎(AS)定义:)定义: 一种慢性、进行性和炎性疾病,主要累计骶髂关节、脊柱、脊柱软组一种慢性、进行性和炎性疾病,主要累计骶髂关节、脊柱、脊柱软组 织及四肢关节,表现为椎间盘纤维环和纤维环结缔组织的骨化,椎间动关节织及四肢关节,表现为椎间盘纤维环和纤维环结缔组织的骨化,椎间动关节 和四肢关节滑膜的炎症和增生,严重者可失去劳动能力。和四肢关节滑膜的炎症和增生,严重者可失去劳动能力。 淋巴细胞淋巴细胞HLA-B27检测在检测在AS中的诊断价值:中的诊断价值: 许多研究证据表明人群中许多研究证据表明人群中HLA-B27的表达频率与的表达频率与AS
18、的发病率高度相关;的发病率高度相关; AS患者中患者中HLA-B27的阳性率显著高于普通人群,高达的阳性率显著高于普通人群,高达90%以上,而普通人以上,而普通人 群群HLA-B27的阳性率低于的阳性率低于10%,HLA-B27阴性的普通人群未患阴性的普通人群未患AS的几率的几率 为为99.9%; HLA-B27检测阳性可显著增加正确诊断检测阳性可显著增加正确诊断AS的几率,的几率,阴性则为排除阴性则为排除AS的诊的诊 断提供了有力的证据断提供了有力的证据; 2010 Mindray Confidential n 26n 2021-6-17 TBNK四色试剂盒 简单准确的淋巴细胞亚群的分型方简
19、单准确的淋巴细胞亚群的分型方 案案双管四色双管四色; ; 无需仪器设置,信号采集、分析与无需仪器设置,信号采集、分析与 报告一键式解决方案报告一键式解决方案全自动全自动 TBNKTBNK四色试剂盒配套分析软件四色试剂盒配套分析软件; ; 检测结果准确可靠,阳性细胞峰荧检测结果准确可靠,阳性细胞峰荧 光强度高,阴阳性细胞群分离度光强度高,阴阳性细胞群分离度 好好试剂分析性能优于同类主流试剂分析性能优于同类主流 产品;产品; 2010 Mindray Confidential n 27n 2021-6-17 HLA-B27检测双色试剂 有效排除有效排除HLA-B7HLA-B7和非特异性吸和非特异性
20、吸 附带来的假阳性并且准确识别附带来的假阳性并且准确识别 HLA-B27/HLA-B7HLA-B27/HLA-B7双阳性样本双阳性样本 HLA-B27/HLA-B7HLA-B27/HLA-B7双抗原与同双抗原与同 型对照双管分析设计型对照双管分析设计; ; 无需仪器设置,信号采集、分无需仪器设置,信号采集、分 析与报告一键式解决方案析与报告一键式解决方案 全自动全自动HLA-B27HLA-B27检测双色试剂检测双色试剂 配套分析软件配套分析软件; ; 2010 Mindray Confidential n 28n 2021-6-17 2010 Mindray Confidential 迈瑞流式
21、细胞仪迈瑞流式细胞仪BricyteBricyte E6 E6介绍介绍 2010 Mindray Confidential n 29n 2021-6-17 全中文操作界面全中文操作界面 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 30n 2021-6-17 LIS Laboratory Information System 条码扫描仪条码扫描仪 条码扫描仪通过扫描含条码扫描仪通过扫描含lis编码的条码,可直编码的条码,可直 接从接从lis库中调取样本信息,如库中调取样本信息,如“姓名姓名”、 “年龄年龄”等,并录入软件相应界
22、面。等,并录入软件相应界面。 MRFLOW MRFLOW软件将测试完成的样本通过软件将测试完成的样本通过“审审 核核”按钮,直接传入按钮,直接传入“LIS”系统。系统。 智能化的获取和传递智能化的获取和传递 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 31n 2021-6-17 机型机型支持上样容器种类支持上样容器种类图片图片 自动进样机型自动进样机型 1275 mm试管试管 (每盘容纳(每盘容纳40管)管) 手动上样机型手动上样机型 1275 mm试管试管 1.5mL、2mL微量离心管微量离心管 灵活多样的进样方式灵活多
23、样的进样方式 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 32n 2021-6-17 自动测试自动测试 智能化自动设置智能化自动设置 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 手动测试手动测试 2010 Mindray Confidential n 33n 2021-6-17 自动电压自动电压 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 34n 2021-6-17 8.00 自动荧光补偿自动荧光补偿 BriCyteBriCyte E6
24、 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 35n 2021-6-17 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 36n 2021-6-17 全封闭光路,恶劣环境有效全封闭光路,恶劣环境有效 防尘,光路不受影响防尘,光路不受影响 智能光学温控,智能光学温控,15-32 性性 能稳定能稳定 插拔式滤光片,支持更多插拔式滤光片,支持更多 荧光素搭配荧光素搭配 先进的光路设计模式先进的光路设计模式 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Con
25、fidential n 37n 2021-6-17 低生物风险低携带污染率的低生物风险低携带污染率的 拭子式进样针自动清洗模块拭子式进样针自动清洗模块 可使鞘液充分消耗的高精可使鞘液充分消耗的高精 度检测装置。度检测装置。 报警时鞘液液位1/2 卓越的液流检测系统卓越的液流检测系统 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 38n 2021-6-17 部件部件BriCyteBriCyte E6 E6BDBD FACSCantoFACSCanto II IIBCI FC500BCI FC500 仪器仪器 尺寸尺寸* *(m
26、m(mm,宽,宽高高深深) )500500500500550550910910630630610610610610978978889889 重量重量* *(Kg)(Kg)60608585146146 液流车液流车小型试剂组件小型试剂组件大大 内置鞘液桶、清洗内置鞘液桶、清洗 液桶、外置废液桶液桶、外置废液桶 气源气源无无有有有有 精致小巧的外形结构精致小巧的外形结构 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 39n 2021-6-17 项目项目BriCyteBriCyte E6 E6BDBD FACSCantoFACSC
27、anto II IIBCI FC500BCI FC500 采集速度采集速度12,00012,000个粒子个粒子/s/s10,00010,000个粒子个粒子/s/s3,3003,300个粒子个粒子/s/s 检测速度检测速度90 90 管管/h/h42 42 管管/h/h88 88 管管/h/h 携带污染率携带污染率 0.1% 0.1% 0.1% 0.1% 1% 1% 良好的性能检测结果良好的性能检测结果 BriCyteBriCyte E6 E6 产品特点产品特点 2010 Mindray Confidential n 40n 2021-6-17 无外接气源,低噪音无外接气源,低噪音 超快的测试速
28、度超快的测试速度 精致小巧的外形结构精致小巧的外形结构 报告格式自由编辑报告格式自由编辑 一键式故障解决方式一键式故障解决方式 防尘光路设计防尘光路设计 智能光学控温智能光学控温 插拔式滤光片布局插拔式滤光片布局 低携带污染率低携带污染率 鞘液充分消耗鞘液充分消耗 BriCyteBriCyte E6 E6 易易 智智 捷捷 简简 BriCyteBriCyte E6 E6 特点总结特点总结 中文界面 多样进样 自动设置 双向LIS 2010 Mindray Confidential n 41n 2021-6-17 竞争比较 型号 BD:CaliburBCI:FC500BD:Canto II Mi
29、ndray: BriCyte E6 上市时间 1994200220062014 配置 双光4色,市场装机基 本为开放进样机型 标配单激光5色自动进 样; 双激光5色自动进样 (基本没有出货量); 没有开放进样机型 双激光6色; 三激光8色; 上述配置分别有开放进样 机型和自动进样机型 双激光4色; 双激光5色; 双激光6色 上述配置分别有开放进样 机型和自动进样机型 优劣比较 已经上市20年,接近退 市; 产品陈旧,使用老苹果 系统年内; 产品不能升级; BCI临床主力机型; 软件复杂; 英文界面; 无自动算法软件; 不能直接连接LIS; BD临床中高端主力机型; 英文界面; 不能直接连接LI
30、S; 全中文界面(国际英文版 本); 双向LIS直连; 自动电压、补偿设置; 自动算法软件; 性能 精密度:CV3%精密度:CV2% 精密度:CV2%精密度:CV2% 灵敏度: 750 MESF 灵敏度: FITC 600 MESF; PE 300 MESF; APC 600 MESF 灵敏度: FITC100 灵敏度: FITC200 速度:10000个/秒 速度:3300个/秒 速度:10000个/秒 速度:12000个/秒 2010 Mindray Confidential n 42n 2021-6-17 竞争比较竞争比较 产品产品BricyteBricyte E6 E6BD BD Ca
31、liburCaliburBD Canto IIBD Canto IIBCI FC500BCI FC500BCI BCI NaviosNavios 上市时间20141994200620022009 Physical Dimensio ns尺寸和 重量 Cytomete r细胞仪 500*500*550914*673*615910*640*610900*610*889960*610*700 60kg109.1kg145kg84.8kg104kg Supply Cart液流 车 N/AN/A 790457724 640584298 610711495 515930 System Configura
32、tion仪器 配置 配置 双激光4色开放进 样及自动进样; 双激光5色开放进 样及自动进样; 双激光6色开放进 样及自动进样 双激光4色开放和自 动进样 双激光6色自动进样和开 放进样; 三激光8色自动进样和开 放进样 单激光5色自动进样; 双激光6色开放进样 双激光6色自动进样和开 放进样; 双激光8色自动进样和开 放进样; 双激光10色自动进样和 开放进样 2010 Mindray Confidential n 43n 2021-6-17 竞争比较 产品产品Bricyte E6Bricyte E6BD CaliburBD CaliburBD Canto IIBD Canto IIBCI F
33、C500BCI FC500BCI NaviosBCI Navios Laser Specificat ion 激光 器配置 Blue Laser蓝蓝 色激光器色激光器 Blue solid state diode, 488nm, 43mW Air-cooled argon-ion laser, 15 mW,488 nm Blue 488-nm solid state, 20-mW uniphase argon ion, 488nm, 20mW Blue solid state diode, 488nm, 22mW Red Lasr 红色激光红色激光 器器 Red solid state dio
34、de, 638nm, 55mW Optional second laser: 635 nm. 633-nm HeNe, 17-mW coherent red solid diode, 635nm, 25mW Red solid state diode, 638nm, 25mW Violet Laser紫色 激光器 N/AN/A 405-nm solid state diode, 30-mW N/A Violet solid state diode, 405nm, 40mW 是否温控 是是否否否是 Fluoresce nt Dyes 荧光素 Blue laser 蓝色激光 FITC, PE, P
35、erCP or PerCP-Cy5.5,PE- Cy7 FITC, PE/PI, PerCP FITC, PE, PerCP or PerCP-Cy5.5,PE-Cy7 FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7 FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7 Red laser 红色激光 APC, APC-Cy7APCAPC, APC-Cy7APC ,APCCy7, APC or Alexa Fluor 647, APCAlexa Fluor 700, APCCy7, APCAlexa Fluor 750 Violet laser紫色 激光
36、 N/AN/APacific Blue, AmCyanN/AN/A 2010 Mindray Confidential n 44n 2021-6-17 竞争比较 产品产品Bricyte E6Bricyte E6BD CaliburBD CaliburBD Canto IIBD Canto IIBCI FC500BCI FC500BCI NaviosBCI Navios Data Manage ment数据 管理 Workstati on外置工 作站 BD FACStation Mac Pro computer Software 流式软件 全中文软件全中文软件英文软件英文软件英文软件英文软件 自
37、动化软 件系统 集成自动淋巴亚群及集成自动淋巴亚群及 HLA-B27 有自动软件,但非集 成 有自动软件,但非集成NANA 自动设置 自动设置电压、荧光自动设置电压、荧光 补偿补偿 N/AN/AN/AN/A bi-LIS双向双向LIS直连直连需中间件需中间件需中间件需中间件 Signal Processin g信号处 理 Dynamic Range动 态范围 20bitFour Decade18-bitFour Decade20-bit data acquisition 2010 Mindray Confidential n 45n 2021-6-17 竞争比较 产品产品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI Navios 手动进样 支持试管 1275-mm试管,试管, 1.5mL或或2mL离心管离心管 1275mm test tube 试管 1275mm test tube 试管 N/AN/A 自动进样 Carousel Loader圆 盘进样器 40管 40 (12 x 75-mm) tubes per rack. 40-tube carousel32管 32管 Max Acquisition Rate 最大采集速度 12,000 events
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